全 文 :证实为白藜芦醇 , 其浓度 99%以上。
表 2 L9(34)正交实验
序号 A B C D 100 g虎杖中提取白藜芦醇量 /g
1 1 1 1 1 0. 168 7
2 1 2 2 2 0. 385 4
3 1 3 3 3 0. 358 2
4 2 1 2 3 0. 413 4
5 2 2 3 1 0. 428 3
6 2 3 1 2 0. 352 6
7 3 1 3 2 0. 466 0
8 3 2 1 3 0. 389 2
9 3 3 2 1 0. 512 1
K 1 0. 912 3 1. 408 1 0. 910 5 1. 109 1
K 2 1. 194 3 1. 202 9 1. 310 9 1. 204 0
K 3 1. 367 3 1. 222 9 1. 252 5 1. 160 8
R 0. 455 0 0. 174 8 0. 400 4 0. 094 9
表 3 方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F值 P值
A 0. 035 2 2 0. 017 6 23. 364 7 <0. 05
B 0. 006 1 2 0. 003 1 4. 054 4
C 0. 031 2 2 0. 015 6 20. 722 9 <0. 05
D 0. 001 5 2 0. 000 8 1. 000 0
3 讨论
在正交实验中提取 2次比 3次及提取 1. 0 h比提取 1. 5 h的
提取效果好 ,可能是 3次提的溶液体积比 2次提取的溶液体积
大 , 回收乙醇的时间较长;提取 1. 5 h所受热时间较长 , 白藜芦醇
长时间受热稳定性较差 ,所以表现为提取效率下降。
该实验采用硅胶柱层脱色素 ,其产品的收得率有待进一步提
高 , 或采用其他脱色技术 , 有待进一步研究。
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收稿日期:2005-09-05; 修订日期:2006-03-18
基金项目:右江民族医学院科研基金资助项目(No. 2005-98)
作者简介:龙光锦(1981-),男(壮族),广西合浦人 ,现就读于右江民族医
学院临床医学学生.
*通讯作者简介:黄锁义 (1964-), 男(汉族),广西南宁人 , 现任右江民族
医学院化学教研室副教授 ,学士学位 , 主要从事医用化学的教学和科研
工作.
榕树叶中总黄酮的提取及鉴别
龙光锦 1 , 黄 晔 1 , 姜林华2 , 黄锁义 3*
(1. 右江民族医学院临床医学本科 2001 - 4班 ,广西 百色 533000;
2. 右江民族医学院临床医学本科 2001 - 3班 ,广西 百色 533000;
3.右江民族医学院化学教研室 ,广西 百色 533000)
摘要:目的 探讨榕树叶总黄酮的提取及鉴别方法 , 以充分利用榕树叶植物资源。 方法 采用纯物理的工艺流程过程和
分光光度法从榕树叶中提取黄酮类物质 ,对所提取的黄酮类物质进行验证。结果 测得样品中总黄酮的含量 C=8. 36%。
回收率为 97. 9%, 其纯度和产率均较高。结论 该方法采用全物理过程 ,无任何化学变化及污染 , 是提取榕树叶黄酮类物
质的有效途径。
关键词:榕树叶; 总黄酮; 提取; 鉴别
中图分类号:O624. 42+1;R284. 2;R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2006)08-1425-02
The Total F lavanone ofF icus m icrocarpa L. LeafW ithdraw s and D istinction
LONG Guang-jin1 , HUANG Ye1 , JIANG L in-hua2 , HUANG Suo-y i3*(1. Undergraduate of Clin ica lMedicine, Grade 2001 YoujiangMed ica lCollege forNationalities, Baise 533000,
China;2. Undergraduate of C linicalMedicine, Grade 2001, China;Youjiang Med ica l College for Nationa litise
Baise 533000, China;3. Departmen t of Chem istry, Youjiang Med ica l College for Nationalities, Baise 533000,
China)
Abstract:Objective In orde r to m ake use o f the resource s ofF icus m icroearpa L. lea f, avo id ing w aste. M ethods Use pure ly
physical pro ce ss flow and spec trophotom e try to in troduce them e thod of wh ich w ithdraw ed the flavanone from F icusm icroearpa L.
leaf , and check the flavanonewh ich w ithdraw ed from F icusm icroearpa L. lea.f R esu lts The conten ts o f the to tal flavanone o f on-
ion w asC =8. 36% and rate of the recove ry was 97. 9%. Conc lu sion Using this tex t which prov ide thew ithdraw al and purify ing
m ethods the outcom e and purity o f the flavanone a re a ll ve ry h igh. Th is me thod is pu re ly phy sica l p rocess, and has no chem ica l
change and po llu tion. I t is idea l to w ithdraw the flavanone o fF icus m icroearpa L. lea.f
Key words:F icus m icroearpa L. leaf; To tal flavanone; W ithdraw; Distinction
黄酮类( flavon te s)化合物是植物光合作用产生的一大类化
合物 , 已知的此类化合物约有 2 000多种 , 有以黄酮 (2-苯基色
酮)为母核的一类黄色色素和黄酮的同分异构体及其还原产物 ,
还包括黄酮醇类 、异黄酮类 、儿茶素类 、双黄酮类及其衍生物 。榕
树(banyan), 是桑科榕属无花果类植物 ,全世界有 800多种 ,主要
分布在热带亚热带地区。我国榕属植物约 100种 , 属热带雨林的
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 8 时珍国医国药 2006年第 17卷第 8期
关键种类。研究表明 , 榕树叶含三萜苷 、黄酮苷 、酸性树脂 、鞣质
等 , 其中黄酮类和内酯类等有效成分对治疗冠心病 、老年性痴呆 、
脑血栓 、神经系统疾病和消除自由基 、抑菌 、抗癌等方面有显著效
果 , 无毒副作用 ,并以此开发出多种药品和保健食品 [ 1] 。目前对
银杏类黄酮的研究较多 ,但对于榕树叶黄酮类化合物的研究还相
对缺乏。为了充分利用榕树叶资源 , 笔者对榕树叶中黄酮类成分
进行提取与鉴别。现将过程介绍如下。
1 材料与方法
1. 1 材料 新鲜的榕树(小叶榕)叶。 95%乙醇 AR;氨水 AR;正
丁醇 AR;亚硝酸钠 AR;硝酸铝 AR;氢氧化钠 AR;芦丁标准品
(中国药品生物制品检定所 )。 UV-755B紫外可见分光光度计
(上海分析仪器总厂 );DZF-50小型真空恒温干燥箱(郑州长城
科工贸易有限公司);80-2离心沉淀器 (上海分析器械厂);ZF-I
型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)。
1. 2 方法
1. 2. 1 工艺流程 榕树叶中总黄酮提取工艺流程。见图 1。
图 1 榕树叶中总黄酮提取工艺流程
1. 2. 2 操作步骤 取新鲜榕树叶 ,切碎 ,烘干 ,取 50 g, 置于大的
烧杯中 , 加蒸馏水煮沸 3 h。冷却后进行粗滤 ,对滤渣用上述方法
进行再浸取 2次 , 将 3次滤液合并 , 滤液用高速离心机分离 10
m in, 2 000 r /m in。并进行加热浓缩(加热温度在 85℃左右)。浓
缩冷却后加入等体积 95%乙醇 , 放入冰箱内 2 h。用高速离心机
进行分离 10 m in, 2 000 r /m in。过滤得滤液滤渣 , 弃去滤渣。对
滤液进行蒸发浓缩 (加热温度在 85℃左右)。待乙醇蒸发完后 ,
将浓液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体 ,粉碎得终产物。
1. 3 定量实验 -总黄酮的含量测定
1. 3. 1 标准曲线的制备
标准溶液的制备:精密称取芦丁对照品 100 mg, 置于 250 m l
容量瓶中 , 加入 95%乙醇溶液并稀释至刻度 , 摇匀即得 (每毫升
含有无水芦丁 0. 4 mg)。
标准曲线的制备:精密吸取标准溶液 0, 1. 0 , 2. 0, 4. 0, 6. 0,
8. 0, 12. 0 m l分置于 50 m l容量瓶中 , 各加 95%乙醇 12 m l,加 5%
亚硝酸钠溶液 2. 0 m l, 混匀 , 放置 6 m in, 加 10%硝酸铝溶液 2. 0
m l, 放置 6 m in加 5%氢氧化钠溶液 20 m l,最后用 95%乙醇稀释
至刻度 , 摇匀 ,以第一瓶为空白溶液 , 用 UV-755B紫外可见分光
光度计 , 在 500 nm [ 2]上测定吸光度。结果见表 1。
1. 3. 2 提取物含量的测定 精密称定提取物 1. 000 0 g, 置索氏
提取器中 , 加 95%乙醇回流至无色 6 ~ 8 h, 将提取液置于烧杯
中 , 水浴加热浓缩至干 ,再用热水洗涤 3次 , 将洗液移至分液漏斗
中 , 并加无水正丁醇液萃取 4次 , 10 m l /次 , 合并萃取液于烧杯
中 , 水浴蒸干 , 再加 95%乙醇使溶解 , 并移于 50 m l容量瓶中 ,
再加 95%乙醇至刻度 , 摇匀。精密取 10m l于 5 0m l容量瓶中加
95%乙醇至刻度 , 摇匀 ,按标准曲线的制备操作测定吸光度 ,测得
A =0. 197。
表 1 紫外可见分光光度计测定吸光度
C /mg m l-1 吸光度
0. 008 0. 001
0. 016 0. 005
0. 048 0. 025
0. 064 0. 034
0. 080 0. 045
0. 096 0. 053
根据上表得一回归方程:A =0. 601 4C - 0. 004 1, r=0.
999 6, n=6,其中截距-0. 004 1,斜率 0. 601 4。
1. 3. 3 颜色反应
紫外光下呈色反应:取该样品溶液点在滤纸上 , 在可见光下
呈灰黄色 ,在紫外光下呈棕色并有荧光斑点。
浓氨水反应:取该样品溶液点在滤纸上 , 将滤纸在氨水上方
熏 0. 5 m in, 立即在紫外光下观察 ,呈极明显的黄绿色荧光斑点。
2 结果
A =0. 197, 根据回归方程:A =0. 601 4C - 0. 004 1, 计算样品
中总黄酮的含量 C =8. 36%。
回收实验:精密称取芦丁对照品 0. 040 4g, 同前样品测定方
法操作测定吸光度 A=0. 091,求出回收率为 97. 9%。
3 讨论
实验结果表明 ,本实验方法工艺简单 , 回收率为 97. 9%, 利
用本实验所提供的提取 、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较
高。此方法采用全物理过程 , 无任何化学变化及污染 , 且该方法
操作简单方便 ,是一条理想的提取黄酮类物质的途径。
黄酮类化合物具有抗癌 、抗肿瘤 、抗心脑血管疾病 、抗炎镇
痛 、免疫调节 、降血糖 、治疗骨质疏松 、抑菌抗病毒 、抗氧化 、抗衰
老 、抗辐射等作用 [ 3 ~ 8] 。近年来 , 世界上掀起了植物药开发的热
潮 , 植物药以其天然低毒的特点倍受青睐 , 而黄酮类化合物以其
广谱的药理作用引人瞩目 ,榕树叶分布广泛 , 实验结果表明 ,榕树
叶中含有较为丰富的黄酮。因此 ,榕树叶具有广泛开发和利用价
值 , 值得综合利用加强资源开发。
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