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槐白皮对机体免疫功能影响的研究



全 文 :   [收稿日期 ] 2002-05-08
[作者简介 ]马建国 ( 1954— ) ,男 ,山东沂水人 ,主治医师 ,主要
从事中西医结合及中草药临床应用研究。
槐白皮对机体免疫功能影响的研究
马建国 1 ,于 江 2
( 1. 济宁市第一人民医院 ,山东 济宁 272111; 2. 济宁医学院 ,山东 济宁 272013)
   [摘要 ]目的:研究槐白皮对机体免疫功能的影响。方法: 采用体内植物血凝素诱导淋巴细胞转化实验、 MΥ吞
噬功能测定、 MΥ rc花环实验及 E A花环实验。 结果:槐白皮可使小鼠细胞免疫功能明显增强 ,显著提高 MΥ吞噬
能力 ,对 MΥ形成 rc花环及 EA花环能力也有明显增强作用。槐白皮通过增加 T淋巴细胞转化率、 MΥ吞噬活性来
增强机体的免疫功能。 结论: 槐白皮在抗病毒、抗肿瘤及免疫调节中具有重要应用价值。
   [关键词 ]槐白皮 ;扶正祛邪 ;免疫功能 ;药物作用
   [中图分类号 ] R285. 5    [文献标识码 ] A    [文章编号 ] 0257-358X ( 2002) 09-0557-03
  槐 ( Sophora japonica L. )为豆科植物 ,我国各
地均有种植 ,以山东、河北、辽宁等地较为普遍。槐白
皮  (亦称槐皮 )系指槐树干或枝上的黄色内皮 ,有
臭味 ,其性味苦、平、无毒 ,临床一般作外用。近年对
槐白皮的药理研究较多 ,证实它具有广谱抗菌、镇痛
作用 ,对细菌、霉菌有抑制作用 ,对部分寄生虫有杀
灭作用 ,对损伤组织有修复作用 ,并能增加小鼠胸
腺、脾脏重量 [1~ 3 ]。为进一步研究其对免疫功能的影
响 ,笔者进行了小鼠体内外实验研究 ,现将结果报告
如下。
1 材料与方法
1. 1 槐白皮 去掉外表干枯层取淡黄色的内皮 (采
自山东济宁地区 ,经专家鉴定 ,由济宁医学院中草药
研究室刘善庭教授提供 )。
1. 2 槐白皮水提物 取槐白皮 100 g加蒸馏水
( 800~ 1000 ml)浸泡 1 h后 ,加热至沸 ,然后用文火
煎煮 30 min取出药液 ,如此连续煎煮 3次 ,把 3次
药液混合用滤纸过滤加热浓缩为含量 100%供试验
用。
1. 3 实验动物 昆明小鼠 ,体重 20± 1 g ,雌雄兼用
(由济宁医学院动物室提供 )。
1. 4 主要试剂 肝素 (江苏常州生化千红制药有限
公司 ) ;植物血凝素 (上海伊华临床医学科技公司 ) ;
补体:取小鼠新鲜血清混合 ,绵羊红细胞 ( E)、溶血
素 (由济宁医学院免疫室提供 ,效价达到应用效价 )。
1. 5 动物分组与给药方法 小鼠随机分四组 , A、
B、 C三组均为灌胃给药组 ,槐白皮剂量分别为: A
组每只每日 0. 1 g /10 g , B组 0. 2 g /10 g , C组
0. 4 g /10 g, D组为正常对照组 ,给予等量生理盐
水。 连续给药 10 d,末次用药 24 h后进行各项免疫
指标检测。
1. 6 免疫实验
1. 6. 1 槐白皮对小鼠细胞免疫功能的影响 [4 ] 灌
药第 7天各组给药后的 2 h,每天肌注 PHA 10 mg /
kg ,共 3 d,同时继续给药 ,末次给药 24 h,眼珠摘除
取血推片 ,瑞氏染色 ,油镜下计数 200个淋巴细胞、
淋巴母细胞及过渡淋巴细胞数 ,计算它们分别占的
百分率及淋巴细胞转化率。
1. 6. 2 槐白皮对小鼠腹腔 MΥ作用的影响
1. 6. 2. 1 对小鼠吞噬功能的影响 实验前 3 d每
只小鼠腹腔注射 5%淀粉、肉汤 1 m l,实验当天每只
小鼠腹腔注射温肝素、生理盐水 2. 5 ml ,轻揉腹部
3~ 5 min后用注射器抽取腹腔液少许滴于玻璃片
上 ,每张 3滴再加 2滴无菌生理盐水 ,放湿盒于
37℃ 1 h使 MΥ贴壁 ,弃上清 ,用生理盐水轻轻洗去
非贴壁细胞 ,制成单层腹腔 MΥ片备用。将准备好
的 8× 106 /ml浓度的酵母菌液 2滴覆盖于单层腹腔
MΥ片上 ,放湿盒于 37℃培养 40 min,取出 ,用无菌
生理盐水轻轻洗去未被吞噬的酵母菌 ,用固定液固
定 3 min,盐水冲洗、干燥、瑞氏染色 ,镜下计数统计
100个巨噬细胞 ,算出吞噬百分率和吞噬指数。
1. 6. 2. 2 对小鼠腹腔 MΥ rc花环的影响 [5 ] 将补
体用 Ca2+ 、 Mg2+ 、 PBS 1∶ 40稀释 ,再每毫升加备好
的酵母粉 5 mg混匀 , 37℃水浴 1 h,离心弃上清 ,沉
淀物用缓冲液洗涤 2次后恢复原体积 ,即为 rc悬
液。 每张单层 MΥ玻璃片上滴加 0. 2 ml rc悬液放
4℃ 1 h ,用缓冲液洗玻璃片至基本无酵母菌颗粒冲
下为止 ,加 2%戊二醛固定 5 min,冲洗后自然干燥 ,
·557·山东中医杂志 2002年 9月第 21卷第 9期
瑞氏染色、镜检计数 ,以一个 MΥ周围附有 6个或 6
个以上酵母菌为一个 rc花环 ,每张计数 200个
MΥ,计算 rc花环形成百分率。
1. 6. 2. 3 对小鼠腹腔 MΥ EA花环的影响 [ 6] 处理
配制好的 EA悬液 ,每张单层 MΥ滴加 0. 2 ml于玻璃
片上 ,置 4℃ 2 h,加戊二醛固定 10min,然后轻轻冲洗
去游离的 EA,自然干燥 ,瑞氏染色 ,镜检计数。 一个
MΥ周围附有 5个或 5个以上绵羊红细胞计作一个花
环 ,随机计数 200个 MΥ,算出花环形成百分率。
2 结果
2. 1 槐白皮对小鼠体内淋巴细胞转化功能的影响
 见表 1。
  表 1 对小鼠体内淋巴细胞转化的影响 ( x± s) %
n 淋巴细胞转化率 过渡淋巴细胞率 淋巴母细胞率 P
A
B
C
D
9
9
9
9
65. 44± 1. 81
68. 66± 2. 88
67. 77± 2. 99
52. 88± 2. 93
30. 55± 1. 13
32. 00± 1. 41
31. 66± 1. 32
28. 33± 1. 80
34. 88± 2. 02
36. 66± 1. 87
35. 88± 2. 02
24. 22± 1. 39
< 0. 01
  从表 1可见 ,槐白皮小、中、大剂量均可使小鼠
淋巴细胞转化率增高 ,与对照组比较差异显著 ,P <
0. 01。
2. 2 槐白皮对小鼠腹腔 MΥ吞噬功能的影响 见
表 2。
  表 2 对小鼠腹腔 MΥ吞噬功能的影响 ( x± s) %
n 吞噬率 吞噬指数 P
A
B
C
D
9
9
9
9
42. 77± 3. 63
49. 66± 3. 20
48. 55± 4. 06
25. 11± 3. 17
0. 49± 0. 04
0. 58± 0. 05
0. 56± 0. 05
0. 22± 0. 03
< 0. 001
  从表 2可见 ,槐白皮小、中、大剂量均可增强小
鼠吞噬功能 ,吞噬百分率与吞噬指数明显高于对照
组 ( P < 0. 001)。
2. 3 槐白皮对小鼠腹腔 MΥ C3 b受体和 Fc受体的
影响 见表 3。
  表 3 对小鼠腹腔 MΥ C3b和 Fc受体的影响 ( x± s) %
n rc花环 EA花环 P
A
B
C
D
9
9
9
9
63. 77± 3. 63
72. 00± 3. 31
71. 55± 3. 43
52. 22± 3. 86
69. 33± 2. 64
75. 22± 4. 23
74. 66± 4. 03
50. 88± 2. 66
< 0. 001
  从表 3可见 ,试验组的 rc花环与 EA花环形成
率明显高于对照组 ,差别显著 ( P < 0. 001)。
3 讨论
众所周知 , T淋巴细胞在免疫防护、免疫自稳和
免疫调节中的核心作用是任何细胞无法比拟的。 由
于细胞免疫的增强 ,在体内筑起强有力的防护网 ,从
而加强了机体抗感染免疫。 MΥ是机体免疫应答的
主要细胞之一。 在非特异性免疫、特异性免疫、肿瘤
免疫及免疫调节方面起重要作用 [7 ]。 槐白皮除有抗
菌作用外 [3 ] ,还可使机体淋巴细胞转化率提高 ,同时
促进 MΥ的吞噬作用 ,由于细胞免疫功能的提高 ,
MΥ功能增强 ,可杀灭大多数细菌病毒 ,及受病毒感
染的靶细胞 ,限制细菌、病毒向全身扩散 ,在抗菌抗
病毒免疫中发挥重要作用。 MΥ表面普遍存在补体
C3 b受体与 IgGFc受体 ,两者都是细胞膜的组成成
分 ,它们在 MΥ调理吞噬中起协同作用。 由于 C3b
和 Fc受体数量的增多和活性的加强 ,在有抗体和补
体参与时 ,抗体和补体可通过调理作用大大增强
MΥ的吞噬能力。特异性抗体 IgG与相应的细菌结
合后 , IgG的 Fc段与 MΥ膜上的 Fc受体结合 ,可促
进 MΥ对细菌的吞噬 ,起到抗菌抗炎作用。槐白皮通
过调节 MΥ的功能使之有效地发挥免疫监视作用 ,对
肿瘤的早期控制是极为重要的。 从以上结果表明 ,槐
白皮既有对免疫系统增强功效 ,又有免疫的双相调节
作用。祖国医学认为“正气内存 ,邪不可干” ,扶正祛邪
是治疗及控制疾病的基本原则。槐白皮通过调理人体
阴阳、气血、脏腑、组织活动 ,改变机体的内在环境和
条件 ,达到增加机体的抗病力、防御力和再生功能的
目的。所以说槐白皮不仅有解毒祛邪功能 ,还有增强
机体免疫力、增强正气的作用。实验还表明 ,槐白皮的
作用与剂量有关 ,初步认为 0. 2 g /10 g剂量组较 0. 1
g /10 g和 0. 4 g /10 g剂量组效果好。关于槐白皮对抗
肿瘤、抑肿瘤的作用机制还有待进一步研究。
[参考文献 ]
[1 ]刘善庭 ,李秀英 ,王秀娟 . 槐皮煎液抗菌作用的研究 [ J] .中医研
究 , 1992, 9( 5): 35.
[2 ]刘善庭 ,李健美 ,王传功 . 槐白皮抗炎镇痛药理的研究 [ J ]. 中草
药 , 1996, 27( 12): 26.
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[4 ]吴铁 ,郭澄泓 . 用 PHA在小鼠体内诱发淋巴细胞转化的初步观
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[ 5 ]朱云风 ,郭寿廷 . 小鼠腹腔巨噬细胞表面 C3 b受体的观察 [ J ].
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上海免疫学杂志 , 1983, 3( 5): 262.
[6 ]朱云风 .小鼠腹腔巨噬细胞 Fc受体的观察 [ J] . 上海免疫学杂
志 , 1982, 2( 2): 1.
[7 ]熊是全 ,冯新为 . MΥ抗原提呈功能调控 [ J] .中华微生物学免疫
学杂志 , 1990, 10( 1): 5.
Study of ef fects of sophora japonical on immunologic function
MA Jian-guo1 , YU Jiang2
( 1. Fi rst Hospi ta l of TCM , Jining 272111, China; 2. Jining Medical College, Jining 272013, China)
Abstract: Objectiv e: To study the effects o f sopho ra japonical on immuno logic function. Methods: W e
adopted fo llow ing approaches a s lectin-induced lymphocy te t ransfo rmation test in viv o. M acrophagic
phagocytosis assay and macrophagic rc ro set te test. Results: Sopho ra japonical increases cell-mediated
immunity and MΥ phagocytosis function remarkably in mice, enhances the ability o f MΥ rc roset te and EA
roset te fo rmation abso lutely. Conclusion: Sopho ra japonical enhances immunolo gic function by increasing T
lymphocy te transforma tion ra te and MΥ phagocy tic. Resul ts: It i s impo rtant in w ide-spectrum against
bacteria, pa rasi tes and vi rus, in coversing inf lammation, ache and tumo r, and in immunologic regula tion.
Key words: sopho ra japonical; immunolo gic function; phagocy to sis; ery th ro cy tic immuni ty
·559·山东中医杂志 2002年 9月第 21卷第 9期