全 文 ：凤尾草提取物体内抗肿瘤作用的研究*
王文芳1 陈 岩1△ 王智勇2
( 1 哈尔滨医科大学附属第一医院·哈尔滨 150001 2 哈尔滨医科大学附属第二医院·哈尔滨 150086)
摘 要 目的:研究凤尾草提取物的体内抗肿瘤作用。方法:采用 S180 细胞株接种昆明种小鼠，建立实
体瘤和腹水瘤模型，分别灌胃给予凤尾草提取物 20、50、100mg /kg，计算抑瘤率与生命延长率，流式细胞
仪检测瘤细胞 Bcl － 2、Bax、P53 蛋白表达。结果: 50mg /kg、100mg /kg 剂量的凤尾草提取物能够抑制小鼠
体内肿瘤增长，同时明显提高腹水瘤小鼠半数存活时间和生命延长率，增加 P53 蛋白表达，增加 Bax 表
达，减少 Bcl － 2 表达。结论:凤尾草提取物具有抑制肿瘤 S180 生长的作用，其作用与诱导肿瘤细胞凋亡
相关。
主题词 肿瘤 /中医药疗法 凤尾草提取物 /治疗应用 小鼠
* 黑龙江省中医药科研项目
△通讯作者
凤尾草(Pteris multfida Poir)为凤尾属蕨类植物，具有
清热利湿、抗菌消炎、消肿止痛的作用，其根茎用于治疗糖尿
病、肿瘤［1］，常与其他中草药制成配方，治疗肝炎和各种癌症
如食管癌、直肠癌和妇科肿瘤等［2］，但其单味药的抗肿瘤作
用及其作用机制尚不清楚。本实验对凤尾草提取物在荷瘤
小鼠体内的抗肿瘤作用进行了研究，旨在为其进一步的抗
癌治疗研究提供依据。
1 材料
1. 1 药品及试剂 凤尾草提取物:取凤尾草原药材，用
95%乙醇回流提取 3 次，过滤，浓缩药液，弃去药渣，药液浓
缩成浸膏后，用乙酸乙酯反复进行超声提取，得到提取物的
浓缩部分，备用。环磷酰胺(CTX) :由上海华联制药股份有
限公司提供。
抗兔抗小鼠单克隆抗体、二抗羊抗兔 IgG:杭州四季青
生物材料有限公司。
1. 2 动物和细胞 实验动物选用昆明种远交系健康小鼠，6
周龄，18 ～ 22g，雌雄各半，由哈尔滨医科大学肿瘤医院实验
中心提供。小鼠肉瘤细胞株 S180:由哈尔滨医科大学肿瘤
医院实验动物中心。
1. 3 仪器 BCM －1000 型生物洁净工作台:苏净集团苏州
安泰空气技术有限公司;流式细胞仪:美国 BD FACSCaliber。
2 方法
2. 1 体内实体瘤抑瘤实验［3］ 选择接种 S180 细胞 7 天的
小鼠，消毒腹部皮肤，用无菌空针抽吸腹水，用生理盐水制备
成 1∶ 3 稀释瘤液。取健康昆明种系小鼠 60 只，雌雄各半，接
种 0. 2ml瘤液于健康小鼠左前肢腋窝皮下，24 小时后按体
重随机分成 5 组，每组 12 只，雌雄各半。治疗组每日予低、
中、高剂量凤尾草提取物 20mg·kg －1、50mg·kg －1、100mg·
kg －1，模型组予生理盐水 20mg·kg －1，阳性对照组给予用生
理盐水稀释的环磷酰胺(20mg·kg －1) ，均每天灌胃给药 1
次，连续 10 天。于第 11 天颈椎脱臼处死动物，剥离瘤块，称
重，按下式计算肿瘤抑制率。瘤重抑制率(%)=(C － T)/C
× 100%，其中 C为阴性对照组平均瘤重(g) ，T 为各用药组
平均瘤重(g)。
2. 2 体内腹水瘤生命延长率实验 取健康昆明种系小鼠
60 只，雌雄各半，每鼠腹腔注射 S180 瘤液 0. 2ml。24 小时后
按体重随机分成 5 组，每组 12 只，雌雄各半。治疗组每日予
低剂量、中剂量、高剂量凤尾草提取物 20mg·kg －1、50mg·
kg －1、100mg·kg －1，模型对照组予生理盐水 20mg·kg －1，阳
性对照组予用生理盐水稀释的环磷酰胺(20mg·kg －1) ，均
每天灌胃给药 1 次，连续 14 天。观察小鼠的死亡情况，计算
每组小鼠的平均生存时间和生命延长率。按下式计算小鼠
生命延长率(%) :小鼠生命延长率(%)= (T /C － 1)×
100%，其中 T为给药组小鼠平均存活天数，C 为空白对照
组小鼠平均存活天数。
2. 3 肿瘤细胞 Bcl － 2、Bax、P53 蛋白表达测定 流式细胞
仪检测。治疗结束次日，抽取各组动物腹水，1000r /min离心
5 分钟，PBS 洗 2 次，加入一抗兔抗小鼠单克隆抗体，4℃孵
育 45 分钟，PBS离心洗 2 次，加入二抗羊抗兔 IgG，4℃孵育
45 分钟，PBS 离心洗涤 1 次，上机检测阳性蛋白标记率。
2. 4 统计学处理 采用 SPSS10. 0 软件统计，两组之间的样
本均数比较采用 t检验。
3 实验结果
3. 1 凤尾草提取物对 S180 实体瘤的抑制作用 结果见表
1。
表 1 凤尾草提取物对 S180 实体瘤小鼠
抑瘤率的影响(x ± s，n = 10)
组别 剂量(mg /kg) 瘤重(g) 抑瘤率(%)
模型组 － 2. 78 ± 0. 34 －
环磷酰胺组 20 1. 35 ± 0. 82＊＊ 56. 02
提取物组(低) 20 2. 37 ± 0. 54 15. 16
提取物组(中) 50 2. 08 ± 0. 94* 21. 99
提取物组(高) 100 1. 81 ± 0. 49* 33. 09
与模型组比较* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01(下同)
·952·中国中医药科技 2013 年 5 月第 20 卷第 3 期 May 2013 Vol. 20 No. 3
3. 2 凤尾草提取物对 S180 腹水瘤荷瘤小鼠生命延长率的
影响 结果见表 2。
表 2 凤尾草提取物对 S180 腹水瘤小鼠半数存活
时间和生命延长率的影响(x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
半数存活
时间(d)
生命延长率
(%)
模型组 － 14. 9 ± 0. 38 －
环磷酰胺组 20 23. 3 ± 0. 56＊＊ 56. 1
提取物组(低) 20 16. 9 ± 0. 4 13. 5
提取物组(中) 50 18. 6 ± 0. 56* 25. 2
提取物组(高) 100 20. 7 ± 0. 56* 39. 8
3. 3 凤尾草提取物对 S180 肿瘤细胞 P53、Bcl － 2、Bax 蛋白
表达的影响 结果见表 3。
表 3 凤尾草提取物对 S180 荷瘤小鼠肿瘤细胞 P53、
Bcl － 2、Bax蛋白表达率的影响(x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
P53
(%)
Bax
(%)
Bcl － 2
(%)
模型组 － 35. 3 ± 2. 8 26. 8 ± 5. 3 69. 1 ± 8. 3
环磷酰胺组 20 40. 9 ± 6. 2* 31. 2 ± 6. 7 63. 7 ± 7. 6
提取物组(低) 20 37. 6 ± 1. 7* 28. 6 ± 9. 3 65. 2 ± 4. 6
提取物组(中) 50 43. 8 ± 4. 4* 32. 4 ± 5. 8 51. 3 ± 9. 4*
提取物组(高) 100 49. 2 ± 5. 1＊＊ 39. 3 ± 7. 1＊＊ 58. 9 ± 6. 8＊＊
4 讨论
本实验研究依照抗肿瘤药实验法规中有关动物移植性
肿瘤实验的要求，并参考部分抗肿瘤药物筛选方法的文献，
采用动物移植性肿瘤模型小鼠肉瘤 S180 腹水和实体移植性
肿瘤模型，观察了凤尾草提取物的体内抗肿瘤作用。
本实验采用 3 个剂量组进行抗肿瘤效果观察，实验结果
表明，凤尾草提取物各组对 S180 荷瘤小鼠腹水瘤和实体瘤
均有一定的抑制作用，可以增加其生命延长率，提高抑瘤率，
其中对 S180 腹水瘤模型作用较强，但其抗肿瘤作用弱于环
磷酰胺。
野生型 p53 基因对细胞的增殖起抑制作用，是重要的生
长负调节因子［4］。bcl － 2 基因抑制肿瘤细胞凋亡［5］，Bax 蛋
白是 bcl －2 家族的另一重要成员，细胞中 Bax 与 Bcl －2 蛋白
的比例调控凋亡的发生，最终决定细胞的生存和死亡，增加
Bax 表达，降低 Bcl －2 表达可促进细胞凋亡［6］。本实验结果
显示，凤尾草提取物可以提高荷瘤小鼠肿瘤细胞 P53 蛋白的
阳性表达率，降低 Bcl － 2 蛋白阳性表达率，增加 Bax 蛋白阳
性表达率，从而上调 Bax 与 Bcl － 2 蛋白的比例，说明其诱导
的细胞凋亡与升高 P53 蛋白，上调 Bax / Bcl －2比值有关。
参考文献
［1］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会． 中华本草(第二册)．
上海:上海科学技术出版社，1999:210．
［2］ 欧莉． 中药凤尾草的研究进展． 中医药导报，2008，14 (3) :
92．
［3］ Ｒajkapoor B，Jayakar B． Antitumor activity of indigofera aspal-
athoides on Ehrlich ascites carcinoma in mice． India J Pharmacolo-
gy，2004，36 (1) :38．
［4］ Nakamura Y． Isolation of p53 － target genes and their functional a-
nalysis． Cancer Sci，2004;95 (1) :7．
［5］ Cory S，Adams JM． The Bcl － 2 family:regulators of the celluar
life － or － death switch． Nat Ｒev Cancer，2002，2 (9) :647．
［6］ Craig Ｒ W． MCL1 provides a window on the role of the BCL2 fam-
ily in cell proliferation，differentiation and tumorigenesis． Leukemi-
a，2002，16 (4)∶ 444． ( 修回: 2013 － 04 － 20

)
蒙药嘎木珠尔方干敷治疗宫颈糜烂 20 例
包桂兰 ( 内蒙古民族大学附属医院·通辽 028000)
1 临床资料
1. 1 一般资料 本组 20 例来自本院门诊患者，年龄 25 ～ 50 岁，均
为非妊娠已婚妇女，2 个月内未接受其他方法治疗者。经宫颈防癌
刮片检查为巴氏 3 级以下，无阴道炎或治疗前常规白带检查无滴虫
及霉菌，并愿意接受随访的宫颈糜烂患者。其中轻度 9 例(单纯型 8
例、颗粒型 1 例) ，中度 6 例(单纯型 4 例、颗粒型 1 例、乳突型 1 例) ，
重度 5 例(单纯型 2 例、颗粒型 1 例、乳突型 2 例)。
1. 2 诊断标准 参照高等医药院校妇产科学教材第 6 版的标准。
(1)根据糜烂面积分为 3 度:轻度是指糜烂面积占整个宫颈面积的
1 /3;中度是指糜烂面积占整个宫颈面积的 1 /3 ～ 2 /3;重度是指糜烂
面积占整个宫颈面积的 2 /3 以上。(2)根据糜烂深浅度可分为 3
型:单纯型糜烂面平坦;颗粒型糜烂面凹凸不平，呈颗粒状;乳突型糜
烂面表面不平现象更加明显而成乳突状。
2 方法 月经干净后 3 天用药。病人排空膀胱后，采取膀胱截石
位，常规消毒外阴，放置阴道窥器，暴露宫颈，消毒阴道及宫颈，以无
菌棉签将蒙药噶木珠尔干敷于患处，隔日 1 次，7 ～ 10 天为 1 疗程。
每 1 疗程结束后 3 ～ 5 天内复查宫颈局部情况，观察糜烂面的变化和
临床症状。治疗期间禁止盆浴和性生活。
3 治疗结果
3. 1 疗效标准 痊愈:子宫颈光滑，糜烂面消失;显效:轻度糜烂面
缩小大于 50%;中度好转为轻度;重度好转为中度;有效:中度、重度
糜烂面缩小，但好转不足轻度。轻度糜烂面缩小 50%或糜烂面无缩
小而乳突型变为颗粒型，颗粒型变为单纯型。无效:糜烂面无变化或
有发展。
3. 2 治疗结果 痊愈 11 例，显效 6 例，有效 3 例，总有效率 100%。
4 体会 嘎木珠尔方为经验方，由雄黄、寒水石、朱砂、硼砂、石决
明、冰片、麝香等配合而成，功能主要是消肿、愈合创伤，主治子宫颈
糜烂等，禁忌内服。方中雄黄以防腐、消肿、愈合创伤为主;寒水石以
解毒、滋补、调理体素为辅;配合朱砂以防腐收敛;石决明以愈合创
伤;麝香以杀黏。各药合用，对子宫颈糜烂有良好疗效。且用药过程
中无不良反应及副作用发生，具有临床症状消失快，使用安全等优
点，患者反映良好。本组 20 例全部治愈，其中轻度单纯型糜烂约 1
疗程痊愈;中度颗粒型糜烂用 2 个疗程痊愈;重度乳突型糜烂在 3 ～
5 个疗程也可痊愈。这说明嘎木朱尔有着疗程短，作用好的特点。
其疗效与糜烂面积及糜烂类型有关。
( 收稿: 2012 － 07 － 09)
·062· 中国中医药科技 2013 年 5 月第 20 卷第 3 期 May 2013 Vol. 20 No. 3