全 文 ：·药物分析 ·
紫云英蜜中总糖及酸度的测定
蒋崇辉 ,杨　杰(衡阳市中心医院 , 湖南 衡阳 421001)
[作者简介 ] 　蒋崇辉(1971-),男 , 本科 .Tel:13973425715, E-mail:
jiangzong5715@163.com.
　　[摘要 ] 　目的　探讨紫云英蜜总糖含量和酸度的测定方法。方法　利用紫外分光光度法测定总糖的含量;电位滴定法
测定酸度。结果　紫云英蜜总糖含量为 541 mg/g, 在 26.2 ～ 131 μg范围内呈良好的线性关系 , r=0.998, 平均回收率为
102.1%, RSD=2.79 %。测定紫云英蜜酸度时 , 避免了因指示剂使用而带来的误差 , 提高了测定准确度 , RSD为 0.98 % ～
2.12 %。结论　该方法简便准确 ,可靠 , 可作为紫云英蜜的质量分析方法。
[关键词 ] 　紫云英蜜;总糖;紫外分光光度法;酸度;电位滴定
[中图分类号 ] 　R927.2　　　[文献标志码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1006-0111(2010)04-0291-03
Determinationoftotalsugarandacidityinmilkvetchhoney
JIANGChong-hui, YANGJie(ThecenterhospitalofHengyang, Hengyang421001, China)
[ Abstract] 　Objective　 Toestablishthemethodforthequantitativedeterminationoftotalsugarandacidityinmilkvetchhon-
ey.Methods　Ultravioletspectrophotometrywasusedtodeterminethecontentoftotalsugarinhoney.Potentionmetrictitrationwas
usedtoanalyzethetotalacidityinthehoney.Results　Thetotalsugarinhoneywas541 mg/gwhichshowedagoodlinearrelationship
intherangeof26.2 ～ 131 μg(r=0.998).Theaveragerecoverywas102.1% andRSDwas2.79%.Potentiometrictitrationwasused
tocontroltheresponseendpointtoavoidindicatorerrorswhenthetotalaciditywasdeterminatd.TheaccuracywasimproveandRSD
was0.92% ～ 2.27%.Conclusion　Themethodissimple, convenientandreliablewhichcouldbeusedforthequalitycontrol.
[ Keywords] 　milkvetchhoney;totalsugar;UV-spectrophotometer;acidity;potentionmetrictitration
　　紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜 ,具有大自然
清新宜人的草香味 ,甜而不腻 ,鲜洁清甜 ,色泽为浅
琥珀色。本品有清热解毒 、祛风明目 、补中润燥 、消
肿利尿之特殊功效。蜂蜜中的糖类物质具有增强免
疫力 、抗癌 、增强消化系统功能等[ 1]作用 ,近年来受
到广泛关注 。总糖含量和酸度是评价蜂蜜及其制品
优劣的理化指标之一 [ 2] 。为了更好的评价紫云英
蜜的产品品质 ,我们采用改进的苯酚-硫酸法 [ 3] ,对
紫云英蜜中总糖进行测定 。由于许多紫云英蜜颜色
较深 ,按照进出口蜂蜜检验方法(SN/T0852)标准 ,
以酚酞作为指示剂 ,按常规滴定分析方法测定其酸
度时 ,无法准确观察滴定终点时颜色变化 ,导致误差
增大。我们用电位滴定法测定紫云英蜜中的酸度 ,
取得了较好的效果。
1　仪器与试药
1.1　仪器 　UV-2401 PC型紫外分光光度计(岛
津),电位计(湖南 , PHS-3C型 pH计),磁力搅拌器
(北京 ,赛多利斯), BS110S分析天平(北京 ,赛多利
斯)。
1.2　试药　D-葡萄糖对照品(中国药品生物制品
检定所 110833-200503),硫酸 ,苯酚(以上试剂均为
分析纯),蒸馏水 ,市售紫云英蜜 ,显色液(将 50 ml
浓硫酸缓缓加入 10ml水中冷却至室温 ,加 0.6g苯
酚搅拌使其溶解), 0.1 mol/L氢氧化钠标准溶液 ,
邻苯二甲酸氢钾基准试剂 ,邻苯二甲酸氢钾标准缓
冲液(pH =4.03),混合磷酸盐标准缓冲液(pH =
6.86)。
2　方法与结果
2.1　总糖的测定
2.1.1　样品的处理　精密称取紫云英蜜适量于 25
ml容量瓶中 ,加蒸馏水定容 ,振摇使溶解。滤过 ,取
续滤液 0.50ml于 100ml容量瓶中 ,加蒸馏水定容。
从中取 1.00 ml至 10 ml具塞试管中 ,备用 。
2.1.2　对照品溶液的配置　精密称取 D-葡萄糖对
照品 0.013 1g于 50 ml容量瓶中 ,加蒸馏水定容 ,
即得对照品储备液 ,浓度为 C=262 μg/ml。
2.1.3　检测波长及保温温度的选择　照 2.1.1方
法制备样品 ,以蒸馏水为空白 ,分别加入显色剂 5
ml, 摇匀 ,于 50、60、70、80 ℃沸水中保温 30 min取
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出 ,置冰水内冷却 30min,在 200 ～ 800 nm范围进
行紫外扫描 ,结果样品在 483 nm处有最大吸收 ,但
样品的吸光度随保温温度的变化存在较大的差异 ,
在接近沸水时 ,吸光度的变化趋于平坦 ,可能是由于
保温温度低于沸水时 ,显色不完全而使吸光度值偏
低 ,结果见图 1。故确定其检测波长为 483 nm,显色
温度为沸水 。
图 1　显色温度对紫云英蜜样品吸光度值的影响
2.1.4　保温时间的考察　照 2.1.1方法制备样品 ,
以蒸馏水为空白 ,加入显色剂 5 ml,摇匀 ,分别考察
样品在沸水中保温 20、30、40、50、60、 70、80 min的
吸光度 ,结果保温 50 min时样品吸光度值最大 ,见
图 2。在实验中发现显色剂配置时间过久 ,会使样
品吸光度测定值偏低 ,建议显色剂应现配现用 。
图 2　显色时间对紫云英蜜样品吸光度值的影响
2.1.5　标准曲线的制备　精密吸取对照品储备液
0.00 、0.10 、0.20、0.30、0.40、 0.50 ml于 10 ml具
塞试管中 ,分别补水至 1.00 ml,然后加入显色剂
5.00ml,摇匀 ,置沸水中保温 50min后取出 ,室温放
置 30min,于 483nm处测定吸光度值 。以终浓度为
横坐标 ,吸光度值为纵坐标 ,进行线性回归 ,结果显
示总糖在 26.2 ～ 131 μg呈良好的线性关系 ,回归方
程为 Y=0.034 3X+0.020 6, r=0.998。
2.1.6　精密度与稳定性　精密称取样品 0.5 g于
25 ml容量瓶中 ,照样品处理方法制备样品 ,再从中
取 1.00 ml至 10 ml具塞试管中 ,以蒸馏水为空白 ,
照 “标准曲线的制备”项下自 “加入显色剂 5.00 ml”
起 ,同法操作 ,测定其吸光度。该样品吸光度重复测
定 5次 ,结果其吸光度 RSD值为 0.71 %,说明仪器
的精密度良好。以此样品分别于室温放置 30、35、
40 、45、 50、 55、 60 min测定其吸光度 。其吸光度
RSD值为 0.68%,说明样品在室温放置 60min内基
本稳定。
2.1.7　重现性与加样回收率　精密称取样品 0.5
g,共 6份 ,置 25ml容量瓶中 ,照样品处理方法制备
样品 ,再从中取 1.00 ml至 10 ml具塞试管中 ,以蒸
馏水为空白 ,照 “标准曲线的制备 ”项下自 “加入显
色剂 5.00 ml”起 ,同法操作 ,测定其吸光度 。结果
测得样品总糖平均含量为 541.20 mg/g, RSD为
2.25 %(n=5)。从 100ml容量瓶中精密吸取该样
品 0.50ml于 10ml具塞试管中 ,加入对照品储备溶
液 0.20 ml, 再补加蒸馏水 0.30 ml后 ,照 “标准曲
线的制备 ”项下自 “加入显色剂 5.00 ml”起 ,同法操
作 ,测定其吸光度。其平均回收率为 102.1%, RSD
为 2.79 %。
2.1.8　总糖含量测定　分别精密称取不同批次的
样品 ,按已确定的测定方法操作 ,测定紫云英蜜中总
糖的含量 ,结果见表 1。
表 1　各批紫云英蜜含量测定结果
样品号 平均含量(g/100g)
1 37.0
2 39.2
3 75.3
4 55.8
5 67.4
6 42.7
7 54.1
2.2　酸度的测定[ 5]
2.2.1　实验方法　准确称定 10 g样品于 100 ml烧
杯中 ,加 20 ml经煮沸冷却后的水 ,开动磁力搅拌
器 ,用 0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定至 pH =
8.2为终点 ,记录体积 ,样品的酸度按下式计算:
酸度(°T)=CNaOHVM ×100
式中:M-测定样品的质量;CNaOH-氢氧化钠标准
溶液的准确浓度;V-质量为 M的样品所消耗的氢氧
化钠标准溶液的体积。
2.2.2　结果
2.2.2.1　两种方法测定酸度结果的比较　取 20批
市售的蜂蜜及制品 ,用国标法(常规滴定法)和本法
(电位滴定法)同时测定 , 结果见表 2,经显著性检
验 , P>0.05,两种方法无显著差异 。
2.2.2.2　精密度实验　取酸度值低 、中 、高 3份样
品 ,用两种方法测定同一样品 ,分别重复测定 6次 ,
(下转第 307页)
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应的发生。处方点评制度相对于临床药师直接参与
制订用药方案来说 ,虽然属于回顾性监督 ,但经过统
计分析 、合理反馈 ,更大程度上促进了医生和药师的
用药水平 ,从而保障用药安全 ,降低医疗费用 ,提高
医疗服务水平。
【参考文献】
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[收稿日期 ] 　 2009-12-01
[修回日期 ] 　 2010-04-06
(上接第 292页)
用酚酞作指示剂测定其酸度相对标准偏差为 1.22
% ～ 3.98 %,用电位滴定法测定其酸度相对标准偏
差为 0.92 % ～ 2.27 %。结果表明 ,用电位滴定法
的精密度优于用酚酞作指示剂 ,结果见表 3。
表 2　两种方法测定样品中酸度的结果比较(°T)
样品号 国标法 本法 样品号 国标法 本法
1 1.61 1.60 11 0.58 0.59
2 1.29 1.30 12 1.86 1.85
3 0.54 0.52 13 0.73 0.72
4 0.64 0.63 14 1.59 1.56
5 0.84 0.84 15 0.75 0.74
6 0.91 0.90 16 0.78 0.77
7 1.46 1.44 17 0.81 0.82
8 1.86 1.85 18 0.93 0.94
9 1.58 1.56 19 0.86 0.87
10 1.56 1.56 20 0.77 0.77
表 3　二种方法测定紫云英蜜酸度精密度的比较
序号 酚酞指示剂低 中 高
电位滴定法
低 中 高
1 0.56 1.34 1.64 0.54 1.32 1.62
2 0.53 1.33 1.59 0.52 1.30 1.59
3 0.54 1.29 1.63 0.54 1.27 1.61
4 0.51 1.27 1.61 0.52 1.29 1.60
5 0.55 1.25 1.60 0.53 1.25 1.58
6 0.57 1.27 1.63 0.55 1.27 1.59
均值 0.54 1.29 1.62 0.53 1.28 1.60
RSD(%) 3.98 2.79 1.22 2.27 1.95 0.92
3　讨论
紫云英蜜中总糖以单糖为主 ,在对多糖和低聚
糖进行测定时 ,其含量过低 ,且得到相应的多糖和低
聚糖对照品较困难 ,而且多糖组成不明或较复杂 ,因
此我们以测定其水解产物单糖来表示总糖的相对含
量。苯酚 -硫酸法简单快速 ,显色稳定 ,精密度高 ,准
确度较好 ,可以作为紫云英蜜总糖含量测定的有效
方法 [ 6] 。通过沸水浴加热来使其显色 ,既保证了反
应系统温度一致 ,又很好地解决了总糖检测的重现
性与准确度。本法的回收率 、精密度 、稳定性均较
好 ,且克服了其它成分的干扰 ,是一简便 、快速 、准确
的测定手段。
电位滴定法测定紫云英蜜的酸度 ,排除了紫云
英蜜本色对滴定终点指示剂颜色突变的干扰 ,使深
色的紫云英蜜及制品的酸度测定成为可能。该法误
差非常小 ,准确度高 ,避免了人工滴定法由于要加入
指示剂 ,可能因加入量 、指示终点与等当点 、操作者
对颜色判断差异等因素造成的误差。此方法的开发
利用有利于快速测定大批量样品 ,实验证明本法符
合要求 ,可广泛使用 。
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[收稿日期 ] 　 2010-05-07
[修回日期 ] 　 2010-06-20
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