全 文 ：新疆 中总皂苷的光度测定
马木提·库尔班 , 玛丽娅·马木提 , 卡马梨别克·吾买尔
(新疆大学化学与化工学院 , 乌鲁木齐 830046)
摘　要:采用分光光度法对 中的皂苷成分进行研究 , 测定了 中的总皂
苷 , 回归方程为 y =0.1028+2.17ρ, r =0.9973 , 七叶苷标准溶液在 0.094 ～
0.564 mg mL范围内有很好的线性关系。用正交设计法优化了实验条件 。回收
率为 80%～ 94%。
关键词:新疆 ;分光光度法;总皂苷
中图分类号:O657.32　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-0720(2008)02-051-03
　　 (Oblonga cydonga Mill)是蔷微科灌木植
物。广泛分布于新疆南部及陕西 , 东北等地区 。成
熟时香味浓郁 , 无毒。新疆维吾尔人自古以来就
将它当作药 、制作罐头和饮料。据文献报道:它具
有降血压 , 降血脂 , 补血补脑 , 补肾 , 止咳 , 止泻 ,
利尿 , 治疗心脏病等疗效。特别是止咳 , 止泻作用
甚佳[ 1] 。本文对 的果实进行研究发现 , 果实含
有生物碱(含量为 1.4%)[ 2] , 笔者对 有效成分
研究表明 , 其中有黄酮和 10多种微量元素。尚未
发现有关 果实中总皂苷量的测定的报道。本
文对七叶苷用分光光度法测定了新疆 中总皂
苷含量 , 对测定方法进行改进并为 中总皂苷
含量的测定提供了可靠的分析方法 。
1　实验部分
1.1　仪器与试剂
722型分光光度计(上海精密仪器公司), 恒温
水浴 , 层析柱(3.5 cm i.d.×80 cm)。D-101型大孔
吸附树脂(天津制药厂)。七叶苷(β-Esculin)标准品
(新疆医科大学药物研究所提供)。
七叶苷标准溶液 4.7 mg mL:准确称取七叶苷
235 mg , 加甲醇溶解并稀释至 50 mL , 备用。
5%的香草醛-冰乙酸混合显色溶液(临用前配
制), HCIO4 、甲醇 、H2SO4 、新疆喀什 干粉(将
干碎成粉末)。
1.2　 中皂苷的提取和鉴定
1.2.1　大孔吸附树脂的前处理　取大孔吸附树脂
适量 , 加乙醇充分溶胀后的大孔吸附树脂置于层
析柱 , 用蒸馏水洗净 , 除去乙醇味 。
1.2.2　 干粉中总皂苷的提取　选择提取溶剂
时曾用不同浓度的 , 乙醇 、甲醇和水。结果表明 ,
以 70%的乙醇为提取剂皂苷溶出量最高 。
取 干粉 20 g , 用 100 mL 70%乙醇回流 2
次 , 每次回流 2 h , 过滤 , 合并两次过滤液 , 此溶
液减压蒸馏至 20 mL。用石油醚萃取除去其中的油
状物质 , 于 D-101型大孔吸附树脂柱层析 , 用水洗
脱 , 把洗脱液浓缩至30 ～ 40 mL , 置于100 mL容量
瓶中 , 用甲醇稀释至刻度 , 备用。
1.2.3　皂苷的定性鉴定　(1) 干粉提取液吸
取 2mL , 置于试管中 , 激烈震荡后 , 产生了持续性
泡沫 。表明有皂苷成分存在 。(2)取适量的提取
液 , 蒸发除去酒精 , 加 1滴浓H2SO4初呈黄色渐变
红 , 最后变为紫色 。(3)皂苷成分在浓 HNO3 条件
下 , 呈棕红色 , 倾入水中产生褐色沉淀 。
1.2.4　总皂苷的测定　吸取提取液3 mL , 放入25
mL的容量瓶中 , 加 1 mL 显色溶液 , 加 HClO 4 0.8
mL , 在 70 ℃水浴加热 45 min , 立即冷却 , 再加冰
乙酸 5 mL用冰乙酸稀释至刻度 , 于波长在 425 nm
处测定吸光度 A=0.115 , 根据标准曲线查得样品
溶液中总皂苷含量为 0.15 mg mL。
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第 27 卷第 2期
2008 年 2月 　　　　　　　　　　　　 分析试验室Chinese Journal of Analy sis Laboratory　　　　　　　　　　　　Vol.27.No.22008-2
收稿日期:2006-12-21;修订日期:2007-03-09
作者简介:马木提·库尔班(1950-), 男 , 副教授
DOI :10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2008.0048
2　结果与讨论
2.1　最大吸收波长的选择
按2.2的方法选取已显色的第 4号标准溶液 ,
试剂为参比 , 于波长在 320 ～ 530 nm下扫描 , 结果
表明 , 在 425 nm处有最大吸收 , 故选取 425 nm为
测定波长(图 1)。
2.2　标准曲线的制作
吸取七叶苷标准溶液以 0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 ,
2.5 , 3.0 mL , 分别置于 25mL 的容量瓶中 , 分别加
入 5%的香草醛-冰乙酸溶液[ 4] 1 mL , HClO4 0.8
mL , 置于 70 ℃水浴加热 45 min , 流水冷却再加冰
乙酸 5mL , 用冰乙酸稀释至刻度 , 摇匀 , 试剂为参
比 , 于 425 nm 波长下测定吸光度 。回归方程为:
y =0.1028+2.17ρ, 相关系数 r=0.9973 , 七叶苷
标准溶液在 0.094 ～ 0.564 mg mL 范围内有很好的
线性关系(图 2)。
图1　吸收光谱图
Fig.1　Absorption spectrum
图 2　标准曲线
Fig.2　Working curve
2.3　正交实验
根据前期的实验和参考文献选取 3 个因素:
时间 , 温度 , 显色液的体积 , 3个因素选取 3个水
平 , 进行 L9(33)正交设计实验并对实验结果进行
极差分析来确定影响显色条件的主要因素和水平
(表 1)。
表 1　正交实验 L9(33)
Tab.1　The results of orthogonal test L9(33)
实验号 时间 t min
A
温度 t ℃
B
显色液 V mL
C
吸光度 A
1 1(15) 1(20) 1(1) 0.424
2 2(30) 3(70) 2(2) 0.415
3 3(45) 2(50) 3(3) 0.454
4 2(30) 2(50) 2(2) 0.412
5 3(45) 3(70) 1(1) 0.508
6 1(15) 1(20) 3(3) 0.462
7 2(30) 2(50) 1(1) 0.395
8 3(45) 1(20) 3(3) 0.460
9 1(15) 3(70) 2(2) 0.485
K 1 1.371 1.346 1.327
K 2 1.222 1.261 1.312
K 3 1.422 1.408 1.376
R 0.200 0.147 0.064
实验结果表明 , 影响吸光度的因素由大到小
的顺序为:温度 >时间 >显色液的体积 , 其中
A3B3C1 的吸光度最大 。所以选择 A3B3C1 为最佳实
验条件 , 即时间为 45 min , 温度为 70 ℃, 显色液
的用量为 1 mL时吸光度最大 。
2.4　重现性
精密称取已处理好的 粉末 5份 , 每份 1.2
g , 吸取2 mL 经提取定容后的样品测定液 , 用甲醇
稀释至 25 mL , 在 425 nm波长处测定吸光度 , 计算
RSD=1.2%(n=5)。
2.5　稳定性
取 2 mL试液每 15 min测一次吸光度 , 实验结
果表明 , 供试样与七叶苷标准品产生的黄色络合
物 , 很不稳定 , 吸光度在 15 、 30 、 60 、 90 、 120 min
后下降的 0.15%, 1.89%, 2.89%, 4.95%, 因此
应在定容后 20 min内测定完毕 。
2.6　回收率
分别吸取 2 mL 试样溶液 , 置于 25 mL 的 5个
容量瓶中 , 分别加入七叶苷标准溶液 0 , 2.0 , 4.0 ,
6.0 , 8.0mL , 按1.2.1方法测定总皂苷量 , 得到方
法的加标回收率为 80%～ 94% RSD=1.5%(n =
5)。
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参考文献
[ 1] 　江苏新医学院编.中药大词典(下册).上海:上海
人民出版社 , 1993.5068
[ 2] 　马木提·库尔班.食品科学 , 2005 , (2):186
[ 3] 　中科院上海药物研究所编.中草药有效成分提取及
含量的测定.上海:上海科学技术出版社 , 1985.312
[ 4] 　徐学民 , 王　笳 , 杨红等.中草药 , 2003 , (8):678
Determination of total saponin from cydonia ablonga mill in Xinjiang by spectrophotometry
Mamut Kurban , Mahrra Mamut and Kamlbik Umar ＊(College of Chemistry and Chemical Engineering , Xinjiang Uni-
versity , Urumqi 830046), Fenxi Shiyanshi , 2008 , 27(2):51 ～ 53
Abstract:A method for the determination of total saponin from cydonia ablonga mill in Xinjiang by spectrophotometry
was proposed.The linear regression equation was y =0.1028+2.17ρ, r=0.9973.The linear range was between
0.094 and 0.564 mg mL.The optimum experimental conditions were selected by using orthogonal methods , and the
result was A3B3C1.Recoveries were 80%～ 94%.
Keywords:Xinjiang cydonia ablonga mill;Spectrophotometry;Total saponin
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