全 文 ：药 物 研 究
Themedicinestudy
作者简介:唐湘乡 (1976-), 女 (汉族), 湖南衡阳人 , 主管药师 , 从事临床药学及药房管理工作。
紫云英蜜中总酚的含量测定
唐湘乡
湖南省衡阳市中心医院药剂科, 湖南　衡阳　 421001
【摘　要】　目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法:采用Folin酚法 , 样品经福林试剂显色反应后 , 紫外可见分光光度计测
定其总酚含量。结果:总酚在 2.03～ 8.04μg· mL-1内线性良好 , r= 0.9997, 且平均回收率为 102H42 %, RSD = 2.64% (n=5)。结
论:该方法准确 , 简便 , 重现性好 , 专属性强 , 可有效地控制紫云英蜜的质量。
【关键词】　紫云英蜜;总酚;Folin酚法;紫外分光光度法
【中图分类号】R927.2　　　 【文献标识码】A　　　　 【文章编号】 1007-8517 (2011) 02-0037-02
DeterminationoftotalhydroxybenzeneinZiyunyinghoney
TANGXiang-xiang
(ThecenterhospitalofHengyang, Hengyang421001, China)
Abstract:Objective:ToestablishaUVmethodfordeterminationofthecontentoftotalhydroxybenzeneforZiyunyingmi.Meth-
od:FolinDeniswasadoptedofdeterminingthecontentoftotalhydroxybenzenebyUV.Result:Thetotalhydroxybenzeneshoweda
goodlinearrelationshipat2.03 ～ 8.04 μg· mL-1 , r= 0.9997, theaveragerecoverywas102.42 %, RSD=2.64 % (n=5).
Conclusions:Themethodisaccurateandsimplewithgoodreproducibility, andcancontrolthequalityofthispreparationeffectively.
Keywords:Ziyunyinghoney;totalhydroxybenzene;Folin-Denis;UV-spectrophotometer
　　紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜 , 具有大自然清新宜
人的草香味 , 甜而不腻 , 鲜洁清甜 , 色泽为浅琥珀色。本
品富含多糖 、 多酚 、 氨基酸 、 维生素 、 微量元素等多种营
养成分 , 有清热解毒 、 祛风明目 、 补中润燥 、 消肿利尿之
特殊功效。 且其中的多酚酸具有抗病原微生物 、 抗炎症 、
抗变态反应 、 抗心血管疾病和抗氧化等作用 [ 1, 2] 。为了更好
的评价紫云英蜜的产品品质 , 我们采用 Folin酚法对不同产
地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。
1　仪器与试药
1.1　仪器
UV-2401 PC型紫外分光光度计;超声波清洗仪 (昆
山市超声仪器有限公司 KQ-2508型);恒温水浴锅 (余姚
市亚星仪器仪表有限公司)。
1.2　试药
原儿茶酸对照品 (批号:110809 -200503);钨酸钠 ,
磷钼酸 , 85%磷酸 , Na2CO3 , 以上试剂均为分析纯;水为
蒸馏水。
1.3　福林试剂的配制 [ 3]
称取钨酸钠 40g, 磷钼酸 8g和 85%磷酸 20mL, 溶于
300mL蒸馏水 , 煮沸加热回流 2h, 冷却 , 稀释至 400mL,
置于棕色瓶中保存。
1.4　Na2CO3溶液的配制
称取 15gNa2CO3 , 溶于 200mL蒸馏水中 , 即为 75g·
L-1Na2CO3溶液。
2　方法与结果
2.1　对照品溶液的制备
原儿茶酸对照品的配制:称取原儿茶酸对照品
15.80mg于 50mL容量瓶中 , 蒸馏水溶解并定容 , 摇匀 , 备
用 , 浓度为 316μg· mL-1。
2.2　供试品溶液的制备
取同一批样品, 精密称定, 置于 50mL容量瓶中, 超声使
溶 , 过滤, 取 20mL续滤液定容成 50mL, 摇匀 , 备用。
2.3　测定方法
精密吸取适量样品溶液 1mL于 10mL带塞离心管中 ,
加入 2.5mL福林试剂 , 放置 5min, 再精密加入 Na2CO3溶
液 2mL, 50℃水浴保持 5min, 再取出室温放置 2h, 于
760nm左右测定吸光度值。
2.4　标准曲线的制备
从原儿茶酸标准储备液中分别吸取 1、 1.5、 2、 2.5、 3、
3.5mL于 25mL容量瓶中 , 蒸馏水稀释定容 , 摇匀 , 浓度分
别为 12.64μg· mL-1 , 18.96μg· mL-1 , 25.28μg· mL-1 ,
31.60μg· mL-1 , 37.92μg·mL-1 , 44.24μg· mL-1 , 分别从
中精密吸取 1mL, 按 2.3测定方法反应 , 测定吸光度值。以
终浓度为横坐标 , 吸光度值为纵坐标, 得回归方程为 Y=
0.0932X-0.0315, r=0.9997。结果表明总酚在 12.64μg·
mL-1 ～ 44.24μg· mL-1范围内线性良好。
2.5　精密度试验
取同一份对照品按上述反应后连续测定 5次 , 吸光度
值 RSD=0.386%。结果表明仪器精密度良好。
2.6　样品吸光度值稳定性试验
按 2.2供试品溶液制备方法制备样品液 , 并按 2.3测
定方法反应后 , 每隔 5min测定一次 , 观察吸光度值变化 ,
结果 1h内的吸光度值 RSD=1.42%, 结果见图 1。结果表
明样品显色后在 1h内较稳定。
2.7　重现性试验
取同一批样品, 平行 5份 , 精密称定, 按供试品溶液法制
备 , 并按 2.3测定法反应。结果表明, 样品的平均含量为
2.154mg· g-1 , RSD=3.43%。结果表明方法重现性良好。
(下转第 39页)
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药 物 研 究
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川芍 、 赤芍 、 元胡 、 红花 、 土鳖虫 、 桃仁 、 乳香 、 没药 、
木香 、 炙甘草 、 三七粉十七种中药组方而成 , 经临床实践
结果表明 , 对 LIDH有着较好的疗效。 方中杜仲补益肝肾 、
强筋壮骨 , 山英肉滋补益肝肾 , 川牛膝 、 桑寄生 、 狗脊补
肝肾 、 强腰膝 、 除风湿 、 通经络 , 川牛膝兼利水湿 , 当归 、
川夸 、 赤芍 、 乳香 、 没药 、 元胡 、 土鳖虫 、 红花 、 桃仁 、
三七活血化癖通滞 、 行气消肿止痛 , 当归兼有补血和血之
功 , 川芍兼有祛风燥湿之效 、 木香行一身之气兼带止痛 ,
甘草缓急止痛 、 补益气血 , 全方共奏活血化疲 , 消肿止痛 ,
补肾壮腰 , 通经活络之作用。
现代药理学 [ 5]研究认为方中大部分药物具有抗炎 、 镇
痛 、 解痉作用 , 杜仲 、 甘草可改善垂体促肾上腺皮质激素
的分泌 , 发挥类激素样作用 , 还具有免疫调节作用;桑寄
生 、 狗脊有不同程度的扩张血管 、 增加血流量 、 抗凝的作
用;川芍可改变微循环状态 , 使流速加快 , 降低微血管内
红细胞凝集 , 减轻微血管渗出 , 对慢性微循环障碍有明显
调理作用 , 还可抑制网状内皮系统的吞噬作用;山英肉有
抑制血小板聚集 , 抗血栓形成及抑制免疫反应的作用;三
七可明显减少血管平滑肌细胞钙离子内流具有扩张血管 ,
改善微循环 , 增加血流量 , 抑制血小板凝集及抗脂质过氧
化作用 , 还能不干扰机体的正常免疫 , 但能使过高或过低
的免疫反应恢复正常 , 抑制血栓素生成;当归 、 赤芍 、 桃
仁 、 红花均有不同程度的免疫抑制作用 , 它们能抑制反应
性抗体及抗体细胞形成的作用;牛膝能降低大鼠全血粘度 、
红细胞压积 、 红细胞凝集指数 , 扩张血管 、 改善循环 、 促
进炎性病变吸收 , 抑制过敏介质的释放;当归 、 川芍等所
含主要成分阿魏酸是一种抗氧化剂 , 能直接通过清除自由
基 , 抑制氧化反应和自由基反应 , 以及与生物膜结合保护
膜脂质等多种机理拮抗自由基对组织的损伤 , 赤芍有调节
血液凝固和纤维蛋白溶解系统及免疫系统的作用 [ 5] , 这些
作用综合起到①改善微循环 , 扩张毛细血管 , 消除神经根
炎症 、 水肿;(2)抗炎镇痛 , 抑制炎症的渗出;(3)增强
机体免疫调节 , 缓解和消除免疫炎症 , 故而本方对 LIDH有
着较好的疗效。
小鼠灌服杜仲腰痛丸悬浊液 403倍临床剂量 , 未出现
异常毒性反应。 说明杜仲腰痛丸临床使用剂量是安全的。
本研究结果表明 , 在临床使用剂量范围内 , 杜肿腰痛丸具
有较高的安全系数。
参考文献
[ 1] 赵继荣 , 张思胜.杜仲腰痛丸治疗腰椎间盘突出症的临床研究 [ M] .
中国中医骨伤科杂志.2006;32～ 35.
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学 、 毒理学)[ M] .1994.255 ～ 258.
[ 3] 张天亮 , 急性经口毒性试验替代测试方法进展 [ M] .预防医学论坛
2008:1225 ～ 1228.
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12, 248 ～ 249.
[ 5] 马清钧 , 王淑玲 , 主编.常用中药现代与临床.天津科技翻译出版公
司 , 1995.
(收稿日期:2010.12.09)
(上接第 37页)
2.8　加样回收率试验
取同一批样品 , 精密称定 , 精密加入 337μg· mL-1原
儿茶酸对照品 2mL, 按供试品溶液法操作 , 并按 2.3测定
样品中总酚的含量 , 结果表明 , 其回收率为 102.42%,
RSD=2.64%, 数据见表 1。
表 1　总酚加样回收率试验结果 (n=5)
称样
量 (g)
样品中多
酚平均含量
(mg· g-1)
加入对照
品量 (g)
测定量
(g)
回收率
(g)
平均回
收率 (%)
RSD
(%)
0.6700
0.7200
0.6512
0.6541
0.6953
2.15
0.674 1.249 99.59
0.674 1.282 100.37
0.674 1.254 102.81
0.674 1.282 106.52
0.674 1.254 102.81
102.42 2.64
2.9　样品含量测定
分别精密称取不同产地的样品 , 每批平行取 5份 , 按
2.3测定方法操作 , 测定每批样品中总酚平均含量 , 结果见
表 2。
3　讨论
植物多酚的测定方法有多种 [ 3, 4] , 曾考察普鲁士蓝
法 [ 5] 、 重氮比色法 [ 6]等 , 均因为方法显色不稳定或方法步
骤复杂而未采用。而 Folin酚法实验操作较简单 , 且结果
稳定可靠 , 此方法的开发利用有利于快速测定大批量样品 ,
实验证明本法符合要求 , 可广泛使用。
表 2　不同批次样品总酚含量 (n=5)
样品 总酚平均含量 (mg· g-1) RSD(%)
1 0.736 2.72
2 0.854 3.11
3 1.208 2.34
4 0.913 1.74
5 1.754 3.07
6 0.329 2.47
参考文献
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(收稿日期:2010.12.09)
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