全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１３（０６）：９０～９３
第一作者简介：石彩娟（１９８７－），女，河北邯郸人，硕士，现主要从事
药用植物资源与分子生物学的研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃａｉｊｕａｎｓｈｉ＠
１６３．ｃｏｍ．
责任作者：王万军（１９６２－），男，四川南充人，博士，教授，研究方向
为植物生物技术。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｊｕｎｗａｎｇ＠ｈｏｍｅ．ｓｗｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１２７１３０２）。
收稿日期：２０１２－１１－０７
黑节草再生植株壮苗培养条件的优化
石 彩 娟，范 高 韬，朱 梦 丽，王 万 军
（西南交通大学 生物工程学院，四川 成都６１００３１）
摘 要：以黑节草种子为外植体，研究比较了基本培养基、蔗糖、激素及激素组合对黑节草试
管苗生长的影响。结果表明：以１／２ＭＳ大量元素、ＭＳ全量微量元素及有机物为基本培养基，附
加２％蔗糖、１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和１．０ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ，组成壮苗培养基，能有效地诱导再生植株的新根
萌发并能促进茎和根的发育。
关键词：黑节草；再生植株；壮苗培养
中图分类号：Ｓ ５６７．２３＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１３）０６－００９０－０４
黑节草（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌ ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．）属兰
科石斛属多年生草本附生植物［１］，又名铁皮石斛，是我
国传统的名贵中药材。由于过渡采挖，已导致资源枯竭
而成为濒危植物。因此，自２０世纪７０年代以来我国各
地相继开展了黑节草快速繁殖技术研究以解决资源短
缺问题［２］，研究热点主要集中在丛生芽的诱导和原球茎
的增殖与分化方面［３］，但对黑节草试管苗的壮苗培养研
究鲜有报道。该试验以黑节草再生植株为材料，比较了
各种壮苗培养基的培养效果，以期寻找为入土移栽提供
整齐、高大、健壮以及根系发达的试管苗的培养条件。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
以黑节草种子在 ＭＳ基础培养基上萌发形成的幼
苗为外植体诱导再生植株，以这些再生植株为材料，筛
选最佳壮苗培养基。
１．２ 试验方法
黑节草壮苗培养基由基本成分、蔗糖、激素及０．５５％
琼脂组成，基本成分包括ＭＳ基础培养基中的大量元素、
微量元素、铁盐和有机元素，各壮苗培养基中的基本成
分、蔗糖及激素组成如表１～４所示，其中１／２ＭＳｍ培养
基指基本成分仅含ＭＳ基础培养基中大量元素的１／２和
铁盐，而不含任何其它微量元素和有机元素；１／５ＭＳ、
１／２ＭＳ和ＭＳ指基本成分中的大量元素是 ＭＳ基础培
养基中大量元素的１／５、１／２和全量，而基本成分中的微
量元素、铁盐和有机元素与 ＭＳ基础培养基中的一致。
配制时，首先将琼脂加热溶化至沸腾，稍凉后分别加入
如表１～４所示各成分，然后用１．０ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ或
１．０ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ 调ｐＨ 至５．８～６．２，再分别分装到
１５０ｍＬ的三角瓶中，每瓶４０ｍＬ。最后，在１０５ｋＰａ、
１２１℃条件下湿热灭菌２０ｍｉｎ。将具２～３片小叶（最大
叶面积约为２ｍｍ×５ｍｍ）、１～２条短根（最长根约
１ｃｍ）、苗高约为０．５ｃｍ的黑节草再生植株转接于不同
的壮苗培养基中，每种培养基接４瓶，每瓶接４～５株，培
养温度为（２５±１）℃，每日光照１２ｈ，光照强度２ ０００～
３ ０００ｌｘ，２次重复。
１．３ 数据分析
培养６０ｄ后统计根的条数和叶片数，测量根和茎的
长度与径度。根长和茎高用普通直尺进行测量，根和茎
的径度分别在根的基部与茎的膨大部用游标卡尺（Ａ
型，１５０ｍｍ）测量，将所测数据进行算术平均，统计分析
采用ｔ检验。
２ 结果与分析
２．１ 基本培养基成分对黑节草再生植株的影响
在黑节草壮苗培养过程中，比较了培养基中的４种
基本成分对黑节草再生植株生长的影响，结果如表１中
１、２、３、４号所示，其中１号是对照。经差异显著性检验，
１号与４号培养基相比对根径的影响达到显著水平
（Ｐ＜０．０５），３号与４号培养基相比对根数的影响达到显
著水平（Ｐ＜０．０５），２号与４号培养基相比对根长的影响
都达到极显著水平（Ｐ＜０．０１），１、２、３号与４号培养基相
比对叶数的影响均达显著水平（Ｐ＜０．０５）。各基本培养
基对根、茎的生长均有显著作用。当培养基中 ＭＳ大量
元素小于１／２时，根的伸长生长受到抑制，全量元素时
根的伸长生长和根的径向生长都受到明显促进，但全量
０９
北方园艺２０１３（０６）：９０～９３ ·生物技术·
元素又能明显抑制新根的萌发。同时，培养基中加入微
量元素和有机物有利于根的径向生长。综合考虑，３号
是比较适宜的基本培养基，对再生植株根、茎的生长以
及新根的萌发有促进作用。
表１ 培养基基本成分对黑节草
再生植株生长的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｇｒｏｗｔｈ
培养基
编号
基本成分
蔗糖
／％
再生植株的生长
根数 根径／ｍｍ 根长／ｃｍ 叶数 茎高／ｃｍ 茎径／ｍｍ
１（ＣＫ）１／２ＭＳｍ ２ ３ａ ０．４７ａ １．９２Ａ ４ａ １．４８ａ ２．１１ａ
２ １／５ＭＳ ２ ３ａ ０．５７ｂ １．７８Ｂ ４ａ １．５３ａ ２．４４ｂ
３ １／２ＭＳ ２ ４ｂ ０．６３ｂ １．９０Ａ ４ａ １．７４ａ ２．４１ｂ
４ ＭＳ ２ ３ａ ０．６６ｂ ２．００Ａ ５ｂ １．６６ａ ２．１１ａ
注：不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），不同大写字母表示差异极显著（Ｐ＜
０．０１）。下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｍａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｍｅａｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０５ｌｅｖｅｌ，ａｎｄ ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｃａｐｉｔａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｍｅａｎ ｖｅｒｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０１ｌｅｖｅｌ．Ｓａｍｅ ａｓ ｂｅｌｏｗ．
２．２ 蔗糖对黑节草再生植株生长的影响
在基本培养基中附加不同浓度的蔗糖，以５号培养
基为对照，结果见表２中３、５、６、７号培养基所示。经差
异显著性检验，蔗糖对茎高、茎径、根长、叶数的影响不
显著，但对根径和根数有显著作用，３、７号培养基与５号
培养基相比对根径的影响达到极显著水平（Ｐ＜０．０１），６、
３、７号培养基与５号相比对根数的影响达到显著水平
（Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，蔗糖对再生植株在培养过
程中能显著促进其新根的萌发及根的径向生长，其中以
３号（在培养基中添加２％的蔗糖）最适合黑节草再生植
株的生长。
表２ 蔗糖对黑节草再生植株生长的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｓｕｃｒｏｓｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｇｒｏｗｔｈ
培养基
编号
基本成分
蔗糖
／％
再生植株的生长
根数 根径／ｍｍ 根长／ｃｍ 叶数 茎高／ｃｍ 茎径／ｍｍ
５（ＣＫ） １／２ＭＳ ０ ３ａ ０．３７Ａ １．７８ａ ４ａ １．６２ａ ２．０５ａ
６ １／２ＭＳ １ ４ｂ ０．４５Ａ １．６７ａ ４ａ １．６９ａ ２．０２ａ
３ １／２ＭＳ ２ ４ｂ ０．６３Ｂ １．９０ａ ４ａ １．７４ａ ２．４１ａ
７ １／２ＭＳ ３ ４ｂ ０．５５Ｂ １．６６ａ ５ｂ １．９２ａ ２．３１ａ
２．３ ＮＡＡ对黑节草再生植株生长的影响
以３号培养基为对照，附加不同浓度的ＮＡＡ，培养
效果见表３中３号及８～１２号培养基所示。结果经差异
显著性检验，９号培养基与３号相比对根长的影响达显
著水平（Ｐ＜０．０５），１１、１２号培养基与３号相比对茎高、
茎径、根径的影响达显著水平（Ｐ＜０．０５），１０、１１、１２号
培养基与３号相比对根数的影响达到极显著水平
（Ｐ＜０．０１）。结果显示，ＮＡＡ对再生植株萌发新叶无显
著作用，但在低浓度下，对根和茎的伸长生长有促进作
用；０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ对根的伸长生长最佳，１．０ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ对茎的伸长生长较好，超过此浓度，ＮＡＡ又可抑
制根和茎的伸长生长；相对于伸长生长，ＮＡＡ对根和茎
的径向生长也表现出同样的作用，１．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ可使
根径和茎径达到最大值；当ＮＡＡ浓度超过０．５ｍｇ／Ｌ
时，可抑制再生植株萌发新根，这种作用还随ＮＡＡ浓度
增加而增强。这些结果表明，在基本培养基中添加一定
浓度的ＮＡＡ对黑节草再生植株的生长有促进作用，但
超过一定浓度后又阻碍再生植株的发育。综合考虑，在
培养基中附加０．５～１．０ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ较为合适，在其
中生长的黑节草再生植株的状态较好，同时对黑节草苗
的丛生也有一定的促进作用。由此可以看出，ＮＡＡ在
黑节草壮苗过程中是一个重要的调控因子，其适宜浓度
有利于再生植株的发育。
表３ ＮＡＡ对黑节草再生植株生长的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ＮＡＡ ｉｎ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｇｒｏｗｔｈ
培养基
编号
基本
成分
蔗糖
／％
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
再生植株的生长
根数
根径
／ｍｍ
根长
／ｃｍ
叶数
茎高
／ｃｍ
茎径
／ｍｍ
３（ＣＫ）１／２ＭＳ ２ ０ ４Ａ ０．６３ａ１．９０ａ ４ａ １．７４ａ ２．４１ａ
８ １／２ＭＳ ２ ０．２ ４Ａ ０．６７ａ２．０７ａ ５ｂ １．８５ａ ２．２４ａ
９ １／２ＭＳ ２ ０．５ ４Ａ ０．６９ａ２．４６ｂ ４ａ １．７８ａ ２．５６ａ
１０ １／２ＭＳ ２ １．０ ３Ｂ ０．７８ａ１．６６ａ ５ｂ １．８８ａ ２．３４ａ
１１ １／２ＭＳ ２ １．５ ３Ｂ １．０３ｂ１．５５ａ ４ａ １．６９ｂ ２．８８ｂ
１２ １／２ＭＳ ２ ２．０ ２Ｂ ０．５１ｂ１．８１ａ ５ｂ １．５５ｂ ２．８０ｂ
２．４ 激素组合对黑节草再生植株生长的影响
在上述试验基础之上，以９、１０号培养基为对照，进
一步考察了ＮＡＡ与ＩＡＡ和ＩＢＡ的激素组合对黑节草
再生植株的壮苗效果，结果见表４所示。经差异显著性
检验，１６、１７号培养基与其它各培养基相比都对茎高的
作用达显著水平（Ｐ＜０．０５），使茎的伸长生长达到最大；
１８、１９、２０号培养基与其它各培养基相比对茎径的影响
都达到极显著水平（Ｐ＜０．０１），表明在ＮＡＡ和ＩＢＡ的组
合中，只要其中之一为较高浓度时就抑制茎的径向生
长；１３～２０号培养基与９号培养基相比对叶数的影响均达
显著水平（Ｐ＜０．０５），而与１０号培养基相比无显著差异，
表明激素组合比低浓度ＮＡＡ更能促进新叶的产生；１６、
１７、２０号培养基与９号以及１０号培养基相比对根长的影
响都达到显著水平（Ｐ＜０．０５），其中以１６号培养基促进最
大，以２０号培养基抑制最强，表明较高浓度的ＩＡＡ与
ＮＡＡ组合能促进根的伸长，而较高浓度的ＩＢＡ与ＮＡＡ
组合则抑制根的伸长；１４、１８、２０号培养基与９号以及１０
号培养基相比对根径的影响达到显著水平（Ｐ＜０．０５），
表明ＩＡＡ抑制根的径向生长，当ＮＡＡ为１．０ｍｇ／Ｌ时
又能部分降低这种抑制作用，ＩＢＡ在０．５ｍｇ／Ｌ时能促
进根的径向生长，但这种促进作用不显著，而当ＩＢＡ为
１．０ｍｇ／Ｌ时却能显著抑制根的径向生长；１３、１４、１８、２０
号培养基与９号培养基相比以及１６号培养基与１０号培
养基相比对根数的影响达显著水平（Ｐ＜０．０５），表明当
ＮＡＡ对新根萌发有最佳促进作用时，与ＩＡＡ、ＩＢＡ组合
则抑制这种作用，而当ＮＡＡ的浓度抑制新根萌发时，若
ＩＡＡ为１．０ｍｇ／Ｌ或ＩＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ时，又可显著促进
１９
·生物技术· 北方园艺２０１３（０６）：９０～９３
表４ 不同激素组合对黑节草再生植株生长的影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ’ｓ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｇｒｏｗｔｈ
培养基
编号
基本成分 蔗糖／％
激素组成／ｍｇ·Ｌ－１ 再生植株的生长
ＮＡＡ ＩＡＡ ＩＢＡ 根数 根径／ｍｍ 根长／ｃｍ 叶数 茎高／ｃｍ 茎径／ｍｍ
９（ＣＫ） １／２ＭＳ ２ ０．５ ０ ０ ４ａ ０．６９ａ ２．４６ａ ４ａ １．７８ａ ２．５６Ａ
１０（ＣＫ） １／２ＭＳ ２ １．０ ０ ０ ３ ０．７８ １．６６ ５ １．８８ ２．３４
１３ １／２ＭＳ ２ ０．５ ０．５ ０ ３ｂ ０．６２ａ １．８８ａ ５ｂ １．７７ａ ２．４８Ａ
１４ １／２ＭＳ ２ ０．５ １．０ ０ ３ｂ ０．５０ｂ＊ ２．０２ａ ５ｂ １．７２ａ ２．４０Ａ
１５ １／２ＭＳ ２ １．０ ０．５ ０ ３ｂ ０．７５ａ １．７５ａ ５ｂ １．９９ａ ２．４６Ａ
１６ １／２ＭＳ ２ １．０ １．０ ０ ４ａ＊ ０．７２ａ ２．７８ｂ＊＊ ５ｂ ２．４１ｂ＊ ２．５９Ａ
１７ １／２ＭＳ ２ ０．５ ０ ０．５ ４ａ＊ ０．７９ａ ２．４９ａ＊ ５ｂ ２．４３ｂ＊ ２．４５Ａ
１８ １／２ＭＳ ２ ０．５ ０ １．０ ３ｂ ０．５３ｂ＊ ２．０２ａ ５ｂ １．８１ａ ２．１９Ｂ＊＊
１９ １／２ＭＳ ２ １．０ ０ ０．５ ４ａ＊ ０．８７ａ １．７７ａ ４ａ＊ ２．１５ａ ２．１３Ｂ＊＊
２０ １／２ＭＳ ２ １．０ ０ １．０ ３ｂ ０．４３ｂ＊ １．５５ｂ＊ ５ｂ １．７４ａ ２．１０Ｂ＊＊
注：同一列中与对照９号相比，不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），不同大写字母表示差异极显著（Ｐ＜０．０１）；同一列中与对照１０号相比，＊＊表示差异极显著（Ｐ＜
０．０１），＊表示差异显著（Ｐ＜０．０５）。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｍａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ａｎｄ＊ ｍｅａｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０５ｌｅｖｅｌ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ ９ａｎｄ １０ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃａｐｉｔａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ａｎｄ＊＊ ｍｅａｎ ｖｅｒｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０１ｌｅｖｅｌ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ ９ａｎｄ １０ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
新根的萌发，使其达到最佳状态。因而，综合考虑，１６号
培养基是一种比较适宜的壮苗培养基，在该培养基上壮
苗的再生植株的培养效果较理想。
３ 讨论与结论
在铁皮石斛的组织培养研究中，一定浓度的ＮＡＡ
对铁皮石斛不定芽的分化和壮苗有一定的促进作用［６］，
该试验的结果同样也证明了这一点。但在黑节草再生
植株的壮苗培养过程中，外源激素对培养效果的影响还
与再生植株的起始状态有关，如果再生植株比较幼小
（刚由原球茎分化而成，茎高小于０．５ｃｍ），低浓度的
ＮＡＡ则并没有起到促进作用，在含ＮＡＡ的培养基中生
长的黑节草幼小再生植株苗逐渐变黄，生长状态不理
想。只有当再生植株具一定高度时（茎高为０．５ｃｍ左
右），低浓度的ＮＡＡ才对再生植株的生长起到很好的促
进作用，植株的生长状态比较理想。另外，在培养基中
附加ＮＡＡ和６－ＢＡ，与在９号培养基中生长的黑节草再
生植株相比较，茎和根系的生长都没有明显的优势，但
苗的丛生率比较高，９号培养基的黑节草植株萌发新根
和新叶的现象则不是很明显，可达到极显著差异水平，
这对黑节草幼苗的扩繁有比较好的效果。在黑节草再
生植株的壮苗培养过程中，还探讨了０．２％、０．５％、
１．０％不同浓度的活性炭对再生植株壮苗效果的影响。
与在３号培养基中的培养效果相比较，在添加活性炭的
培养基中生长的再生植株的状态较好，茎干粗壮、根系
发达、叶色浓绿，在附加３种不同浓度活性炭的培养基
中生长的再生植株的生长状态以含０．５％的活性炭的培
养基的培养效果较为理想，含０．２％的活性炭的培养基
次之，含１％的活性炭的培养基效果较差。表明活性炭
也是黑节草再生植株壮苗培养过程中的一个重要调控
因子，其作用机理尚有待进一步研究。
该研究以具一定大小的黑节草再生植株为对象，系
统考察了基本培养基、碳源、激素及活性炭在壮苗培养
过程中对再生植株根、茎的生长以及新根与新叶萌发
的影响，结果表明以１／２ＭＳ大量元素、全量 ＭＳ微量
元素和有机元素为基本培养基，并附加１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ、
１．０ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ、０．５％活性炭（Ｗ／Ｖ）和２％（Ｗ／Ｖ）蔗糖
组成壮苗培养基，较适合黑节草再生植株的壮苗培养，
能显著促进根、茎的伸长生长和径向生长，同时还能促
进再生植株萌发新根和新叶，从而使在其中生长的再生
植株具较发达的根系和较粗壮的茎干。
参考文献
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２９
北方园艺２０１３（０６）：９３～９６ ·生物技术·
第一作者简介：刘合霞（１９８４－），女，山东滕州人，在读博士，研究方
向为发育植物学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｈｅｘｉａ２０１０＠１６３．ｃｏｍ．
责任作者：周坚（１９６１－），男，博士，教授，博士生导师，研究方向为
发育植物学。
基金项目：江苏省教育厅资助项目（ＪＨ０７－０１２）；镇江市科技局资
助项目（ＮＹ２００８０３４）；江苏省研究生培养创新工程资助项目
（ＣＸＺＺ１２＿０５１９）。
收稿日期：２０１２－１２－１０
石蒜愈伤组织的诱导及其植株再生研究
刘 合 霞，周 坚
（南京林业大学 森林资源与环境学院，江苏 南京２１００３７）
摘 要：以石蒜为试材，研究了不同激素组合和外植体选择对石蒜愈伤组织诱导及植株再生
的影响。结果表明：外植体选择是石蒜愈伤组织诱导的关键因素，３种外植体中，种子胚诱导愈伤
组织的效果最好；在 ＭＳ＋２，４－Ｄ １．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ培养基中，诱导愈伤率最高可达
８２．４％。并能较好地诱导愈伤组织发生不定芽，ＭＳ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ能较好地诱导愈伤组织发
生根。石蒜再生植株进行移栽的最佳基质应为腐殖质和珍珠岩以１∶１的比例组成，其成活率
为７０％。
关键词：石蒜；愈伤组织；植株再生
中图分类号：Ｓ ６８１．９０３．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１３）０６－００９３－０４
石蒜（Ｌｙｃｏｒｉｓ ｒａｄｉａｔｅ Ｈｅｒｂ．）属单子叶植物纲石蒜
科（Ａｍａｒｙｌｉｄａｃｅａｅ）多年生草本植物［１］，别名老鸦蒜、蒜
头草，有些地方因多数种类花被裂片强烈反卷而称其为
龙爪花，还有些地方因其鳞茎有毒性，可作土农药杀灭
害虫，又称之为蟑螂花［２］。石蒜属植物不仅外形美观，
还具有较高的药用及营养保健价值，有广阔的开发应用
前景［３］。近年来市场上对石蒜属植物的需求量日益增
加，但石蒜有性杂交结实率很低，大部分是花而不实［４］；
其自然分球繁殖系数低、速度慢，因而它的快速繁殖成
为迫切需要解决的问题［５］。目前对石蒜组织培养的研
究较多，主要以鳞茎等为外植体，通过器官发生途径获
得再生植株，而通过诱导愈伤组织，再诱导细胞分化获
得完整植株的研究则较少；在大部分的研究中，愈伤组
织都是由诱导鳞茎等外植体获得，以种子胚为外植体诱
导愈伤组织获得完整植株的研究尚鲜见报道。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
２０１０年９月，待石蒜果实成熟后，于南京林业大学
南大山苗圃采集石蒜种子；石蒜组培苗，培养于南京林
业大学森林资源与环境学院组培室。
１．２ 试验方法
１．２．１ 外植体处理 石蒜种子处理：挑选健康饱满、大
小一致的石蒜种子，用洗涤剂洗净后，流水冲洗２～４ｈ。
在超净工作台上，将种子置于已灭菌的玻璃瓶中，用
Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｓｔｒｏｎｇ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ Ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｏｆ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌ ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．
ＳＨＩ Ｃａｉ－ｊｕａｎ，ＦＡＮ Ｇａｏ－ｔａｏ，ＺＨＵ Ｍｅｎｇ－ｌｉ，ＷＡＮＧ Ｗａｎ－ｊｕｎ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ ６１００３１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌ ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉａ ｗｉｔｈ ｓｕｃｒｏｓｅ，
ｈｏｒｍｏｎｅｓ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＮＡＡ （Ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ），ＩＡＡ （３－ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）ａｎｄ ＩＢＡ
（３－ｉｎｄｏｌｅｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ）ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｅｗ ｒｏｏｔｓ ｏｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ
ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｆｉｃｉｅｎｔｌｙ ｉｎｄｕｃｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｒｏｏｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｐｒｏｍｏｔｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｂａｓａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ｈａｌｆ ｏｆ
ｍａｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ａｎｄ ａｌ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｍｉｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎｉｃ ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｏｆ ＭＳ （Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ａｎｄ Ｓｋｏｏｇ）ｍｅｄｉｕｍ，
ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ １．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，１．０ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ ａｎｄ ２％ｓｕｃｒｏｓｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌ ｅｘ Ｌｉｎｄｌ；ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ
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