全 文 ：　　第 31卷　第 5期　 吉首大学学报(自然科学版) Vol.31　No.5　　
　　 2010年 9月 JournalofJishouUniversity(NaturalScienceEdition) Sept.2010　　
文章编号:1007-2985(2010)05-0104-03
野鸦椿水提物对大鼠抗肝纤维化的影响＊
高　辉 1, 2 ,钟　飞2 ,李春艳 2 ,吕江明 2 ,彭英福 2
(1.吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室 , 湖南 张家界　427000;2.吉首大学医学院药理教研室 ,湖南 吉首　416000)
摘　要:50只大鼠随机分为正常组 、模型组 、秋水仙碱组以及野鸦椿高 、低剂量组 , 除正常组外余灌胃给予 CCl4每周 2
次 , 共 8周造成慢性肝纤维化模型 ,第 4周开始秋水仙碱组给秋水仙碱 0.1mg/kg, 野鸦椿高 、低剂量组分别给野鸦椿水提物
1 mL/kg和 0.2 mL/kg,连续 5周 , 模型组及对照组给等体积生理盐水.给药结束后 , 处死动物取血 、分离血清 , 检测 HA、LN
及 PⅢP含量.结果发现 , 野鸦椿高 、低剂量组 HA、LN、PⅢP均明显低于模型组 , 高剂量组 HA、LN浓度与秋水仙碱组没有显
著性差异 , PⅢP则高于秋水仙碱组 , 而低于低剂量组.结果表明:野鸦椿水提物具有抗慢性肝纤维化的作用 , 并存在一定的
量效关系.
关键词:野鸦椿水提物;肝纤维化
中图分类号:R965.1　　　　　　 文献标志码:B
肝纤维化是慢性肝病的共同病理学改变 ,也是各种慢性肝脏疾病向肝硬化发展的必经阶段.研究表
明:肝纤维化是一种可逆的病理阶段 ,只要在肝纤维化阶段进行合理治疗 ,就可以逆转肝纤维化的进程 ,从
而达到缓解甚至治愈.野鸦椿(euscaphisjaponeca)为省沽油科野鸦椿属植物 ,是一种落叶小乔木 ,分布于
我国的暖温带地区.果实主要含异槲皮苷 、矢车菊素 -3-木糖 -葡萄糖苷 、紫云英苷 、山柰酚 -3-葡萄糖
苷及槲皮素 -3-葡萄糖苷等.
湘西地区使用其果实治疗肝炎 、肝硬化历史悠久 ,取得了一定的疗效.目前 ,关于野鸦椿的肝纤维化保
护作用尚未见报道 ,本实验主要观察野鸦椿对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝纤维化的保护作用.
1　材料和方法
1.1材料与试剂
SD雄性大鼠 50只 ,体重(150±10)g,由吉首大学动物中心提供.
采集来自湖南吉首地区的野鸦椿成熟果实 ,制成每毫升含生药 4 g的水提物.秋水仙碱 ,昆明制药有
限公司 ,批号 070732.CCl4 , 分析纯 , 北京化工厂 , 批号 20080209.透明质酸 (HA)放免试剂盒 ,批号
20090101;层粘连蛋白(LN)放免试剂盒 ,批号 20090108;Ⅲ型前胶原蛋白肽(PⅢP)放免试剂盒 ,批号
20090105,以上放免试剂盒均购自上海海研医学生物技术有限公司.
1.2仪器与设备
TGL-16G低温高速离心机(上海医用分析仪器厂);GC-911型 γ放射免疫计数器(中国科技大学科技
实业总公司).
＊ 收稿日期:2010-08-10
基金项目:湖南省教育厅科学研究项目 (10C1098);林产化工工程湖南省重点实验室开放基金资助项目
(JDZ201001);湖南省中医药管理局资助项目(2010085);吉首大学医学院资助项目
作者简介:高　辉(1977-), 男 ,安徽来安人 , 吉首大学医学研究所讲师 ,硕士 , 主要从事抗肝纤维化药物研究.
1.3方法
1.3.1动物模型建立及药物处理　将实验大鼠随机分成 5组 ,每组 10只 ,即正常组 、模型组 、秋水仙碱组以
及野鸦椿高 、低剂量组.造成大鼠肝纤维化模型方法:各组动物均饮用 350 mg/L苯巴比妥溶液 2周 ,随后
模型组及各给药组灌胃给予 CCl4 -橄榄油溶液(CCl4与橄榄油的容积比为 1∶1),首次每只大鼠给 0.08
mL,以后按 2mL/kg给予 ,每周 2次 ,每周称重 1次 ,调整剂量 ,总计给 CCl4 -橄榄油溶液 8周.[ 1-2]正常组
给等体积橄榄油.
给 CCl4 -橄榄油溶液第 4周开始给药 ,秋水仙碱组给秋水仙碱 0.1mg/kg,野鸦椿高 、低剂量组分别给
野鸦椿水提物 1mL/kg和 0.2 mL/kg,以上药物使用时均用生理盐水稀释成 2 mL灌胃给药 ,连续 5周 ,模
型组及对照组给等体积生理盐水.
1.3.2指标检测　给药结束后 ,各组大鼠腹主动脉取血 ,离心取血清 ,放免法检测 HA、LN、PⅢP.
1.4统计学处理
结果以 x±s表示 ,实验数据采用方差分析 ,组建比较用 q检验 ,统计由 SPSS12.0完成.
2　结果与分析
模型组大鼠血清 HA、LN及 PⅢP浓度显著高于正常组 ,野鸦椿高 、低剂量组均明显低于模型组;野鸦
椿高剂量组 HA、LN浓度与秋水仙碱组没有显著性差异 , PⅢ P则高于秋水仙碱组 ,而低剂量组 HA、LN及
PⅢP均高于秋水仙碱组;组间比较野鸦椿高剂量组 HA、LN及 PⅢP均显著低于低剂量组 ,见表 1.
表 1　野鸦椿水提物对肝纤维化大鼠血清 HA、LN及 PⅢP的影响( x±s, n=10)
组别 HA/(μg· L-1) LN/(μg· L-1) PⅢP/(μg· L-1)
正常组 84.2±12.86 23.49±4.93 17.43±2.16
模型组 330.36±47.07a 49.76±8.54a 39.82±4.35a
秋水仙碱组 164.94±23.55 26.28±5.14 21.61±3.37
野鸦椿低剂量组 185.35±28.15abc 42.35±7.93abc 32.01±4.18abc
野鸦椿高剂量组 161.66±22.53abd 28.29±5.65ebd 25.93±3.63abfd
　　　　注　a表示与正常组比较 p<0.01;b表示与模型组比较 p<0.01;c表示与秋水仙碱组比较 p<0.01;d表示与野鸦椿低剂量
组比较 p<0.01;e表示与正常组比较 p<0.05, f表示与秋水仙碱组比较 p<0.05;
3　讨论
HA、LN、PⅢP都是肝细胞外基质代谢过程中的一部分 ,都是肝纤维化和基质沉积相关的直接指标.
HA对反映肝病变程度和肝纤维化程度较敏感 ,而且在几项血清学指标中特异性最高 [ 3] ;LN血清水平与肝
纤维化程度及门脉 -肝静脉压力梯度有关 [ 4] ;PⅢP可作为活动性肝纤维化的指标.
因此 3项联用具有较高的敏感性和特异性.野鸦椿水提物高 、低剂量组均可显著降低大鼠血清 HA、
LN、PⅢP的水平 ,且高剂量组三者水平均低于低剂量组 ,显示出一定的剂量依赖性.病理切片也显示野鸦
椿水提物高 、低剂量组肝细胞的炎症水肿 、胶原纤维沉积等情况要好于模型组 ,这些都说明野鸦椿水提物
具有良好的抗肝纤维化作用.
CCl4致肝纤维化与其在肝细胞内质网中经细胞色素 P450依赖性混合功能氧化酶的代谢 、生成活泼的
三氯甲基自由基和氯自由基有关 ,这些自由基可与细胞内和细胞膜的大分子发生共价结合 ,使酶的功能丧
失 ,细胞膜脂质过氧化 ,损伤肝细胞 [ 1] .如长期反复多次给予 CCl4 ,引起肝细胞坏死及组织炎症 ,并刺激胶
原纤维增生 ,并逐渐加重形成肝硬化.野鸦椿水提物富含黄酮类物质 ,体外实验表明具有很强的自由基清
除能力 ,其抗肝纤维化作用可能与清除 CCl4在肝内代谢产生的大量自由基有关.此外 ,有研究表明野鸦椿
含有多种抗炎成分[ 5] ,因此也可能通过抑制肝损伤时炎症反应而发挥抗肝纤维化作用.
参考文献:
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EffectsofWaterExtractsfromEuscaphisJaponicaon
HepaticFibrosisinRats
GAOHui1, 2 , ZHONGFei2 , LIChun-yan2 , LVJiang-ming2 , PENGYing-fu2
(1.HunanProvinceKeyLaboratoryofForestProductsandChemicalIndustryEngineering, JishouUniversity,
Zhangjiajie427000, HunanChina;2.DepartmentofPharmacology, MedicalCollegeof
JishouUniversity, Jishou416000, HunanChina)
Abstract:Fiftyratswererandomlydividedintonormalgroup, modelgroup, Colchicinegroup, highandlowdose
EuscaphisJaponicagroups.HepaticfibrosismodelswereestablishedbyCCl4 twiceaweekviaintragastricadmin-
istrationfor8 weeksexceptnormalgroups.Colchicine(0.1 mg/kg)hadbeenadministeredtotheColchicine
group, waterextractsfromEuscaphisJaponica(1 mL/kgor0.2 mL/kg)hadbeenadministeredtothehighand
lowdoseEuscaphisJaponicagroupsfromthefourthweek.Fiveweekslater, alratswerekiledtodrawbloodand
separateserum, andthenalserumsampleswereanalysed.TheresultsshowedthatthelevelsofHA, LNandPⅢ
PinthehighandlowdoseEuscaphisJaponicagroupsweresignificantlylowerthanthoseinthemodelgroups;
therewerenosignificantdiferencesofHA, LNconcentrationbetweenthehighdosegroupandColchicinegroup;
andthelevelofPⅢPinhighdosegroupwashigherthenthatinColchicinegroupbutlowertheninlowdose
group.ItisconcludedthatwaterextractsfromEuscaphisJaponicacanbeusedtotreathepaticfibrosisinadose-
dependentmanner.
Keywords:waterextractsfromEuscaphisJaponica;hepaticfibrosis
(责任编辑　向阳洁)
106 吉首大学学报(自然科学版) 第 31卷