全 文 ：第 41 卷第 1 期
2012 年 1 月
应 用 化 工
Applied Chemical Industry
Vol． 41 No． 1
Jan． 2012
收稿日期:2011-10-19 修改稿日期:2011-10-28
作者简介:刘莹(1970 － ) ，男，辽宁阜新人，辽宁工程技术大学副教授，硕士，主要从事生物化学研究。电话:
15941853933，E － mail:liuyingfx02@ 126． com
接骨木茎总黄酮的提取条件研究
刘莹，赵杰
(辽宁工程技术大学 理学院，辽宁 阜新 123000)
摘 要:用乙醇回流提取接骨木茎总黄酮，用分光光度法进行含量测定。考察了料液比、乙醇浓度、提取时间、提取
温度对接骨木茎总黄酮提取率的影响。结果表明，最佳提取工艺条件为:料液比 1∶ 40(g /mL) ，乙醇浓度 50%，提取
时间 1． 5 h，提取温度 70 ℃，提取次数 1 次，提取率为 0． 566%。
关键词:接骨木茎;总黄酮;分光光度法;提取工艺
中图分类号:TQ 914;TQ 917 文献标识码:A 文章编号:1671 － 3206(2012)01 － 0113 － 03
Study on extraction condition of total flavones from marigold stem
LIU Ying，ZHAO Jie
(College of Science，Liaoning Technical University，Fuxin 123000，China)
Abstract:The total flavones from marigold stem was extracted by alcohol refluxing． The spectrophotomet-
ric method was used to determine the content． The effect of material / liquid ratio，alcohol concentration，
extraction time，temperature on extraction rate of total flavones from marigold stem were studied． The re-
sults indicated that the optimum conditions were as follows:materal / liquid ratio 1 ∶ 40(g /mL) ，alcohol
concentration 50%，extraction time 1． 5 h，extration tempertare 70 ℃，extraction times 1． The extraction
rate was 0． 566% ．
Key words:marigold stem;total flavonoid;spectrophotometric method;extraction process
接骨木(Sambucus williamsii Hance)为忍冬科接
骨木属植物，又名续骨木、大接骨丹、公道老、扦扦
活、马尿骚等［1］。分布于中国东北、华北、华东、华
中、云南等地区。接骨木化学成分复杂，药理作用广
泛，临床用于治疗骨质疏松和促进骨折愈合疗效显
著，是一种很有开发价值的中药材［2］。黄酮类化合
物是其主要的药用成分之一，具有抗氧化性、抗菌作
用、免疫作用、治疗心脑血管疾病等保健功能［3］。
本文对接骨木茎总黄铜的提取条件进行了优化研
究，为中医临床用药提供理论基础，促进对接骨木的
开发和利用。
1 实验部分
1． 1 试剂与仪器
接骨木茎，实验室提供;芦丁对照品，南京替斯
艾么中药研究所;氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝均为
分析纯。
752 紫外可见分光光度计;L535-1 离心机;GZX-
9140MBE型数显电热恒温鼓风干燥箱。
1． 2 芦丁标准曲线绘制
称取干燥恒重的芦丁标准品 5 mg，用无水乙醇
定容于 50 mL容量瓶中，摇匀制得 0． 1 mg /mL的芦
丁标准溶液。
分别取 0，1． 0，2． 0，3． 0，4． 0，5． 0 mL 芦丁标准
溶液，置于 6 个 10 mL 比色管中，各加 30%乙醇使
之成为 5 mL，加入 5% NaNO2溶液 0． 3 mL 摇匀，放
置 6 min，加 10%Al(NO3)3 溶液 0． 3 mL，摇匀，放置
6 min，加入 l mol /L NaOH溶液 4 mL，再加蒸馏水稀
释至刻度，摇匀，放置 15 min。于 510 nm 处测定吸
光值，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准
曲线［4-5］，标准方程为 A = 10． 854C + 0． 013 8，相关
系数 r = 0． 995 1，说明总 黄 酮 在 0． 009 9 ～
0． 049 0 mg /mL范围内与吸光度有良好的线性关
系。
1． 3 总黄酮的提取
称取 l g接骨木茎粉末，置于 250 mL 圆底烧瓶
中，加入乙醇加热回流，提取 1． 5 h，过滤，滤液离心，
用乙醇定容到 50 mL 容量瓶中，备用。按绘制标准
曲线的方法测定含量，计算总黄酮的含量［5］。
总黄酮含量 = C × N × V
m × 103
× 100%
应用化工 第 41 卷
2 结果与讨论
2． 1 乙醇浓度对提取效果的影响
分别用浓度为 40%，50%，60%，70%，80%的
乙醇水溶液，在温度 70 ℃、料液比 l ∶ 30(g /mL)的条
件下，提取 1． 5 h，提取 1 次，结果见图 1。
图 1 乙醇浓度对总黄酮提取效果的影响
Fig． 1 Effect of alcohol concentration on
extraction of total flavonoids
由图 1 可知，当乙醇浓度低于 60%时，随着乙
醇浓度的增加，黄酮的提取率逐渐增加，但是当乙醇
浓度超过 60%时，黄酮的提取率逐渐降低，可能是
由于乙醇浓度过高，一些色素、挥发油、脂肪等成分
溶出量增加，这类物质影响吸光度，并与黄酮类化合
物竞争和乙醇结合［5］，从而导致黄酮类化合物提取
率下降。
2． 2 提取温度对提取效果的影响
分别在温度为 40，50，60，70，80 ℃，70%乙醇水
溶液，料液比 1 ∶ 30(g /mL)的条件下，提取 1． 5 h，提
取 1 次，结果见图 2。
图 2 温度对总黄酮提取效果的影响
Fig． 2 Effect of temperature on the extraction
of total flavonoids
由图 2 可知，温度在 40 ～ 60 ℃总黄酮含量随着
温度的升高显著增加;当温度高于 70 ℃时，总黄酮
含量又下降。
2． 3 料液比对提取效果的影响
分别用 1 ∶ 15，1 ∶ 20，1 ∶ 30，1 ∶ 40，1 ∶ 50(g /mL)的
料液比，在 70%乙醇水溶液，温度 70 ℃的条件下，
提取 1． 5 h，提取 1 次，结果见图 3。
图 3 料液比对总黄酮提取效果的影响
Fig． 3 Effect of material / liquid ratio on
the extraction of total flavonoids
由图 3 可知，随着料液比的增加，提取液的总黄
酮含量先增大后减少。在 1 ∶ 20 ～ 1 ∶ 30 (g /mL)时，
增加幅度比较显著;但当料液比增加到 1 ∶ 40
(g /mL)以后，提取率呈下降趋势。
2． 4 提取时间对提取效果的影响
在 70%乙醇水溶液，料液比 1 ∶ 30 (g /mL) ，温
度 70 ℃的条件下，分别提取 1，2，3，4，5 h，提取 1
次，结果见图 4。
图 4 提取时间对总黄酮提取效果的影响
Fig． 4 Effect of extraction time on extraction of total flavonoids
由图 4 可知，当提取时间为 1． 5 h 时效果最好。
提取时间过长，乙醇挥发，导致溶剂含量减少;发生
氧化和加热时间时增加使黄酮类化合物分解，稳定
性变差，导致提取率下降［6］。
2． 5 正交实验
根据单因素实验结果，选择影响提取效果各因
素做正交实验，因素水平见表 1，结果见表 2。
表 1 因素水平表
Table 1 Factors and levels
水平
A B C D
乙醇浓度 /% 温度 /℃ 料液比 /(g·mL －1) 提取时间 /h
1 50 60 1 ∶ 20 1． 5
2 60 70 1 ∶ 30 2． 0
3 70 80 1 ∶ 40 2． 5
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第 1 期 刘莹等:接骨木茎总黄酮的提取条件研究
表 2 正交实验结果
Table 2 The orthogonal experiment results
序号 A B C D
总黄酮含量 /%
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均值
1 1 1 1 1 0． 508 0． 365 0． 346 0． 406
2 1 2 2 2 0． 604 0． 535 0． 623 0． 587
3 1 3 3 3 0． 724 0． 586 0． 650 0． 653
4 2 1 2 3 0． 618 0． 673 0． 457 0． 583
5 2 2 3 1 0． 614 0． 678 0． 687 0． 660
6 2 3 1 2 0． 254 0． 360 0． 494 0． 369
7 3 1 3 2 0． 461 0． 494 0． 618 0． 524
8 3 2 1 3 0． 259 0． 457 0． 429 0． 382
9 3 3 2 1 0． 540 0． 687 0． 494 0． 574
K1 1． 646 1． 513 1． 157 1． 640
K2 1． 612 1． 629 1． 744 1． 744
K3 1． 480 1． 596 1． 837 1． 618
k1 0． 549 0． 504 0． 386 0． 547
k2 0． 537 0． 543 0． 581 0． 493
k3 0． 493 0． 532 0． 612 0． 539
R 0． 056 0． 039 0． 226 0． 054
由表 2 可知，影响接骨木茎总黄酮提取效果的
因素主次为:C ＞ A ＞ D ＞ B，即料液比 ＞乙醇浓度 ＞
提取时间 ＞提取温度，最佳组合为 A1B2C3D1，即选
择 70 ℃的提取温度，50%乙醇浓度，1 ∶ 40(g /mL)的
料液比，提取时间 1． 5 h。在最佳提取条件下浸提
1 次，进行 3 次平行实验，取平均值，总黄酮含量为
0． 566%。
3 结论
用乙醇回流提取接骨木茎总黄酮时，因素影响
的主次顺序为:料液比 ＞乙醇浓度 ＞提取时间 ＞提
取温度，最佳提取工艺条件为:料液比 1 ∶ 40
(g /mL) ，乙醇浓度 50%，提取时间 1． 5 h，提取温度
70 ℃，提取次数为 1 次，提取率为 0． 566%。
参考文献:
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