全 文 ：第 24 卷 第 6期
2 0 0 4年 1 1 月
浙 江 林 业 科 技
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文章编号 : l X() l 一 37 7 6 ( 2 《X科 ) 06 一0() l 8一0 2
葛叶总黄酮提取工艺的初步研究
柏明娥 , 钱 华 , 王衍彬 , 庄晓伟
(浙江省林业科学研究院 , 浙江 杭州 31 0 2
摘要 : 采用分光光度法 , 三氯化铝作显色剂 , 测定不同提取工艺条件下葛叶总黄酮含量 , 并对乙醇浓度 、 提取温
度及用石油醚预提等条件进行了分析 。 结果表明 : 用石油醚预提 、 70 %乙醇 、 80 ℃温度可以得到较高的提取率 ,
在此条件下总黄酮的含量为 .4 05 m吮 。
关键词 : 葛叶 ; 总黄酮 ; 提取工艺
中图分类号 : 57 89 4 文献标识码 : B
葛 ( 尸ue ar iar ot ba at )是豆科多年生藤本植物 , 喜生于山坡草丛中或路旁较阴湿的地方 , 分布很广 , 我国除
新疆 、 西藏外 , 全国各地均有大量的野生葛。 葛全身是宝 , 经济价值很高 , 葛根中因含有较高的葛根素 、 大豆
异黄酮等黄酮类物质 , 被我国卫生部正式公布为 “药食同源植物 ” , 已广泛运用于功能性食品及新药的研发 。
除利用块根外 , 葛藤 、 葛叶 、 葛根渣目前主要被作为饲料应用于养殖业 , 葛叶粉含有较丰富的营养成分 , 据测
定 , 加工制成的葛叶粉含粗蛋白 18 .2 8% 、 粗脂肪 .2 49 % 、 粗纤维 2 9 .91 % 、 粗灰分 8 . 72 % 、 无氮浸出物 39 . 1 1% 、
钙 1 2% 、 磷 .0 29 % 。 有关葛叶中黄酮类化学成分及含量分析 , 目前尚未见报道 。 笔者根据三氯化铝与黄酮类化
合物作用后 , 生成黄酮的铝盐络合物为黄色 , 黄色的深浅与黄酮的含量成一定的比例关系且可定量的原理 , 对
葛叶中总黄酮的提取工艺进行了初步分析并测定 , 旨在为葛叶资源的开发与综合利用提供科学依据 。
材料和方法
,
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, 试验材料
1
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1
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1 试验仪器 粉碎机 、 恒温水浴锅 、 7 21 分光光度计 。
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1
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2 试验材料 桶皮素为生化试剂 (购自上海试剂二厂 卜 葛叶样品于 2以 )4 年 7月中旬采 自浙江省开化县 ;
乙醇为分析纯 ; 无水 lA cl 3等。
1
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2 试验方法
1
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2
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1 对照 品溶液的制备 精密称取在 10 5℃下干燥至恒重的桶皮素对照品 l o gm , 置于 10 而 的容量瓶中 , 加
乙醇溶解 , 然后稀释至刻度线 , 摇匀即得 1m gl m l 的标准溶液 。 取上述标准溶液 .0 4 、 .0 6 、 .0 8 、 1 . 0 、 1 . 2 inl 于 10而
的容量瓶中 , 用蒸馏水定容至刻度线 , 则分别得到不同浓度 .0 04 、 .0 06 、 .0 08 、 0 . 10 、 0 . 12 m岁而 的标准溶液。
1
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.2 2 标准曲线的绘制 分别从上述制备的标准溶液中 , 精确量取 .2 5而 于 25 inl 的容量瓶中 , 加人 1%的 lA a 3
溶液定容至 25 inl , 摇匀。 1 0 n it n 后 , 用 7 21 分光光度计以 c3 m 比色皿 、 42 0n m 波长 、 l % lA cl 3溶液为空白 , 测
定吸光度 , 绘制桶皮素浓度与吸光度的标准曲线。
1
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2
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3 样品提取工艺的确定 取经粉碎的干燥葛叶若干 , 平均分成 8份 , 每份 1 . 0 39 79 , 按以下工艺进行提取总
黄酮试验 : 泣汾别用 50 % 、 60 % 、 70 % 、 80 %乙醇提取 ; ②用 70 % 乙醇分别于 60 、 70 、 80 、 90 ℃温度提取 ; ③
用石油醚于 50 ℃温度下预提 h2 后 , 用 70 % 乙醇在 80 ℃温度下提取 。 以上工艺各提取 2 次 , 每次 h2 , 溶剂用量
收稿日期 : 2仪只一 10 一01
作者简介 : 柏明娥 ( 19 6 - 女 , 浙江嘉兴人 , 工程师 , 从事林产化工研究 。
6 期 柏明娥 , 等 : 葛叶总黄酮提取工艺的初步研究
为每次 50ml , 合并二次浸提液 、 过滤 , 定容至 100 n U , 备测 。
1
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.2 4 样品总黄酮含量测定 精确量取于各种不同条件下制备的样品溶液 2 .5 刘 于 25 而 具塞试管中 , 加入 1%的
.076.2435
试、侧采咨
lA cl 3溶液定容至 25 司 , 摇匀 。 10而 n 后 , 用 7 21 分光
光度计分别测定其吸光度 , 由回归方程计算各样品中
总黄酮含量 。
2 结果和分析
2
.
1 实验标准曲线
由实验测得标准曲线如图 l , 利用一元线性回归
分析得标准曲线为 Y = .4 98A + .0 0 7 8 , 相关系数 R 二
.0 9 8 0
。 结果表明桶皮素浓度在 。 一 0 . 12 m岁m l 范围内
与吸光度呈良好的线性关系 。
.2 2 提取工艺的确定
.2 2
.
1 乙醇浓度对总黄酮提取量的影响 由表 1可知 ,
以 7 0% 乙醇提取总黄酮含量最高 , 较低或较高乙醇浓
度都不能提高葛叶总黄酮的提取量 。
.2 .2 2 提取温度对总黄酮提取量的影响 由表 2可知 ,
提取温度为 80 ℃时提取量为最高。
.2 .2 3 石油醚预提对总黄酮提取量的影响 由表 3 可
知 , 经过石油醚预提可以得到较高的总黄酮提取量 ,
可能是由于石油醚的预提去掉了一部分叶绿素 , 有利
于黄酮类物质的浸出。
3 结论
.0 02 .0 04 0
.肠 .0 08
桶皮素浓度 lm g · inl 一 ,
0
.
1 0
.
1 2
图 l 桶皮素标准样品浓度与吸光度的关系
表 1 不同乙醉浓度对蕊叶总黄酮提取 , 的影晌
乙醇浓度尹%
黄酮含量了m g · 扩
5 0 6 0 7 0
2
.
6 7 3
.
0 3
表 2 不同提取沮度对葛叶总黄醉提取 , 的影晌
温度产℃
黄酮含量仙 9 . 9一 ,
7 0 8 0 9 0
3
.
0 3 3 5 7 3
.
6 8 3
.
4 2
表 3 石油酸预提对葛叶总黄酮提取 , 的影晌
石油醚预提
黄酮含蛋俪 9 . 扩
预提
.4 05
不预提
以上结果分析表明 , 葛叶中含有黄酮类成分 , 在用石油醚预提 、 70 % 乙醇 、 so ℃温度的工艺条件下提取 ,
可以得到较高的总黄酮提取率 , 在此条件下提取液总黄酮的含量为 .4 05 m gl g 。 此次主要就葛叶总黄酮的提取工
艺与含量进行了初步研究 , 有关其黄酮类化合物的类型等有待进一步深入探讨 。
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浙 江 林 业 科 技 2 4卷
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信息
“ 全已林必科核期刊 发展研衬套 ” 在杭州召开
由中国林学会 、 北京林业大学 、 浙江省林学会三家单位共同主办 , 浙江省林学会承办的 “全国林业科技期
刊发展研讨会 ” 于 2以科年 12 月 3 一 7 日在杭州召开 。 参加会议的领导有中国林学会常务副秘书长李岩泉 、 北京
林业大学副校长陈晓阳 、 国家林业局科技司综合处处长尹刚强 、 中国林学会副秘书长尹发权 、 浙江省林业厅副
厅长吴鸿 、 浙江省科协学会部主任胡国军 、 浙江省林业厅科技处处长郑礼发 、 浙江省林业科学研究院院长汪奎
宏及各期刊代表共 90 多人 。 会议由中国林学会副秘书长尹发权主持 , 浙江省林业厅吴鸿副厅长致欢迎辞 。
中国林学会副秘书长尹发权就 “加强交流合作 促进期刊发展 ” 进行主题发言 ; 北京林业大学 、 中国林学
会等代表作 “科技期刊参考文献及国内外主要文献数据库收录的最新动态 ” 、 “我国科技期刊评价 、 评奖现状 ” 、
“科技期刊对科学道德规范建设的支持及期刊间合作的可行性 ” 报告 ; 《林业科学 》 、 《北京林业大学学报》 、
《人造板通讯 》 、 (浙江林业科技 》 等的期刊负责人就编辑部的人员编制 、 行政归属 、 经费 、 稿源 、 期刊特色 、
发行以及存在问题等情况做了介绍 , 对建立编辑部间审稿 、 广告协作机制和全国林业期刊网进行了可行性探讨 ;
《中国林学 》特邀编辑 、 加拿大林学家 H aZ e bn egr G而 t介绍了国夕琳业期刊 、 英文科技写作及我国林业科技期
刊主要的英文错误情况 ; 同时大会对中国林学会林业科技期刊分会筹建方案与工作条例进行了讨论 , 并建立了
中国林学会林业科技期刊分会筹备委员会 , 研讨了 2 0 5 年活动计划 ; 与会代表就今后林业科技期刊改革与可持
续发展进行自由发言 。
期间与会代表对浙江奉化的林业建设进行了考察。
浙江省林学会