全 文 ：其良好的活血化瘀作用 [ 3] , 我们相信狭叶红景天有望成为一
个治疗糖尿病的良药 。
参考文献:
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淡竹沥四种不同制备工艺的比较研究
熊 艳 1 , 吴学文 1 ,蒋孟良2
(1.湘潭大学化工学院 ,湖南 湘潭 411105;2.湖南中医药大学药学院 ,湖南 长沙 410007)
收稿日期:2005-05-13
作者简介:熊 艳(1974～ ),女 ,湖南长沙人 ,讲师 ,主要从事天然药物的质量标准与新药开发研究 ,电话:0732-8293876, E-m ail:xiongy-
an2006@ yahoo. com。
关键词:淡竹沥;制备工艺;愈创木酚;高效液相法;回流提取法
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2006)12-1825-02
淡竹沥系禾本科刚竹属淡竹 Phy llostachy s n igra(Lodd. )
Munro var. henon is(M iff) S tapf ex Rendle和其他一些竹种的
秆用火烤灼流出的淡黄色澄清的液汁 [ 1]。具有清热化痰 ,开
窍定惊的作用 , 用于治疗痰热咳嗽 , 痰黄气促 , 中风痰盛 , 惊
风 、破伤风等证 [ 2] 。竹沥中主要含有机酸 、酚和氨基酸类成
分 [ 3, 4] , 文献报道祛痰止咳作用的活性成分为愈创木酚 [ 5] 。
除传统炮制法可制备竹沥外 ,还有渗漉法 [ 6] 。文献报道有采
用气相色谱法测定其中愈创木酚的含量 [ 7] ,而使用高效液相
色谱法测定却未见报道 , 故以淡竹沥中活性成分愈创木酚转
移率为评价指标 , 通过高效液相色谱法对淡竹沥不同制备工
艺进行比较。
1 实验材料
1. 1 药材
淡竹为禾本科刚竹属淡竹 Phy llostachy s nigra (Lodd. )
Munro var. henon is(M itford) S tap f ex Rendle, 采自湖南长沙
岳麓区 , 经湖南中医药大学生药教研室周日宝教授鉴定 , 标
本存于湖南中医药大学中药教研室。
1. 2 试剂
HPLC用水为超纯水 , 乙腈为色谱纯。其它试剂均为分
析纯。
1. 3 对照品
愈创木酚对照品购于中国药品生物制品检定所 , 批号
1510 -200101,供含量测定用。
1. 4 仪器
岛津 LC-10A高效液相色谱仪 , SPD-10A紫外检测器。
2 样品溶液的制备
2. 1 干馏法
选同一批淡竹 ,竿径竹长相近 , 除去枝叶 , 两端去节 , 劈
成规格约为 2 cm ×30 cm的竹条 , 称取 500. 0 g两份 ,按传统
方法置坛内 ,四周及底部用木炭围严 ,下接一容器 , 火烤至汁
尽为止 ,将所得淡竹沥定容至 50 m L量瓶。
2. 2 烧制法
选同一批淡竹 ,竿径竹长相近 , 除去枝叶 , 两端去节 , 称
取 500. 0 g两份 , 用火从竹段中间点燃 , 收集两头烧出的竹
沥汁 ,汁尽为止 , 所得淡竹沥定容到 50 mL量瓶。
2. 3 渗漉法
选同一批淡竹适当粉碎后 ,称取淡竹粗粉 ,每份 500. 0 g
两份。用 60 乙醇适量润湿后 , 分次装入渗漉筒中 , 盖一层
滤纸 ,上压碎玻片 , 然后加入相同溶媒使淡竹粉全部浸没并
留有 2 ～ 3 cm 液层 , 浸泡 18 h后用 5 000 m L 60 乙醇 , 以
0. 4 mL /m in的流速渗漉 , 收集渗漉液回收乙醇至无醇味 , 抽
滤 ,用蒸馏水洗至 500 m L的量瓶中 , 加水稀释至刻度。
2. 4 回流提取法
选同一批淡竹适当粉碎后 , 称取淡竹粗粉 50. 0 g两份。
置于圆底烧瓶中 , 用 500 m L 70 乙醇浸泡 60 m in后 , 于水
浴上回流提取 2次 ,溶媒用量均为 500 mL, 提取时间均为 2
h, 合并两次提取液回收乙醇至无醇味 , 抽滤 , 蒸馏水洗至
250 mL量瓶中 ,加水稀释至刻度。
3 含量测定
3. 1 色谱条件
Hypersil ODS C18色谱柱(5 μm , 4. 6 mm ×200 mm);流
动相:0. 5 三乙胺和 0. 5 磷酸的水溶液-乙腈 (78∶22);
流速:1. 0 m L /m in:柱温;20℃;检测波长:220 nm。
3. 2 对照品溶液制备
1825
2006年 12月
第 28卷 第 12期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Decem be r 2006
Vo.l 28 No. 12
用甲醇配制成 21. 56 μg /mL的对照品溶液 ,备用。
图 1 愈创木酚对照品(A)及样品(B)的 HPLC分析
3. 3 供试品溶液的制备
精密吸取上述样品溶液各 20 m L用稀盐酸调 pH值为 1
～ 2,用适量乙醚萃取 3次 , 合并萃取液用 5 碳酸氢钠溶液
洗涤 , 取乙醚层 ,合并乙醚萃取液 , 自然挥干 , 残渣用甲醇约
2 m L溶解 , 转移至 5 m L量瓶 , 用甲醇定容至刻度 ,摇匀。
3. 4 线性关系考察
精密吸取上述对照品溶液 3, 6, 9, 12, 15, 18 μL进样 , 按
上述色谱条件测定峰面积 , 以峰面积积分值为纵坐标 ,进样
量为横坐标 , 绘制标准曲线 , 回归方程为:y =2 ×106 x -
3042. 1, r=0. 999 5, 在 0. 064 68 μg -0. 388 08 μg范围内线
性关系良好。
3. 5 精密度试验
精密吸取对照品溶液 10 μL, 重复进样 5次 , 测定峰面
积 , RSD 为 1. 25 。
3. 6 稳定性试验
精密吸取样品溶液 10 μL分别于 0, 4, 8, 12, 16, 20, 24 h
进样 , 测定峰面积 , RSD为 1. 19 。
3. 7 重复性试验
取同一批样品溶液 5份 , 按供试品溶液方法制备得供试
液 , 测定吸收峰面积 , RSD为 1. 68 。
3. 8 加样回收率试验
精密吸取已知含量的样品液 ,平行 3组 ,每组两份 , 三组
中加入对照品与样品中愈创木酚含量的比例为 1∶ 0. 8、
1∶1、1∶1. 2, 其余按供试品溶液制备方法及上述色谱条件
测定 , 平均加样回收率为 95. 43 , RSD 为 3. 66 。
3. 9 原药材中愈创木酚的测定
选同一批淡竹适当粉碎后 , 准确称取淡竹粗粉 50. 0 g
两份。置于索氏提取器中 , 乙醇连续回流提取 6 h后 , 回收
乙醇至无醇味 ,抽滤 , 用适量蒸馏水洗至 250 m L量瓶中 , 加
水稀释至刻度。按供试品溶液制备方法制备供试液 , 过
0. 45μm微孔滤膜后 ,进样 , 测得愈创木酚含量为 2. 48 mg /g。
依次计算愈创木酚的转移率。
3. 10 样品含量测定
取三批样品 , 按供试品溶液制备方法制备供试液 , 过
0. 45μm微孔滤膜后 ,进样 , 结果见表 1。
表 1 不同制备工艺的淡竹沥中愈创木酚的含量
样品 制备方法 愈创木酚转移率( )
1 干馏法 0. 08
2 烧制法 0. 11
3 渗漉法 49. 5
4 回流提取法 84. 5
4 讨论
4. 1 实验结果表明 , 回流提取法制备的淡竹沥中愈创木酚
的转移率远高出传统烧制 ,原因是愈创木酚在高温下易于分
解 、挥发。我们在实验研究中发现竹龄 、采收时节 、保存方法
等都对中愈创木酚的含量有很大的影响 , 故研究中我们使用
的淡竹为同一次所采 ,并经冷藏处理。
4. 2 传统炮制方法收率低 、原材料消耗大且污染环境 , 炮制
过程中各因素难以控制;而渗漉法所需时间长 ,易受温度 、气
候各方面因素的影响。通过四种方法的比较研究可知 , 回流
提取法所用时间短 , 有效成分愈创木酚转移率高 , 易于工业
化操作 ,是淡竹沥首选的制备方法。
参考文献:
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Vo.l 28 No. 12