全 文 ：No.2.2007
2.6 精密度实验
对秦冠苹果样品9份平行样,在最佳测定条件下
进行测定,9份样品测定结果的相对平均偏差RSD为
2.01%。
2.7 加标回收率实验
对淳化县光果富士和澄城王庄镇秦冠两种样品
进行了3种浓度加标回收试验,样品加标回收率在
98.13%~103.18%之间,结果令人满意。
3 结论
建立了微波消解-原子荧光光谱法测定苹果中汞
的方法,采用密闭微波消解苹果样品,原子荧光光谱
法测定汞的含量,方法具有灵敏度高、检出限低、共
存元素干扰小、快速简便等优点,在最佳工作条件
下,回收率在98%～104%,而且实现了自动进样,减
少了工作强度。
参考文献：
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[2] 唐宝英,李玉洁.微波消解-冷原子吸收光谱法测定电池
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[3] 彭谦,张德云.微波消解-原子荧光光谱法测定化妆品中
的痕量汞[J].中国卫生检验杂志,2004,5(14):582-583
[4] 但德忠.现代微波制样技术[M].成都:四川大学出版社,
2003
样品名称 本底值 加标量 测定值 加标回收率(%)
光果富士
0.899 0.200 1.10536 103.18
0.899 0.500 1.40995 102.19
0.899 1.000 1.892 99.30
秦冠
0.141 0.200 0.33726 98.13
0.141 0.500 0.63455 98.71
0.141 1.000 1.1364 99.54
表3 回收率实验结果(单位:ng/g)
收稿日期：2006-07-24
作者简介：王自军(1971-),男,讲师,主要从事药物提取和有机化学的教学和研究工作。
淡竹叶中总黄酮和多糖的
微波提取与含量测定
王自军，杨红兵
(石河子大学化学化工学院,石河子 832002)
摘要：从淡竹叶中提取总黄酮和多糖,并测定其含量。运用微波技术提取淡竹叶总黄酮和多糖,用比
色法测定总黄酮和多糖含量。测得淡竹叶中总黄酮含量为1.62%,平均回收率为100.3%,相对标准偏
差(RSD)为1.77%(n=5);多糖含量为2.66%,平均回收率为98.86%,相对标准偏差(RSD)为2.21%(n=5)。
首次运用微波技术从淡竹叶中联合提取总黄酮和多糖,反应速度加快,提高了提取效率。
关键词：微波技术;淡竹叶;总黄酮;多糖;提取;含量测定
中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1005-9989(2007)02-0223-03
Microwavetechniqueextractionanddeterminationoftotalflavonoids
andpolysaccharidesinherballophatheri
WANGZi-jun,YANGHong-bing
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分析检测
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DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2007.02.062
No.2.2007
(ColegeofChemistryandChemicalEngineering,ShiheziUniversity,Shihezi832002)
Abstract:Toextractanddeterminetotalflavonoidsandpolysaccharidesinherballophatheri.Totalflavonoids
andpolysaccharidesinherballophatheriwereextractedbymicrowavetechniqueanddeterminedbycolorime-
try;Totalflavonoidsinherballophatheriis1.62%andrecoveryrateis100.3%,RSDwas1.77%(n=5);Polysac-
charidesinherballophatheriis2.66%,andrecoveryrateis98.86%,RSDis2.66%(n=5).Microwavetechnique
wasappliedtoextractingtotalflavonoidsandpolysaccharidesinherballophatheriforthefirsttime.Thereac-
tionspeedisfasterandtheresulissatisfactory.
Keywords:microwavetechnique;herballophatheri;totalflavonoids;polysaccharide;extraction;determination
中药淡竹叶为禾本科多年生草本植物淡竹叶
(HerbalLophatheri)的干燥茎叶。其味甘、淡,性寒,
归心、肺、胃经。具有清热除烦、清心、利尿的功
效,多用于热病烦渴,口舌生疮,小便赤涩淋痛等症[1]。
1977年以来的历版 《中华人民共和国药典》对其均有
收载。由于淡竹叶具有广泛的生物活性,近几年来
受到了国内外学者的关注。现在已经利用从淡竹叶
提取出的有效成分再配以其它辅料,制成了具有清
热解毒、清心利尿、健脾益气、消暑解渴功能的纯天
然清凉保健饮料[2]。
微波技术的应用在近年来得到很大发展。微波
具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波
辐射(MWI)可以大大加快反应速度,缩短反应时间[3]。
微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率[4]。
我们运用微波技术辅助测定淡竹叶中总黄酮和
多糖的含量[5],反应速度加快,实验结果令人满意。
为淡竹叶总黄酮和多糖的研究和开发,尤其在食品
领域里的利用奠定了基础。
1 仪器、样品及试剂
UV-2401型分光光度计(日本岛津),MCL-3型连
续微波反应器(四川大学无线电系)。对照品芦丁购自
中国药品生物制品检定所,其余试剂均为分析纯。
淡竹叶购自石河子中药店,粉碎后备用。
2 方法与结果
2.1 测定方法依据
以芦丁为对照品测定淡竹叶中总黄酮含量,加
入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物
与铝盐形成配合物在可见光区能获得稳定的特征吸
收峰。运用微波技术水提醇沉法制得淡竹叶粗多糖,
并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定。
2 淡竹叶中总黄酮和多糖的含量测定
样品溶液制备:取淡竹叶约2g,精确称定,用滤
纸包好,分置于索氏提取器中,用石油醚 (60～90℃)
水浴回流脱脂2次(每次2h),弃去石油醚提取液。淡竹
叶挥干石油醚后,置100mL烧瓶中,将此烧瓶放入
MCL-3型连续微波反应器中,用80%乙醇回流提取两
次,调整功率560W、500W、400W、350W,每次反应
时间20min,提尽黄酮。另用少量80%乙醇多次洗涤淡
竹叶,并入提取液中,定量转移入100mL容量瓶中,
加80%乙醇至刻度,摇匀,即得测总黄酮之淡竹叶样
品液。
将提尽黄酮后的淡竹叶置100mL烧瓶中,放入
MCL-3型连续微波反应器中,用80%乙醇回流提取
20min,调整功率560W、500W、400W、350W,以除
去单糖及一些甙类,弃提取液。淡竹叶挥干乙醇后,
再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提
取2次(每次20min),调整功率560W、500W、400W、
350W,减压抽滤,各次滤液合并。水浴浓缩后,用
蒸馏水定容至250mL,即为测多糖的淡竹叶样品液。
2.3 总黄酮含量的测定
2.3.1 标准曲线制备 精确称取芦丁对照品10mg,
置25mL容量瓶中,加80%乙醇溶解,定容,精密吸
取0、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL,分置于
10mL容量瓶中,加5%亚硝酸钠0.3mL,放置6min,
再加10%硝酸铝0.3mL,放置6min,加4%氢氧化钠
4mL,加水至刻度,摇匀。进行全波长扫描,在
510nm处均有最大吸收。以510mn处测得的吸收度A
对浓度C回归,得回归方程:A=11.225C+0.0027,r=
0.99913,在8～40μg/mL的范围内,浓度与吸收度有良
好的线性关系。
2.3.2 样品测定 分别将测总黄酮之各样品液定量稀
表1 淡竹叶中总黄酮和多糖含量
测定
次数
总黄酮 多糖
含量
(%)
x±s
RSD
(%)
含量
(%)
x±s
RSD
(%)
1 1.61 2.65
2 1.66 1.62±0.032 1.97 2.60 2.66±0.0602.26
3 1.60 2.72
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释5倍后,再精确吸取各稀释液适量于10mL容量瓶
中,照标准曲线制定项下方法操作,测定吸收度,由
回归方程求出稀释液中总黄酮浓度,然后计算百分
含量,结果见表1。
2.3.3 回收率试验 取已知总黄酮含量的供试品溶液
1.0mL于10mL容量瓶中,再加入0.2mg/mL的芦丁对照
品溶液0.5mL,依法测定,结果平均回收率为
100.3%,RSD=1.77%(n=5)。
2.3.4 稳定性试验 按样品测定方法操作,测定同一
供试液在不同时间吸收度。结果表明,吸收度值
在5～45min内基本不变,因此测定应控制在45min
内完成。
2.4 多糖含量测定
2.4.1 标准葡萄糖溶液的配制 精确称取干燥恒质量
的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250mL容量
瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8μg/mL标
准葡萄糖溶液备用。
2.4.2 5%苯酚试剂的配制 取苯酚100g,加铝片
0.1g和NaHCO30.05g,蒸馏。收集182℃馏分,称取
7.5g,加水150mL溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。
2.4.3 标准曲线制备 精确量取100.0μg/mL标准葡萄
糖 溶 液 0.1mL、 0.2mL、 0.3mL、 0.4mL、 0.5mL、
0.6mL、0.7mL置于干燥试管中,分别加水使成1.0mL,
再分别加入5%苯酚溶液1.6mL,摇匀,然后加浓
H2SO47.0mL,充分摇匀,室温放置25min,在490nm
处测定其最大吸收度,同时做一空白。结果浓度在
10.05～75.56μg/mL范围内呈线形关系,实验数据做回
归处理得回归方程:A=0.0691C+0.003,r=0.99905。
2.4.4 换算因素测定 淡竹叶粉碎后,称取100g,置
于500mL烧瓶中,将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反
应器中,依次用250mL石油醚(60～90℃)、乙醚和80%
乙醇回流提取2次,调整功率560W、500W、400W、
350W,反应时间20min。减压抽滤,残渣挥干溶剂
后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,调整功率
630W、600W、560W、450W,继续以水回流提取2
次,每次20min。减压过滤,合并滤液。将滤液减压
浓缩至一半体积,加入0.1%活性炭,脱色2次,过
滤,滤液加5倍量95%乙醇,放置过夜,抽滤后的沉
淀以100mL水溶解重复醇沉一次。过滤,残渣用乙
醚、无水乙醇反复洗涤,60℃干燥,即得淡竹叶多
糖。精确称取60℃干燥恒质量的淡竹叶多糖20.00mg,
水溶解后定容到100mL容量瓶中,摇匀,做为多糖储
备液。精确量取多糖储备液0.2mL,加水至1mL,按
测定标准曲线同样的方法测其吸收度。按下式计算
换算因素:f=W/CD,式中:W为多糖质量(μg),C为
多糖液中葡萄糖的浓度(μg/mL),D为多糖的稀释因
素。测得f=1.3230。
2.4.5 样品含量测定 精确吸取样品液1mL,按标准
曲线制备项下方法测定其吸收度值,按下式计算多
糖含量,多糖含量=CDf/W×100(C为样品溶液的葡萄
糖的质量,D为样品溶液的稀释倍数,f为换算因素),
结果见表1。
2.4.6 稳定性试验 用硫酸-苯酚法测定同一样品液
在不同时间的吸收度,吸收度值至少在48h内不变。
2.4.7 回收率测定 精确称取淡竹叶适量,加入精制
淡竹叶多糖适量,按样品液制备和多糖含量测定方
法操作,测得多糖平均回收率为98.86%,RSD=2.21%
(n=5)。
3 讨论
黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖
等多种生理活性[6]。多糖广泛存在于自然界,是多种
中草药的有效成分之一,具有多种生物活性,是理
想的免疫增强剂。它能提高机体免疫系统的功能,
而对正常细胞没有毒副作用,在抗肿瘤、抗病毒、抗
衰老等药物研究中,多糖类药物的研制已成为当今
世界新药的发展方向之一[7]。我们运用微波技术从淡
竹叶中联合提取出淡竹叶总黄酮和多糖,并对其含
量进行了测定,反应时间缩短,淡竹叶黄酮和多糖
的结构组成和生理活性有待进一步研究和探讨。
参考文献：
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