全 文 ：2007年 1月 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) Jan. 2007第 38卷第 1期 Acta Scientiarum Naturalium Univ ersi tati s NeiM ongol Vol. 38 No. 1
　　文章编号: 1000- 1638( 2007) 01-0117-03
黄金菊总黄酮提取工艺研究
马宏芳 1, 2 ,牛雪平 1 ,李焕珠 1
( 1.内蒙古大学化学化工学院 ,呼和浩特 010021;
2.山西大同大学化学与生命科学学院 ,大同 037009)
摘要:通过 4因素 3水平的正交试验 ,结合紫外分光光度法 ,确定了黄金菊中总黄酮的最佳提
取工艺为 20倍量的水先浸泡 0. 5 h再加热回流 3次 ,每次 3 h.为了节省能源提高效率最佳提取
时间调整为 2 h,并验证调整后的工艺 ,结果表明 ,总黄酮提取率为 5. 255% ,平均回收率为
101. 45% , RSD为 1. 975% (n= 5) ,此结果为黄金菊药效的进一步研究和资源开发利用提供科
学依据 .
关键词: 黄金菊 ;总黄酮 ;分光光度法 ;提取
中图分类号: O629　　文献标识码: A
　　菊花作为一种传统中药 ,具有疏风、清热、明目、解毒的功效〔1〕 .现代药理表明 ,菊花总黄酮具有抗
炎 ,镇痛 ,抗病毒 ,抗菌 ,抗衰老 ,抗肿瘤 ,抗诱变 等作用〔 2〕 .黄金菊 (Perennial chamomile )是菊花的一
种 ,经内蒙古中蒙医研究所药物实验室预试 ,花中含黄酮类化合物〔 3〕 .但有关黄金菊中黄酮的提取含
量测定未见报道 ,为有效开发和利用药材资源 ,充分提取黄金菊所含黄酮类成分 ,我们采用正交试验
结合分光光度法进行含量测定 .考虑到在实际生产中 ,黄金菊在提取过程中会吸收大量的溶剂 ,造成
生产成本显著增加 ,本试验选择经济的水作为试验的提取溶剂 .
1　仪器与试剂
　　岛津-120-02可见 -紫外分光光度仪 ;
芦丁对照品 , (生化试剂 ,购自中国药品生物制品检定所 ) ;黄金菊 , (购自黄山澳达食品有限公
司 ) .其它试剂均为分析纯 .
2　结果与讨论
2. 1　对照品及供试液的制备
对照品的制备　芦丁对照品溶液: 精密称芦丁 ( 91. 7% )对照品 50 mg ,加乙醇适量 ,使之充分溶
解 ,用乙醇定容到 100 mL容量瓶中 ,摇匀 .精密量取 20 mL,置 50 mL容量瓶中 ,用水稀释至刻度 ,摇
匀 ,即得 (每 1 mL含芦丁对照品 0. 2 mg )〔1〕 .
供试液的制备　分别精密称取黄金菊 5. 0000 g 9份 ,按因素水平表 1设计正交试验进行加热回
流 ,合并滤液 ,水定容到 250 mL,分别从定容好的样液中取 10 mL定容到 50 mL,待测定 .
2. 2　测定波长选择
精密量取芦丁对照液 4 mL,置于 25 mL容量瓶 ,加 5%亚硝酸钠溶液 1. 0 mL,使混匀 ,放置 6 min,
加 10%硝酸铝溶液 1. 0 mL,摇匀 ,放置 6 min,加 1%氢氧化钠溶液 10. 0 m L,再加水至刻度 ,摇匀 ,放置
收稿日期: 2006-08-02;修回日期: 2006-11-06
作者简介: 马宏芳 ( 1978～ ) ,女 ,山西怀仁县人 , 2004级硕士研究生 ,助教 . E-mail: mahf tot@ 126. com
15 min,置比色皿中 ,在波长 400～ 600 nm之间测定吸收谱 ,确定最大吸收波长为 510 nm.
表 1　黄金菊水提取工艺因素水平表
Table 1　 Factors and levels of the perennial chamomile extracted by water
水平 因素
A浸泡时间 ( h) B溶剂倍量 (倍 ) C回流时间 ( h) D提取次数 (次 )
1 0. 5 20 3 1
2 1 15 2 2
3 1. 5 10 1 3
2. 3　标准曲线的制备〔1〕
精密量取对照品溶液 0. 0, 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0, 6. 0 m L,分别置于 25 mL容量瓶 ,各加水至 6
m L,加 5%亚硝酸钠溶液 1. 0 mL,使混匀 ,放置 6 min,加 10%硝酸铝溶液 1. 0 mL,摇匀 ,放置 6 min,加
1%氢氧化钠溶液 10. 0 mL,再加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min,在 510 nm波长处测定吸收度 ,以吸光度
为纵坐标 ,浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,如图 1.
　　Y= 9. 86607X+ 0. 00493(r= 0. 99984)线性范围 0. 008～ 0. 048 mg /mL
2. 4　供试液的测定
　　精密量取供试液 5 mL,置 25 mL容量瓶中 ,按照标准曲线方法进行操作 ,显色 ,在 510 nm波长处
测定吸光度 A1 ,另精密量取供试液 5 mL,置 25 mL容量瓶中 ,加水至刻度 ,摇匀 ,在 510 nm波长处测
定吸光度 A2 .取二次吸光度的差值 ,由回归方程计算样品中总黄酮的含量 .
2. 5　最佳提取条件选择
按 L9 ( 34 )正交表设计方案进行试验 ,并进
行含量测定 ,以测得黄金菊中总黄酮含量为指
标进行分析 .结果见表 2、 3.
图 1　芦丁标准曲线
Fig . 1　 Rutin standard line
表 2　黄金菊水提取正交设计及数据处理
Table 2　 Orthonogal design and data processing
of perennial chamomile extracted by water
试验号 A B C D 黄酮提取率 (% )
1 1 1 1 1 4. 572
2 1 2 2 2 5. 259
3 1 3 3 3 5. 506
4 2 1 2 3 5. 309
5 2 2 3 1 3. 842
6 2 3 1 2 4. 638
7 3 1 3 2 4. 993
8 3 2 1 3 4. 955
9 3 3 2 1 2. 991
K1 14. 887 14. 874 14. 165 11. 405
K2 13. 789 14. 056 13. 559 14. 890
K3 12. 939 12. 685 13. 891 15. 320
k1 4. 962 4. 958 4. 722 3. 802
k2 4. 596 4. 685 4. 520 4. 963
k3 4. 313 4. 228 4. 630 5. 107
R 0. 649 0. 730 0. 202 1. 305
表 3　水提取方差分析
Table 3　 Variant analysis of orthogonal test by water extract ion
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F值 P值 显著性
A 0. 636 2 0. 318 10. 26 < 0. 01 极其显著
B 0. 816 2 0. 408 13. 16 < 0. 01 极其显著
C 0. 062 2 0. 031 1
D 3. 073 2 1. 537 49. 58 < 0. 01 极其显著
　　从表 1、表 2、表 3可以看出影响黄金菊总黄酮得率的主次要因素有提取次数 ,溶剂倍量和浸泡时
间 ,回流时间影响较小 .其最佳工艺组合为 A1 B1 C1D3 .即用 20倍量的水先浸泡 0. 5 h再加热回流 3次 ,
每次 3 h.考虑到节省能源、提高效率 ,我们选择影响较小的回流时间为 2 h,并进行工艺验证试验 .
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2. 6　工艺验证试验
为考察上述优选工艺微调后测定结果的重现性 ,按该工艺条件进行重复性试验 3次 ,分别测定黄
金菊总黄酮的含量 ,结果见表 4.测定结果均优于正交试验表中的任何一组 ,说明该工艺重现性好 .
2. 7　回收率试验
取已测得总黄酮含量的黄金菊样液 5. 0 mL加入 0. 2 mg /mL的芦丁对照液 1. 0 mL,按实验方法
测定 ,计算回收率 ,结果列于表 5.由表 5可知 ,本法的回收率较高 ,表明测量准确度较高 .
表 4　工艺验证试验结果
Table 4　 The result of extract processing
编号 黄酮提取率
(% )
平均提取率
(% )
RSD
(% )
1 5. 335
2 5. 284 5. 255 1. 87
3 5. 145
表 5　回收率试验结果
Table 5　 The experimental result of the average recovery
加入量
( mg )
测得量
( mg )
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
0. 200 0. 208 103. 98
0. 200 0. 205 102. 71
0. 200 0. 200 100. 18 101. 45 1. 975
0. 200 0. 198 98. 91
0. 200 0. 203 101. 45
3　结　论
　　黄酮为黄金菊主要有效成分之一 ,本次试验通过 4因素 3水平的正交试验 ,结合紫外分光光度法
测定黄金菊中总黄酮含量 ,通过优化提取工艺 ,确定最佳提取条件为 20倍量的水先浸泡 0. 5 h再加热
回流 3次 ,每次 2 h.实验结果表明该工艺提取得率高 ,重现性好 ,方法简便 ,回收率高 .此法可为黄金
菊药效的进一步研究和资源开发利用提供科学依据 .
参考文献:
[ 1]　中华人民共和国药典 (一部 ) [ S].北京: 化学工业出版社 , 2000.
[ 2]　顾瑶华 ,秦民坚 .我国药用菊花的化学及药理学研究新进展 [ J].中国野生植物资源 , 2004, 23( 6): 7～ 9.
[ 3]　朱亚民 .内蒙古植物药志 [ M ]. (第三卷 ).呼和浩特: 内蒙古人民出版社 , 2000.
(责任编委　赛　音 )
Study on Ex tracting To tal Flavonoids from Perennial chamomile
MA Hong-fang1, 2 , N IU Xue-ping1 , LI Huan-zhu1
( 1.College of Chemistry and Chem ical Engineering ,
Inner Mongol ia University , Hohhot 010021,China;
2. College of Chemistry and Life Sciences , Shanx idatong University , Datong 037009,China )
　 　 Abstract: By o rthogonal test o f L9 ( 34 ) a nd UV -spect ropho tometry , the optimum ex tract
processing of total f lav onoids in Perennial chamomile was determined. The condi tions w ere tha t the
Perennial chamom ile was soaked in wa ter wi th a ratio of 1∶ 20 of solid v s. liquid fo r a half hour,
then the solution was ref lux ed fo r three times o f three hours per time. To save energ y and improve
ef ficiency , the ex t ract time w as changed to two hours f rom three hours per time. The resul t show ed
that ex t ract rate o f total flavonoids w as 5. 225% , the average recovery w as 101. 45% and the relative
standa rd deviation was 1. 975% ( n = 5) . It o ffers a scienti fic evidence for the further study of
medicinal efficiency and comprehensiv e utili za tion o f Perennial chamom ile.
Key words: Perennial chamomile; to tal f lav onoids; spect ropho tometry; ex t raction
119第 1期 马宏芳等　黄金菊总黄酮提取工艺研究