全 文 ：2009年 7月 第 11卷 第 7期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jul.2009 Vol.11 No.7
化学成分
■ [基金项目 ] 广东省教育部产学研项目(03032)
[通讯作者 ] ＊张贵君 , E-mail:guijunzhang@163.com
中药黄金菊汤剂 4种化学药效组分分析■
张春晖 1 , 张贵君1＊ , 杨晶凡 1 , 韩茹1 , 张晶 2
(1.北京中医药大学中药学院 , 北京 100102;
2.大庆医学高等专科学校 , 黑龙江 大庆 163312)
[摘要 ] 目的:分析中药黄金菊汤剂的化学药效组分。方法:反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。结果:分析
得到了黄金菊汤剂中的 4种药效成分 , 即黄芩苷 , 绿原酸 , 荭草苷 , 牡荆苷。黄金菊汤剂药效组分含量分别为黄芩
苷 0.264 4%、 绿原酸 0.016 3%、 荭草苷 0.014 1%、 牡荆苷 0.003 57%。结论:黄金菊汤剂中 4种药效组分可作为
其质量控制的科学指标 。
[关键词 ] 黄金菊汤剂;药效组分;RP-HPLC
黄金菊汤剂来源于临床经验方 , 本品是由金莲
花 、黄芩 、 野菊花三味药组成的现代中药复方制剂。
君药野菊花清热解毒 、 泻火明目 , 佐金莲花 、 黄芩
合用 , 共奏降火润燥 、 清热解毒 、 利咽止痛之效;
臣黄芩能清宣肺部之热 , 又能散血中之毒 , 助野菊
花清热解毒 、降火润燥之力;佐使金莲花旨在清热
解毒。临床上治疗上呼吸道感染 、 咽炎 、 扁桃体炎
等疗效确切。笔者采用高效液相色谱法(RP-HPLC
法)分析了黄金菊汤剂的药效组分 , 通过对黄金菊
汤剂药效组分的分析 , 旨在为中药药效组分鉴定方
法和质量标准的建立奠定基础 。
1 仪器与材料
1.1仪器
岛津 LD-2100HPLC。
1.2试剂
甲醇 、 乙腈为色谱纯;磷酸为分析纯;水为重
蒸馏水;对照品:黄芩苷 、 荭草苷 、牡荆苷 、 绿原
酸(中国药品生物制品检定所)。
供试品:黄芩 , 野菊花 , 金莲花(购自安国祁
新饮片厂), 经张贵君教授鉴定依次为唇形科植物
黄芩 ScutelariabaicalensisGeorgi的干燥根;菊科植
物野菊 ChrysanthemumindicumL.的干燥头状花序;
毛茛科植物金莲花 TroliuschinensisBunge的干燥花。
2 方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱:agelaVenusilHPLCClumns(250mm×
4.6mm, 5μm);黄芩苷流动相:甲醇-0.3%磷酸水
(52∶48), 检测波长:280nm, 色谱图见图 1;绿原酸
流动相:0.4%磷酸 -乙腈(88∶12), 检测波长:327
nm。色谱图见图 2;荭草苷流动相:0.3%磷酸-乙腈
(82∶18), 检测波长:345nm, 流速:0.8mL·min-1 ,
色谱图见图 3;牡荆苷流动相:0.3%磷酸-乙腈
(85∶15),检测波长:345 nm。色谱图见图 4(以上
流速除荭草苷外均为 1.0 mL·min-1)。柱温:室
温(25℃), 理论板数按各对照品峰计算均大于
3 000。
图 1 黄金菊汤剂中对黄芩苷测定的相关 HPLC图
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DOI :10.13313/j.issn.1673-4890.2009.07.004
2009年 7月 第 11卷 第 7期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jul.2009 Vol.11 No.7
2.2对照品溶液的制备
分别精密称取黄芩苷 、荭草苷 、 牡荆苷 、 绿原
酸对照品适量 , 分别置 10mL量瓶中 , 加甲醇溶解
并稀释至刻度 , 作为对照品溶液 , 黄芩苷 、荭草苷 、
牡荆苷 、 绿原酸的浓度分别为 0.1, 0.04, 0.04,
0.043 6mg·mL-1。
2.3供试品溶液的制备
黄金菊汤剂的制备:取黄金菊(黄芩 3g, 野菊
花 6g, 金莲花 5g), 加 12倍量的水 , 浸泡 30min,
先煎黄芩 , 水沸后煎煮 15min, 再和余药共煎至
30min, 滤过 , 残渣加 12倍量的水 , 水沸后再煎
20min, 趁热滤过;合并两次滤液 , 浓缩 , 冷至常
温 , 加水定容至 100mL的容量瓶中。
精密吸取 1.0mL置 10mL量瓶中 , 用水稀释至
刻度 , 作为供试品溶液Ⅰ 。
精密吸取 2.0mL置 10mL量瓶中 , 用水稀释至
刻度 , 作为供试品溶液Ⅱ 。
2.4阴性对照品溶液制备
2.4.1黄芩阴性对照品溶液 按黄金菊汤剂组方取
野菊花 、金莲花适量 , 按供试品溶液制备方法配制
缺黄芩的阴性对照品溶液 。
2.4.2绿原酸阴性对照品溶液 按黄金菊汤剂组方
取黄芩 、金莲花适量 , 按供试品溶液制备方法配制
缺野菊花的阴性对照品溶液。
2.4.3金莲花阴性对照品溶液 按黄金菊汤剂组方
取黄芩 、野菊花适量 , 按供试品溶液制备方法配制
缺金莲花的阴性对照品溶液。
2.5标准曲线绘制
精密吸取各对照品溶液进样不同体积 , 按各成
分的色谱条件测定峰面积 , 以峰面积积分值为纵坐
标(Y), 对照品进样量(μg)为横坐标(X), 进行线
性回归 , 得回归方程 。
黄芩苷:Y=2 041.6X-1.813, r=0.999 7(n=
6), 线性范围 0.96 ～ 1.92μg;
荭草苷:Y=3 229.9X+2.100 2, r=0.999 6(n=
5), 线性范围 0.16 ～ 0.48μg;
绿原酸:Y=2 291.1X-33.407, r=0.999 9(n=
5), 线性范围 0.346 9 ～ 0.693 8μg;
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牡荆苷:Y=1 738.7X+1.179 91, r=0.999 9
(n=5), 线性范围 0.04 ～ 0.2μg。
2.6精密度试验
分别精密吸取黄芩苷 、荭草苷 、 牡荆苷 、 绿原
酸对照品溶液 , 连续进样 5次 , 按各成分的色谱条
件测定峰面 积 , RSD分 别为 0.17%, 1.05%,
0.95%, 0.45%。
2.7稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液 , 分别在 0 , 2, 4,
6, 8h, 按各成分的色谱条件进样 , 依照标准曲线测
定方法测定峰面积 。黄芩苷 、荭草苷 、 牡荆苷 、 绿
原 酸 RSD 分 别 为 0.92%, 0.81%, 0.67%,
1.04%, 表明在 8h内 4种成分稳定性良好 。
2.8重现性试验
按供试品溶液制备方法平行制备 5份供试品溶
液 , 按各成分的色谱条件 , 依照标准曲线测定方法
分别测定 , 黄芩苷 、 荭草苷 、 牡荆苷 、 绿原酸 RSD
分别为 1.14%, 0.78%, 0.84%, 0.36%, 表明本
方法重现性良好 。
2.9加样回收率试验
精密称取已知各成分含量的供试品溶液 5份 ,
精密加入对照品适量 , 按供试品溶液制备方法处理 ,
按各成分的色谱条件 , 依照标准曲线测定方法测定 ,
计算各成分的平均加样回收率 , 结果见表 1。
2.10样品含量测定
取金莲花 、 野菊花 、 黄芩 , 按上述样品制备方
法 , 平行制备 3份样品 , 按各成分的色谱条件 , 依
照标准曲线测定方法测定峰面积 , 根据标准曲线计
算各成分的含量 。
黄金菊汤剂中黄芩苷含量测定:精密吸取供试
品溶液 Ⅰ , 进样 5μL。
黄金菊汤剂中荭草苷 、 牡荆苷 、 绿原酸含量测
定:分别精密吸取供试品溶液 Ⅱ , 进样 5μL。
结果黄金菊汤剂中平均含黄芩苷 0.264 4%、绿原
酸 0.016 3%、荭草苷 0.014 1%、牡荆苷 0.003 57%。
3 讨论
金莲花 、野菊花 、黄芩三味药材成分比较复杂 ,
表 1 加样回收率试验
名称 样品中含量/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
黄芩苷 0.213 0.428 102.38 99.71 2.40
0.221 0.432 100.48
0.209 0.416 98.57
0.215 0.417 96.19
0.217 0.429 100.95
绿原酸 0.016 3 0.032 4 97.58 100.12 2.15
0.016 8 0.033 6 101.81
0.015 9 0.032 1 98.18
0.015 4 0.032 0 100.61
0.016 6 0.033 5 102.42
荭草苷 0.014 7 0.029 4 101.37 100.00 1.80
0.014 2 0.028 4 97.93
0.013 8 0.028 7 102.76
0.013 5 0.027 9 99.31
0.014 9 0.292 98.62
牡荆苷 0.003 6 0.007 5 97.50 102.53 2.99
0.003 5 0.007 7 105.00
0.003 6 0.007 8 102.63
0.003 4 0.007 3 105.00
0.003 5 0.007 6 102.50
注:黄芩苷 、 绿原酸 、 荭草苷 、 牡荆苷对照品加入量分别为 0.210,
0.016 5, 0.014 5, 0.004 0mg
含有多种黄酮类成分 , 在同一流动相条件下较难分
离 , 为了得到准确的含量测定结果 , 本实验对荭草苷
与牡荆苷分别采用了不同的分离方法 , 结果分离度良
好 。方法学考察表明 , 这些方法在较大范围内线性关
系良好 , 黄金菊汤中黄芩苷等指标性成分含量均在线
性范围之内;所选用的各方法具有较好的精密度 、稳
定性 、重现性和回收率。所得到的指标性成分百分含
量 , 为控制黄金菊汤剂的内在质量提供了依据 , 打破
了以一种成分的含量为质量控制的传统方式。指标性
成分的比例关系制约着中药的疗效 , 同时为黄金菊汤
剂的进一步研发提供了科学数据。
本文就黄金菊汤剂发挥清热解毒功效的各药效
组分黄芩苷 、 绿原酸 、 荭草苷 、 牡荆苷进行了含量
分析。该分析为黄金菊汤剂的鉴别及质量评价提供
了科学指标 , 并对组分新药的研究 、 开发 、 利用提
供了科学参考依据。
(收稿日期 2009-03-05)
TheAnalysisofFourChemicalActiveCompositionsinHuangJinjuDecoctions
ZhangChunhui1 , ZhangGuijun1 , YangJingfan1 , HanRu1 , ZhangJing2
(1.SchoolofChinesePharmacyofBeijingUniversityofChineseMedicine, Beijing100102 , China;
2.Daqingmedicaltechnologicalacademy, DaqingHeilongjiang163312 , China)
[ Abstract] Objective:ToassaythechemicalactivecompositionsofHangJinjudecoctions.(下转第 32页)
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年)的栽培甘草(G.uralensisFisch.)样品进行 5种
微量元素含量测定 、 分析 , 测定结果表明 , 甘肃金
塔甘草 5种微量元素含量由高到低依次为 Ca, Mg,
Fe, Zn, Cu;2 种野生甘草 (G.uralensisFisch.、
G.eurycarpaP.C.Li)微量元素含量差异较大 , 以黄
甘草 G.eurycarpaP.C.Li含量较高;不同年限栽培
甘草微量元素含量随生长年限增长而增大 , 甘草的
野生品与栽培年限在 3年的栽培品所含微量元素差
异不大 。结合笔者前期对甘草外观形状 、有效成分
含量的研究(药材外观性状随栽培年限增长特征趋
于明显;以甘草酸 、 甘草苷为质量评价指标分析得
出:野生甘草与栽培年限在 5年左右的甘草中甘草
酸 、甘草苷的含量差异不大 , 而栽培甘草有效成分
含量随栽培年限增长而有明显的提高)可以发现 ,
甘草微量元素含量在评价品种质量方面有一定的参
考价值 。由于品种 、产地 、 气候 、 水土 、 生长年限
的不同 , 不仅对中药材的外观性状有一定影响 , 而
且还会改变药材化学成分及含量 , 微量元素的分布
差异也较明显 , 其不同产地水质 、 土壤性质与微量
元素含量的关系还有待于进一步研究与探讨。
金塔黄甘草 G.eurycarpaP.C.Li品质较优 , 在
甘肃酒泉分布较多 , 但金塔栽培甘草主要为甘草
G.uralensisFisch., 建议加强对黄甘草优质种苗培
育 、质量控制等综合开发研究;野生甘草资源已远
远不能满足社会需要 , 栽培甘草将作为药用甘草的
主要来源 , 其种植技术和质量控制还有待于进一步
提高。本课题为研究金属元素在甘草中的含量与药
效的关系提供了参考数据 , 为甘肃省地产甘草的质
量控制和有效利用奠定了基础 。
参考文献
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(收稿日期 2009-04-11)
TheComparativeStudyonTheContentofFiveTraceElementsinRadix
etRhizomaGlycyrrhizaeGrowninJintaCountyofGansu
YaoWanglu1 , LiChengyi2 , LiShuo2
(1.QinanHospitalofTraditionalChineseMedicine, QinanGansu741600, China;
2.GansuColegeofTraditionalChineseMedicine, LanzhouGansu730000, China)
[ Abstract] Objective:Tomakingacomparativestudyonthecontentsoffivetraceelementsradixetrhizoma
glycyrrhizaegrowninJintaofGansuwhichwerewildandcultivated.Methods:Flameatomicabsorptionspectrometry
wasused.Results:Theradixetrhizomaglycyrhizaecontainsthefolowingelements:Ca, Mg, Fe, Zn, Cu, whichcon-
tentsdecreasedsuccessively.Thereexistedasharpdiferenceintraceelementcontentsbetweenthewildandtheculti-
vatedsamplesofdiferentbreedsandvariousgrowingperiods.Conclusion:Thecontentsoftraceelementsinmedical
herbswasofreferencevalue.GlycyrhizaeurycarpaP.C.Liwasexcelentquality, soitwasadvisabletocomprehensive
utilizationandstudyonthecultivationofhigh-qualityseedlingsandthequalitycontrol.
[ Keywords] Jintacounty;Radixetrhizomaglycyrhizae;Traceelements;Thecontentcomparision
(上接第 17页)Methods:Reversedphasehigh-performanceliquidchromatography(RP-HPLC).Results:Thefourac-
tivecompositionwereBaicalin, Chlorogenicacid, Orientin, Vitexin.Theconcentsoffouractivecomposition:Baicalin
was0.264 4%, Chlorogenicacidwas0.016 3%, Orientinwas0.014 1%, Vitexinwas0.003 57%.Conclusion:
TheactivecomponentsofHangJinjudecoctionscanbeusedastheindexofqualitycontrol.
[ Keywords] HangJinjudecoctions;Activecomponentsalignment;RP-HPLC
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