全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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［责任编辑 邹晓翠］
［收稿日期］ 20120310(001)
［第一作者］ 刘长松，硕士，Tel:15201391423，E-mail:changsong1104@ yeah． net
［通讯作者］ * 张贵君，教授 /博导，从事中药鉴定方法学、中药药效组分及药效组分质量评价体系研究，E-mail:guijunzhang@ 163. com
零陵香水溶性多糖组分的 GC-MS分析
刘长松，张贵君 * ，张智圆，李奇豫，董文茜，李景松，张雅楠
(北京中医药大学中药学院，北京 100102)
［摘要］ 目的:鉴定零陵香水溶性多糖组分，为建立专属性的质量评价指标和中药药效组分新药研发奠定基础。方法:
采用水提醇沉法制备零陵香粗多糖，Sevag 法除蛋白、H2O2 脱色、透析得到精制多糖，衍生化后用 GC-MS 分析。结果:零陵香
水溶性多糖主要组分依次为鼠李糖醇-阿拉伯糖-核糖-葡萄糖-木糖，其相对含量比例为 1. 03 ∶ 9. 17 ∶ 4. 74 ∶ 18. 95 ∶ 17. 11。结论:
GC-MS 联用法可快速鉴定零陵香水溶性多糖组分。
［关键词］ 零陵香;水溶性多糖;药效组分;GC-MS;质量评价
［中图分类号］ R284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)19-0129-03
Analysis of Water-soluble Polysaccharide Components
from Herba Lysimachiae Foenum-graeti by GC-MS
LIU Chang-song，ZHANG Gui-jun* ，ZHANG Zhi-yuan，LI Qi-yu，
DONG Wen-xi，LI Jing-song，ZHANG Ya-nan
(School of Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)
［Abstract］ Objective: Identifying the water-soluble polysaccharide components of Herba Lysimachiae
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 19
Oct．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.19.042
Foenum-graeti，to establish the quality of specificity evaluation index and Chinese medicines active components
alignment，which laid the foundation of new drug development． Method:The preparation of polysaccharides was
extracted by the methods of water extracting-alcohol precipitating，then Sevag method sinking in protein，H2O2
bleaching and the use of dialysis method refined． The derivative change of the refined polysaccharide was analyzes
by GC-MS． Result:The polysaccharide of Herba Lysimachiae Foenum-graeti is composed of rhamnitol，arabinose，
ribose，glucose，and xylose，the proportion of it is 1. 03 ∶ 9. 17 ∶ 4. 74 ∶ 18. 95 ∶ 17. 11. Conclusion:GC-MS could
rapidly ascertain the water-soluble polysaccharide components of Herba Lysimachiae Foenum-graeti． The water-
soluble polysaccharide of Herba Lysimachiae Foenum-graeti can be used as a component of the quality evaluation
index and drug components of the new drug research based material．
［Key words］ Herba Lysimachiae Foenum-graeti; water-soluble polysaccharide; active components
alignment;GC-MS;quality evaluation
零陵香始载于《嘉佑本草》，其味甘、淡，性平，
功能行气止痛，驱蛔。中医临床用其配伍的煎剂治
疗伤寒、感冒头痛、胸腹胀满、鼻塞、牙痛等［1］。研
究资料表明:零陵香有抑制流感病毒作用［2］，对其
药效成分的分析主要是挥发油类［3］。本文采用 GC-
MS 联用法对零陵香水溶性多糖组分进行了分析，
旨在建立其专属性的质量评价指标并为中药药效组
分［4］新药研发提供依据。
1 材料
TRACE DSQ 型 GC-MS(美国 Thermo 公司) ，BS
224S /210S 型分析天平，TU-1810 型紫外-可见分光
光度计(北京普析通用仪器有限责任公司) ，透析袋
(截留相对分子质量为 3 500) ，化学试剂均为分
析纯。
零陵香为报春花科植物灵香草 Lysimachia
foenum-graetum Hance． 的干燥全草，市售品，由北京
中医药大学张贵君教授鉴定。
2 方法与结果
2. 1 多糖的提取与精制 取零陵香 50 g，依次分别
用 10 倍量的石油醚、10 倍量的乙醇回流脱脂。取
药渣挥干溶剂，用 10 倍量水煎煮 2 次，合并水煎液
并浓缩至 200 mL，离心 10 min(3 000 r·min － 1) ，取
上清液，加入乙醇至醇含量为 80%，4 ℃静置 24 h，
滤过。滤渣用丙酮、乙醚、乙醇适量依次洗涤，干燥，
得粗多糖。
取粗多糖加适量蒸馏水溶解，加入等量 Sevag
试剂，振摇 20 ～ 30 min，静置，离心，重复多次，取上
清液在 280 nm 处无紫外吸收［5］。用氨水将多糖液
调 pH 至 8，慢慢滴加 30% H2O2 至多糖溶液呈浅黄
色，50 ℃水浴 2 h，透析 24 h，冻干，得淡黄色多糖。
2. 2 多糖组分的分析
2. 2. 1 GC-MS 条件 DB-5 型石英毛细管柱(0. 25
μm × 0. 25 mm × 30 m) ，进样口温度 250 ℃，流量 1
mL·min － 1，离子源温度 250 ℃。升温程序:120 ℃
保持 5 min，20 ℃·min － 1至 220 ℃，保持 5 min，10
℃·min － 1 至 250 ℃ 保持 10 min。右进样口温度
250 ℃，分流比 1 ∶ 10，进样量 1 μL，扫描范围 m / z
20 ～ 600，溶剂延迟 2 min，见图 1。
2. 2. 2 零陵香多糖的乙酰化 取零陵香 10 mg，精
密称定，溶于 3 mL 2 mol·L － 1的三氟乙酸中，100 ℃
水浴 8 h，60 ℃减压蒸干。加入少量甲醇减压蒸干，
反复 3 次除尽三氟乙酸。水解产物中加入 10 mg 盐
酸羟胺和 0. 7 mL 吡啶，90 ℃水浴 30 min，冷却至室
温，再加入 1 mL 乙酸酐，90 ℃水浴 30 min，冷却至
室温后取上清液，减压浓缩至干。乙酰化产物溶于
1 mL 氯仿中，上机测定。
2. 2. 3 多糖组分分析 根据供试品各峰保留时间
与标准质谱尼斯特谱库(NIST)对照分析，确定其多
糖主要组分依次为鼠李糖醇-阿拉伯糖-核糖-葡萄
糖-木糖。采用归一化法进行数据处理，计算出该多
糖峰面积的组合百分比为 1. 03 ∶ 9. 17 ∶ 4. 74 ∶ 18. 95 ∶
17. 11(表 1)。
3 讨论
零陵香中挥发油类和色素类物质含量较高，所
以需脱脂处理。多糖除蛋白的方法主要有三氟乙酸
法和 Sevag 法［6］、等电点沉淀法、加热变性法、膜过
滤法。等电点沉淀法和膜过滤法效率低且要求高，
加热变性法和单一等电点不能满足除尽蛋白质的目
的。对三氟乙酸法和 Sevag 法考察后发现，后者效
率更高且能完全除尽蛋白质。用 H2O2 法脱色，既
可以脱去结合型色素又可以脱去游离型色素，脱色
效果较好，但在实验过程中要注意控制温度、pH、脱
色时间等条件，以防止多糖降解［7］。气质联用是目
前国际上分析糖类的有效手段，采用该技术首先要
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 19
Oct．，2012
图 1 零陵香多糖组分乙酰化总离子流色谱图
表 1 零陵香多糖乙酰化衍生物 GC-MS 分析
名称 tR /min 单糖衍生物 峰面积 /%
鼠李糖醇 9. 49
1，4-diacetyl-3-acetoxymethyl-2，5-methylene-l-rhamnitol
1，4-二乙酰基-3-乙酰氧甲基-2，5-亚甲基-1-鼠李糖醇
1. 03
阿拉伯糖 9. 98 D-arabinononitrile，2，3，4，5-tetraacetate 2，3，4，5-四乙酰化-D-氰基阿拉伯糖 9. 17
核糖 10. 05 D-ribononitrile，2，3，4，5-tetraacetate 2，3，4，5-四乙酰化-D-氰基核糖 4. 74
葡萄糖 11. 79 2，3，4，5，6-penta-O-acetyl-D-gluconitrile 2，3，4，5，6-五-O-乙酰基-D-氰基葡萄糖 18. 95
木糖 12. 05 D-xylononitrile，2，3，4，5-tetraacetate 2，3，4，5-四乙酰化-D-氰基木糖 17. 11
分解多糖。TFA 酸度强，低浓度即可完全水解多糖，
且其有很好的挥发性，加入少量的甲醇在旋转蒸干
水解液时即可除去［8］，相对于硫酸处理更易控制损
失更小。之后将多糖衍生化成为具有挥发性和热稳
定性的物质，目前常用的衍生化方法有三甲基硅烷
衍生法、糖腈乙酰酯衍生法。后者相对前者具有衍
生物制备简便、试剂易得和操作简单等优点，并且每
种糖都能得到单一的色谱峰，没有异构峰产生，具有
定性和定量准确的优点［9］。
本实验根据供试品各峰保留时间与标准质谱尼
斯特谱库(NIST)对照分析得出零陵香多糖主要由
鼠李糖醇、阿拉伯糖、核糖、葡萄糖、木糖组成，其峰
面积的百分比为 1. 03∶ 9. 17∶ 4. 74∶ 18. 95∶ 17. 11。
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［责任编辑 邹晓翠］
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