全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(2)∶202 ～ 203
基金项目:四川省地方习用中药材质量标准的提高研究(2009SZ0227)
作者简介:杨莎(1988—) ，女，四川成都，正攻读生药学专业的硕士学位。Email:happyyangsha@ foxmail． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:bbg@ cdutcm． edu． cn
紫外 －可见分光光度法测定野巴子中的总黄酮
杨 莎，蒋桂华* ，陈佳妮，赵芙蓉
(成都中医药大学药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地 中药材标准化教育部重点实验
室，四川 成都 611130)
摘要:目的 测定野巴子中总黄酮的含量。方法 以芦丁为对照品，NaNO2 － Al(NO3)3 为显色剂，采用紫外 －可见分光光度
法在碱性条件下于 505 nm处测定吸光度并计算总黄酮的含量。结果 回归方程为:Y = 0． 441X + 3． 7 × 10 －3(r = 0． 9993，n =
5) ，平均回收率为 101． 83%，不同批次野巴子总黄酮的平均含量为 9． 82%。结论 所用方法简便、准确、重复性好，可用作野
巴子药材的质量分析和控制。
关键词:野巴子;总黄酮;含量测定;紫外 －可见分光光度法
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)02 － 0202 － 02
Determination of total flavone in Elsholtzia rugulosae Folium by UV －VIS spectrophotometry
YANG Sha，JIANG Gui － hua* ，CHEN Jia － ni，ZHAO Fu － rong
(College of Pharmacy Chengdu University of TCM，State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research，Development and
Utilization of Chinese Medicine Resources，Key Laboratory of Standardization of TCM Materials of Ministry of Education，Chengdu，
Sichuan，610030 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To determine the content of total flavone in Elsholtzia rugulosae Folium． METHODS Using rutin as the
reference substance and NaNO2 － Al(NO3)3 as the colour － developing agent，the content of total flavone was determined by measuring
the absorbance at 505 nm under alkaline conditions with the UV － VIS spectrophotometry． RESULTS Linear relation of the method
was good． The regression equation was Y = 0． 441X + 3． 7 × 10 －3 with r = 0． 9993(n = 5) ，and the average recovery was 101． 83% ． The
average content of total flavone in different batches of Elsholtzia rugulosae Folium was 9． 82% ． CONCLUSION This method is sim-
ple，accurate and repeatable，and can be used for the quality analysis and control of Elsholtzia rugulosae Folium．
Key words:Elsholtzia rugulosae Folium;Total flavone;Content determination;UV － VIS spectrophotometry
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2012)02 － 0202 － 02
野巴子为唇形科香薷属植物野拔子 Elsholtzia
rugulosa Hemsl．的干燥带嫩枝的叶，主产于四川、云
南、广西、贵州等省区［1］，特别是在四川和云南的资
源丰富。本品味辛、性凉，具有疏风解表、利湿、消食
化积等功效，民间常用于治疗伤风感冒、腹胀腹痛、
消化不良、臃肿积滞，外用止血、敷烂疮等［2］。野巴
子中主要含有挥发油和黄酮类化合物［3 － 5］。有关野
巴子质量控制中有效部位的含量测定方法研究较
少，现对野巴子中的总黄酮含量进行测定。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
UV －1100 型紫外分光光度仪(日本岛津)。芦
丁(中国药品生物制品检定所，批号:100080 －
200707) ;其余试剂为分析纯;野巴子药材采自四川
省攀枝花市和云南各地，经鉴定为唇形科植物野拔
子 Elsholtzia rugulosa Hemsl． 的干燥带嫩枝的叶，阴
干后粉碎(过 2 号筛)备用。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 溶液的制备 取 25 mg 在 120 ℃干燥至恒
重的芦丁对照品，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加适
量 50%乙醇，超声处理使溶解，放冷，加入 50%乙醇
定容。精密量取 20 mL，置 50 mL量瓶中，加入 50%
乙醇定容，即得 0． 2 mg·mL －1对照品溶液。取 1 g
野巴子粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入 50
mL 50%乙醇，称重，回流提取 2 h，放冷，用 50%乙
醇补足减失的重量，过滤，作为供试品溶液。
1． 2． 2 波长的选择与显色方法 精密吸取 4 mL芦
丁对照品溶液及 0． 5 mL供试品溶液，分别置 25 mL
量瓶中，加入 1 mL 5% NaNO2 溶液，摇匀，放置
6 min，加入 1 mL 10% A1(NO3)3 溶液，摇匀，放置
6 min，加入 10 mL NaOH试液，再加 50%乙醇定容，
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.02.026
放置 15 min;同时另取 1 个 25 mL量瓶，不加对照品
溶液，其余操作同前，作为空白对照。以空白对照为
参比，于 400 ～ 600 nm扫描，对照品溶液和供试品溶
液均在 505 nm处有最大吸收，因此，将测定波长定
为 505 nm。以NaNO2 － Al(NO3)3 为显色剂，采用紫
外 －可见分光光度法，在碱性(NaOH)条件下，于
505 nm 处测定野巴子中总黄酮的含量。
1． 2． 3 线性关系的考察 精密量取 0、3、4、5、6、7
mL芦丁对照品溶液，分别置 25 mL量瓶中，显色后，
测得吸光度分别为 0、0． 272、0． 352、0. 444、0． 529、
0. 624。以吸光度为纵坐标、总黄酮含量为横坐标绘
制标准曲线，得回归方程为:Y = 0． 441X + 3． 7 ×
10 －3(r = 0． 9993) ，0． 6 ～ 1． 4 mg 芦丁与吸光度的线
性关系良好。
1． 2． 4 精密度试验 分别精密移取 4 mL芦丁对照
品溶液，共 6 份，置量瓶中，按显色方法显色后，连续
测定其吸光度，分别为 0． 352、0． 352、0． 352、0. 353、
0． 353、0． 353，计算得 RSD = 0． 16%，表明仪器精密
度较好。
1． 2． 5 稳定性试验 精密吸取 3 mL芦丁对照品溶
液及 3 号供试品溶液 0． 5 mL，分别置 25 mL 量瓶
中，按显色方法显色后，测定吸光度，每隔 15 min 测
定 1 次，共测定 8 次。计算对照品及样品显色后
15 ～ 105 min 的吸光度。计算得 RSD 分别为
2. 86%、3. 48%，表明该显色反应在 15 ～ 105 min 内
测定的结果稳定。
1． 2． 6 重复性试验 平行取 3 号野巴子样品粉末
6 份，按“1． 2． 1”项方法制备供试品溶液。分别平行
取 0． 5 mL供试品溶液于 6 支具塞试管中，按显色方
法显色，测定吸光度，计算得总黄酮含量的 RSD =
1. 07%，表明方法的重复性较好，方法可行。
1． 2． 7 加样回收试验 取 0． 1 g 3 号野巴子样品
(已知总黄酮含量 9． 677%)粉末，平行 6 份，精密称
定，分别精密加入适量芦丁对照品，按“1． 2． 1”项方
法制备供试品溶液，按显色方法显色。计算样品中
总黄酮的平均回收率为 101． 83%，RSD = 1． 15%，表
明该方法回收率较好，方法可行(表 1)。
1． 2． 8 含量的测定 取 1． 0 g 野巴子粉末，精密称
定，置具塞锥形瓶中，加入 50 mL 50%乙醇，称重，回
流提取 2 h，放冷，用 50%乙醇补足减失的重量，过
滤，作为供试品溶液。精密吸取不同产地的供试品
溶液各 0． 5 mL(其中第 11 批供试品精密吸取 0． 3
mL)于 25 mL量瓶中，按显色方法显色后，测定吸光
度。计算得 1 1 批供试品中总黄酮的含量为
表 1 加样回收试验结果(μg，n =6)
Table 1 The results of recovery test(μg，n =6)
Original Added Detected Recovery /% 珔X /% RSD /%
10． 19 7． 74 18． 06 101． 68 101． 83 1． 15
10． 13 7． 85 18． 29 103． 93
10． 18 9． 68 20． 03 102． 75
9． 98 9． 87 19． 88 100． 33
9． 76 11． 61 21． 54 101． 43
9． 80 11． 67 21． 69 101． 86
6. 29% ～17． 39%，平均含量为 9． 82%(表 2)。
表 2 不同产地野巴子样品总黄酮的含量测定结果(n =2)
Table 2 The contents of total flavone in different batches of
Elsholtzia rugulosae Folium(n =2)
No． 产地 采收时间 含量 /%
1 盐边县鱼门镇百里山 2008 － 11 － 23 8． 15
2 攀枝花市金江镇飞机坪 2008 － 11 － 22 11． 45
3 昆明城郊山坡 2008 － 11 － 20 9． 68
4 攀枝花学院后山 2008 － 11 － 24 11． 95
5 米易县二半山 2008 － 11 － 24 6． 29
6 攀枝花市仁和区中坝大竹庆 2008 － 11 － 23 6． 78
7 米易县普威镇 2008 － 11 － 24 8． 60
8 攀枝花市总华山 2008 － 11 － 24 8． 46
9 攀枝花市仁和区阿纳乡 2008 － 11 － 23 11． 83
10 昆明城筱竹寺后山 2008 － 11 － 20 7． 46
11 米易县草场乡 2008 － 11 － 24 17． 39
2 结论
11 批样品中，以米易县草场乡所采集样品中总
黄酮的含量最高，达 17． 39%;米易县二半山所采样
品中总黄酮的含量最低，为 6． 29%。其他产地的野
巴子中总黄酮的含量也参差不齐，这可能与野巴子
生长当地的土壤、气候等条件是否适宜野巴子中黄
酮物质的累积有关。从实验结果可知:野巴子中含
有丰富的黄酮类物质，是一种具有极大开发价值的
民间药材。文中所用野巴子中总黄酮的含量测定方
法简便、准确、重复性好，可分析和控制野巴子药材
的质量。
参考文献:
［1］ 朱兆云．大理中药资源志［M］．昆明:云南民族出版社，1991:
110．
［2］ 韦群辉，阮志国，唐自明，等． 白族药野坝子的生药学研究
［J］．云南中医学院学报，2002，25(1) :14 － 17．
［3］ 赵勇，李庆春，赵焱，等．野拔子的化学成分研究［J］． 中国中
药杂志，2004，29(1) :1144 － 1146．
［4］ 文美琼，李璐，李国树． 彝药野坝子花中总黄酮含量的测定
［J］．光谱实验室，2009，26(6) :1381 － 1385．
［5］ 陈国有，齐鹤，徐东花． 黄酮类化合物的生物活性研究进展
［J］．黑龙江医药，2008，21(3) :81 － 82．
收稿日期:2011 － 05 － 19
302第 2 期 杨 莎，等。紫外 －可见分光光度法测定野巴子中的总黄酮