全 文 ：贵州续随子立枯病病原菌鉴定及生物学特性研究
王晓敏，张 燕，龚德勇
（贵州亚热带作物研究所，贵州 兴义 562400）
摘 要：对续随子立枯病组织进行分离、病原菌鉴定及其生物学特性测定。 结果表明，该病原菌初步鉴定为半知菌亚门镰刀菌
属（Fusarium Link）木贼镰孢菌〔Fusarium.equiseti(Corda) Sacc.〕，菌丝生长的最佳条件是PDBA、PDA、PSA培养基，温度为20~25℃，pH
值为6，适宜孢子萌发的最佳温度为25℃，pH为6，光暗交替有利于菌丝生长与孢子萌发。
关键词：续随子；病原菌；生物学特性
中图分类号： S565.9 文献标识码：A 文章编号：1004-874X（2013）15-0093-03
Study on identification and biological characterization of
Fusarium equiseti Corda Sacc. from Euphorbia lathyris
WANG Xiao-min，ZHANG Yan，GONG De-yong
（Subtropics Crops Research Institute of Guizhou，Xingyi 562400，China）
Abstract: The identification and biological characterization of the pathogen isolated from Euphorbia lathyris induced by Fusarium.
equiseti Corda Sacc.was studied in this paper. The results showed that the pathogen was Fusarium.equiseti Corda Sacc. The optimal condition
for growing of pathogenic is PDBA、PDA、PSA at 20～25℃ and pH 6. The optimum temperature for eonidial germination were 25℃ and pH 6,
the light-dark alternation was conducive for the mycelial growth and conidial germination.
Key words: Euphorbia lathyris L；pathogen；biological characteristics
收稿日期：2013-04-01
基金项目：贵州农业科学院研究生创新基金〔黔农科合(创新基
金)2010014 号〕；贵州省科研院所创新能力建设项目（黔科合院所创
能[2010]4007 号）
作者简介 ：王晓敏 （1982- ），女 ，硕士 ，助理研究员 ，E-mail：
wxmgzu@163.com
续随子（Euphorbia lathyris L.），又叫千金子，小巴豆，
为大戟科大戟属植物，在全国多个地区均有分布，可作为
中药治疗小便不通、水肿等病症。 近年研究发现，续随子
种子含油率达 45%以上， 种子油提取的油脂以 C16、C18脂
肪酸为主，与理想柴油替代品的分子组成相类似，是一种
理想能源作物[1]。
通过前期对续随子环境适应性、 生物学特性及栽培
技术一系列的研究发现， 续随子在贵州的生长环境为海
拔 400~2 000 m、年均温 14~20℃的地区。但受高温高湿气
候条件的影响，在播种出苗至开花结实前常发生立枯病，
特别是幼苗期发病较重，容易造成猝倒死苗、缺株断行等，
导致中后期茎基部腐烂[2-5]。 一般株发病率为 10%~15%，严
重的高达 30%~40%甚至整株死亡。 本试验对续随子立枯
病病原菌进行鉴定，并对其生物学特性进行研究，旨在为
有效防治续随子立枯病、 减轻病害发生程度提供理论依
据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
在贵州亚热带作物研究所兴义续随子种植试验基
地，采集续随子立枯病发病部位茎，经组织分离纯化保存
菌种。
1.2 病菌的分离培养与纯化
按常规组织分离法进行病菌分离，分离病原菌前准备
已经滴入 1~2滴 25%乳酸溶液 PDA平板。采回发病植株，
选取发病部位，用自来水冲洗干净，取病健交界处病斑组
织数小块（3~5 mm），在无菌条件下先放入 70％酒精浸泡
10 s， 再转移至 0.1％升汞浸泡 2~3 min 进行消毒处理，经
无菌水洗 3次后移入 PDA平板上，置 25℃培养箱培养，定
期观察，及时对分离组织长出的纯菌落进行纯化培养。
1.3 病原菌致病性测定
按柯赫氏法则，采用针刺法将直径 1 mm 的菌饼置于
健康无病的续随子叶片上，设喷清水作对照，3次重复。 接
种后，每天对植株发病情况进行观察记载，出现典型症状
后，取发病部位进行再分离，并与原接种菌比较。
1.4 病原菌的形态观察
观察 PDA培养基上菌落长成的颜色，待产孢后在显微
镜下观察分生孢子的形态，并用带测微尺的显微镜测量分
生孢子大小等；取子实体进行显微镜观察，根据其形态特
征和测量结果，参照相关文献资料[6]，进行病原菌鉴定。
1.5 病原菌生物学特性研究
1.5.1 不同培养基对病菌菌丝生长的影响 采用 PDA、
PSA、PDBA、Czapek、胡萝卜、燕麦片和琼脂培养基，用打
孔器取直径为 4 mm的菌块接于培养皿中心，在 28℃恒温
箱中培养 1 d后，每天测量菌落直径[7]。
1.5.2 温度对茵丝生长及孢子萌发的影响 取直径 4 mm
的菌块移至 PDA 平板中心，分别置于 0、5、10、15、20、25、
30、35℃的恒温培养箱中培养 1 d 后，每天测量菌落直径。
将滴有孢子悬浮液的载玻片放入装有湿润滤纸的培养皿
中， 置于 5、10、15、20、25、30、35℃度的恒温箱中培养24 h
广东农业科学 2013 年第 15 期 93
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2013.15.034
后检查分生孢子的萌发率。
1.5.3 pH值对茵丝生长及孢子萌发的影响 用 1 mol/L 的
HC1 和 NaOH 调节 PDA 培养基的 pH 值分别为3、4、5、6、
7、8、9、10共 8个梯度。将菌块分别移至 8个 pH值梯度培
养基平板中心，28℃恒温箱培养 1 d 后， 每天测量菌落直
径。 用 1 moL/L 的 HC1 和 NaOH 调节孢子悬浮液 pH值，
至以上 8 个 pH值梯度， 滴于经高压灭菌的载玻片上，置
于 28℃恒温培养箱中保湿培养 24 h后， 在显微镜下检查
萌发率。
1.5.4 光照对茵丝生长及孢子萌发的影响 将直径 3 mm
的菌块移至 PDA平板中心，分别置于完全黑暗、明暗交替
和完全光照 3 个条件下， 在 28℃恒温培养箱中培养 1 d
后， 每天测量菌落直径。 将孢子悬浮液滴于载玻片上，分
别置于同上光照条件下的恒温培养箱中保湿培养 24 h
后，在显微镜下检查萌发率。
2 结果与分析
2.1 续随子立枯病病原菌特征
分离的立枯病菌株在 PDA培养基上的菌落呈白色，气
生菌丝绒状，分生孢子梗无色，无隔膜，有两种类型孢子，大
型分生孢子镰刀形、弯曲度大、顶孢尖、顶端 3~5隔、基部有
突起，小型分生孢子椭圆形或短圆柱形、无色、单孢。 鉴定
为半知菌亚门镰刀菌属 （Fusarium Link） 木贼镰孢菌〔F.
equiseti(Corda) Sacc.〕，菌落特征及分生孢子形态见图 1。
2.2 立枯病病原菌生物学特性
2.2.1 不同培养基对镰刀菌菌丝生长的影响 立枯病病原
菌在 7种不同的培养基中均能生长，但在不同的培养基上
生长速度和生长量均有很大差异。 从表 1 可以看出，在
PDBA 培养基上菌落直径最大， 生长较快其他培养基快，
PDBA、PDA、PSA 利于该病菌的生长， 胡萝卜、Czapek 次
之，燕麦片和琼脂培养不利于其生长。
2.2.2 温度对菌丝体及孢子萌发的影响 不同温度下立枯
病菌丝生长见表 2，可以看出该菌在 5~30℃均能生长，低
于 0℃和高于 35℃时不生长，最适温度 20~25℃。 孢子萌
发情况见图 2，该菌分生孢子在 5~35℃可萌发，最适温度
为 25℃。
2.2.3 pH 值对菌丝体及孢子萌发的的影响 不同 pH 条
件下菌丝生长情况见表 3，病原菌在 pH值为 3~10 的范围
内均能生长，适宜生长的 pH 范围为 5~8，在 pH 值为 6.0
环境下菌丝生长直径最大，表明该病菌在酸、碱的环境中
均能生长，但偏酸的环境更适合生长。 孢子萌发见图 3，分
生孢子在 pH 值 3~10 的环境下均能萌发， 适宜 pH 值为
4~7，最适 pH值为 6，在 pH值为 6的环境下萌发率最高。
2.2.4 不同光照对菌丝生长及孢子萌发的影响 由表 4 可
表 1 不同培养基立枯病病原菌丝生长情况（菌落直径，cm）
培养基
PSA
PDA
PDBA
胡萝卜
Czapek
燕麦片
琼脂
0.17
0.28
0.12
0.21
0.10
0.05
0.09
1
培养时间（d）
2.13
1.60
3.03
0.26
0.15
0.52
0.23
2
3.79
2.3
3.43
2.8
1.5
0.65
0.41
3
4.13
3.41
4.05
3.2
2.3
0.78
0.63
4
5.40
4.30
4.90
3.9
2.9
0.89
0.74
5
7.30
5.40
5.58
4.8
3.6
0.95
0.87
6
7.30
6.60
7.40
5.2
4.1
1.23
1.02
7
表 2 不同温度立枯病病原菌丝生长情况（菌落直径，cm）
温度（℃）
0
5
10
15
20
25
30
35
0
0.2
0.36
1.25
1.36
2.1
1.23
0
1
培养时间（d）
0
0.23
0.42
2.36
2.56
3.84
1.56
0
2
0
0.32
0.65
3.25
3.54
4.51
1.61
0
3
0
0.35
0.71
3.98
4.58
5.32
1.87
0
4
0
0.41
1.56
4.14
5.69
6.71
2.01
0
5
0
0.56
1.69
5.01
6.36
7.12
2.32
0
6
0
1.88
2.5
5.62
7.48
7.65
2.64
0
7
表 3 不同 pH值立枯病病原菌丝生长情况（菌落直径，cm）
pH值
3
4
5
6
7
8
9
10
0.28
0.88
1.05
2.58
2.65
2.22
0.17
2.12
1
培养时间（d）
0.33
1.36
1.25
3.20
3.33
3.36
0.21
2.36
2
0.48
1.92
2.12
4.10
4.44
4.62
0.34
3.2
3
0.87
2.08
3.60
5.21
4.98
5.77
0.48
3.36
4
1.52
2.68
4.23
6.32
6.52
5.87
0.51
3.87
5
1.96
3.02
5.62
7.2
7.1
6.21
0.68
4.10
6
2.05
3.9
6.88
7.83
7.22
7.01
1.36
4.52
7
图 1 续随子立枯病病原菌落特征及分生孢子形态
A:菌落；B：分生孢子
A B
图 2 温度对孢子萌发的影响
孢
子
萌
发
率
（ %
）
94
香园，丰富城市夜景观的层次，在人们夜游的灯光视觉景
观中能多一份闻到植物芳香的嗅觉感受； 利用香味中不
同保健成分设置一些具有相应治疗效果的芳香植物保健
园， 如金银花释放的芳香类保健气味可使高血压患者血
压下降， 白兰花的香味能缓解成年人精神疲劳， 促进睡
眠，有利于提高工作效率。 现代景观设计中，还出现了专
门为盲人、行动不便等残疾人群设置的植物园，如在其中
增加疗养型的芳香植物种类，可取得更好的效果。
总之，肇庆市有着比较多的观赏芳香植物资源，还需
进一步研究它们的景观特点及其香味中的挥发性成分特
征，才能设计出满足不同人群需求、改善城市环境和生态
效应的“香景观”。
参考文献：
[1] 付晖.保健型园林营造探析[D].泰安:山东农业大学,2010.
[2] 江燕,章银柯,应求是.我国芳香植物资源、开发应用现状及其利用
对策[J].中国林副特产,2007,90(5):64-67.
[3] 江燕,章银柯,黎念林.浙江省园林芳香植物的开发利用现状及其
前景[J].西北林学院学报,2008,23(4):205-209.
[4] 周繇.长白山区野生芳香植物资源评价与利用对策[J].安徽农业大
学学报,2004,31(2):212-218.
[5] Mohamed B, Thabèt Y, Sami S, et al. Disinfectant properties of
essential oils from Salvia officinalis L.cultivated in Tunisia [J]. Food
and Chemical Toxicology,2009,47:2755-2760.
[6] 岳子义,朴永吉 .保健型园林研究[J].农业科技与信息(现代园林),
2009,10:21-25.
[7] Faturi C B, Leite J R, Alves P B, et al. Anxiolytic-like effect of sweet
orange aroma in Wistar rats[J]. Progress in Neuro-Psychopharmacology
& Biological Psychiatry,2010,34:605-609.
[8] Bicas J L, Neri-Numa I A, Ruiz A L T G, et al. Evaluation of the
antioxidant and antiproliferative potential of bioflavors[J]. Food and
Chemical Toxicology,2011,49:1610-1615.
[9] Field T, Field T, Cullen C, et al. Stress and crying and enhances
sleep in very young infants [J]. Early Human Development,2008,84:
399-401.
[10] 中科院华南植物园.广东植物志[M].广州:广东科学技术出版社 ,
2009.
[11] 洪蓉 ,金幼菊.日本芳香生理心理学研究进展 [J].世界林业研究 ,
2001,14(3):61-66.
[12] 傅冠民 .芳香疗法的由来 、作用及其应用 [J].香料香精化妆品 ,
2002(5):28-31.
[13] WAN Y, PAN Y Z. Application Characteristics and Patterns of
Aromatic Plants in Gardens[J]. Journal of Landscape Research 2011,3
(6):55-57,61.
[14] 刘志强,屠苏莉,黄勇.华东地区芳香植物及其园林应用[J].苏州科
技学院学报(工程技术版),2004,17(1):60-66.
[15] 陈辉,张显.浅析芳香植物的历史及在园林中的应用[J].陕西农业
科学,2005(3):140-142.
知，每天 12 h 光暗交替和每天 24 h 黑暗条件下，菌丝生
长均比每天 24 h光照快。光暗交替条件下，孢子萌发率比
持续黑暗和持续光照条件下的萌发率高， 说明持续光照
和持续黑暗均不利于孢子萌发。
3 结语
续随子立枯病是续随子全生育期中常发生的主要病
害，从苗期到结果期均可发生，发病部位主要是离地以上
2~3 cm 处茎基部， 病原菌鉴定为半知菌亚门镰刀菌属
（Fusarium Link）木贼镰孢菌〔F.equiseti(Corda) Sacc.〕。按照
柯赫氏法则，分离纯化后的病原菌接种到健康植株，发病
后分离得到的病原菌与原病原相同， 证实了木贼镰孢菌
是引起续随子立枯病的病原真菌。
续随子立枯病菌镰刀菌菌丝在 PDBA、PDA、PSA 培
养基，温度 5~30℃，pH值 5~8，任何光照条件下均能生长；
最佳环境条件是在 PDBA 培养基上 ，pH 值为 6， 温度
25℃，光暗交替。 25℃、pH 值为 6 的光暗交替环境最适宜
孢子萌发。
参考文献：
[1] 龙春林,宋洪川.中国柴油植物[M].北京:科学出版社,2012.
[2] 王晓敏,张燕,龚德勇.不同播种期续随子主要病害发生情况[J].天
津农业科学,2011,17(4):74-76.
[3] 龚德勇,张燕,欧珍贵,等.能源油料植物续随子褐斑病的发生及防
治[J].安徽农业科学,2010,38(18):9589-9590,9645.
[4] 高丽丽,胡德禹,龚德勇.中药材续随子病害的调查与室内药剂毒
力测定[J].贵州农业科学,2009,37(2):43-44.
[5] 龚德勇,张燕,欧珍贵.能源油料植物续随子的综合性状分析[J].贵
州农业科学,2010,38(1):53-56.
[6] 陆家云.植物病原真菌学[M].北京:中国农业出版社,2004.
[7] 方中达 .植病研究方法 [M]. 第 3 版 .北京 :中国农业出版社 ,1998:
119-153.
图 3 pH 对孢子萌发的影响
表 4 不同光照对立枯病病原菌丝生长的影响（菌落直径，cm）
光照处理
持续黑暗
光暗交替
连续光照
1.20
2.33
2.03
1
培养时间（d）
2.32
3.65
2.65
2
4.51
5.36
4.7
3
6.84
6.87
5.98
4
7.54
7.69
6.01
5
7.88
8.06
6.35
6
孢
子
萌
发
率
（ %
）
图 4 光照对孢子萌发的影响
萌
发
率
（ %
）
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
（上接第 63页）
95