全 文 ：［饮片炮制］
不同炮制方法对紫金砂中成分及活性的影响
周明星1， 蒋 刚1， 李莉娥2， 罗华军1， 黄年玉1， 汪鋆植1*
(1. 天然产物开发与利用湖北省重点实验室(三峡大学)，三峡大学化学与生命科学院，湖北 宜昌 443002;
2. 人福药业股份有限公司，湖北 宜昌 443005 )
收稿日期:2011-08-05
基金项目:国家自然科学基金(30970296，21102084)
作者简介:周明星(1984—) ，男，硕士生，主要从事药物活性评价和质量控制研究。Tel:13774190396，E-mail:285281563@ qq. com
* 通信作者:汪鋆植(1966—) ，男(土家族) ，博士，教授，主要从事三峡地区民族民间药物活性评价和质量控制研究。Tel: (0717)
6397478，E-mail:horsedog@ 163. com
摘要:目的 研究不同炮制方法对紫金砂成分及其体外抑制胃 H + /K + -ATP 酶活性的影响。方法 采用 HPLC 法测定
紫金砂醇提物中没药烷吉酮，并利用 H + /K + -ATPase试剂盒测定紫金砂醇提取物对离体培养小鼠胃壁细胞中 H + /K + -
ATP酶活性的影响。结果 紫金砂不同炮制品中没药烷吉酮量有较大变化，其中麸烘样品没药烷吉酮量下降最严重，减
少达 50%;各炮制品醇提物与阴干样品的成分进行指纹图谱比对时，存在峰缺失和含有量变化。阴干、酒蒸、炒黄、麸
炒、麸烘、醋炒、土炒、姜汁炙、米泔水制 9 种炮制品醇提物对 H + /K + -ATP酶的 IC50按生药量计算依次为 144. 93、123. 28、
283. 04、148. 44、375. 38、129. 86、171. 50、76. 64 和 120. 70 μg /mL。结论 紫金砂不同炮制品所含成分和 H + /K + -ATP 酶
抑制活性均存在明显的差异，其中，姜汁炙抑制活性最好，推荐使用姜汁炙炮制紫金砂饮片。
关键词:炮制;紫金砂;没药烷吉酮;姜汁炙;H + /K + -ATP酶
中图分类号:R283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)04-0701-05
Effect of processing on components and activity of Angelica polymorpha
ZHOU Ming-xing1， JIANG Gang1， LI Li-e2， LUO Hua-jun1， HUANG Nian-yu1， WANG Jun-zhi1*
(1． Hubei Key Laboratory of Natural Products Research and Development，College of Chemistry and Life Science，China Three Gorges University，Yichang
443002，China;2． Yichang Humanwell Pharmaceutical Co．，Ltd．，Yichang 443005，China)
ABSTRACT:AIM To study the impact of different processings on the components of Angelica polymorpha and
its inhibitory effect on gastric H + /K + -ATPase activity． METHODS Bisabolangelone content in ethanolic extracts
of Angelica polymorpha was determined by HPLC． The H + /K + -ATPase inhibitory activity on the mouses gastric
parietal cells in vitro was measured by H + /K + -ATPase activity determination kit，which was used to the influence
on the ethanolic extracts of different processings in Angelica polymorpha． RESULTS Bisabolangelone content in
processings decreased，especially up to 50% in the sample processed with stir-frying with bran． And the changes in
peak number and contents were found out as compared with the sample of drying in shade． IC50 of H
+ /K + -ATPase
were obtained from ethanolic extracts of the samples of drying in shade，steaming with wine，stir-frying until
yellow，stir-frying with bran，baking with bran，stir-frying with vinegar and with earth，with ginger juice and with
rice water were in order 144. 93，123. 28，283. 04，148. 44，375. 38，129. 86，171. 50，76. 64 and 120. 70 μg /
mL calculated as the unprocessed． CONCLUSION The study shows that there are significant differences in the
components and inhibitory activities of gastric H + /K-ATPase by different processes of Angelica polymorpha． The
method of stir-frying with ginger juice on Angelica polymorpha is of good bioactive importance．
KEY WORDS:processing;Angelica polymorpha;bisabolangelone;stir-frying with ginger juice;H + /K + -ATPase
紫金砂为伞形科当归属植物拐芹 Angelica poly-
morpha Maxim．的根，在鄂西、渝东、陕南地区广为使
用［1］，主要用于治疗胃痛、腹痛，是土家族常用药
物。收载于《湖北省中药材质量标准》(2009 年
107
2012 年 4 月
第 34 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2012
Vol． 34 No． 4
版)。近年来，对紫金砂的化学成分及药理活性的
研究表明其具有多种药理活性［2-6］。有研究［7］报
道，紫金砂主要活性成分没药烷吉酮具有良好的抗
胃溃疡作用，其主要作用机制为抑制 H +，K + -ATP
酶活性。但没药烷吉酮具有一定毒性［8］，灌胃给药
LD50为 76. 60 mg /kg，使紫金砂的临床使用受到影
响。为了保证临床用药安全，我们采用不同方法对
紫金砂进行了炮制，并采用 HPLC 法对不同炮制品
中没药烷吉酮进行测量，利用指纹图谱对其化学组
成成分进行了比较分析，同时测定了不同炮制品对
H +，K + -ATP 酶的抑制作用，为制定紫金砂的炮制
规范提供了依据。
1 仪器试剂与材料
1. 1 仪器和试剂
1. 1. 1 仪器 Waters 2998 高效液相色谱仪(美国
Waters公司) ;SHELLAB 2424 /2-2 型二氧化碳培养
箱(美国 SHELLAB公司) ;GZX-9240 MBE数显鼓风
干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂) ;
TDZ4-WS低速离心机(平凡仪器仪表有限公司) ;
YXQ-LS-30 SII立式蒸汽灭菌器(上海博迅实业有限
公司医疗设备厂) ;S-3150 型紫外可见光光度计(美
国 Scinco公司) ;EYELA SB-1100 旋转蒸发仪(上海
爱朗仪器有限责任公司)等。
1. 1. 2 试剂 H +，K + -ATPase活性测定试剂盒(南
京建成生物工程研究所) ;乙腈(色谱纯，美国 Tedia
公司) ;甲醇(色谱纯，美国 J. T. Baker公司) ;奥美拉
唑肠溶胶囊(北京悦康药业有限公司) ;乙醇 (天津
博迪化学试剂) ;DMEM培养基(Gibco，美国)。
1. 2 材料 原植物药材于 2010 年 11 月采自神农
架林区。经中南民族大学万定荣教授鉴定为伞形科
植物拐芹 Angelica polymorpha Maxim. 的干燥根。
2 方法与结果
2. 1 紫金砂炮制样品制备 参照《中国药典》2010
年版附录药材炮制通则进行常规炮制。先将紫金砂
切成厚片，分别① 阴干、②酒蒸、③清炒、④麸炒、⑤
麸烘、⑥醋炒、⑦土炒、⑧姜汁炙、⑨米泔水制，得到
9 种紫金砂不同炮制样品。
2. 2 紫金砂炮制品中没药烷吉酮的测定
2. 2. 1 色谱条件 Diamonsil C18色谱柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ;流动相为乙腈-水(40 ∶ 60)［9］;进样
量为 10 μL，体积流量为 1. 0 mL /min;柱温为25 ℃，
检测波长为 254 nm［10］。
2. 2. 2 对照品溶液制备 精密称取没药烷吉酮 20
mg，用色谱甲醇溶解，于 10 mL 量瓶中定容至刻度，
0. 45 μm 滤膜过滤。精确量取 2. 0 mg /mL 的没药
烷吉酮溶液，配制成 0. 25、0. 5、0. 75、1. 0 和 1. 25
mg /mL。
2. 2. 3 稳定性试验 取样品溶液，间隔 3 h 测 1
次，共测 24 h。结果没药烷吉酮峰面积 RSD 为
1. 4% (n = 8) ，表明供试品溶液室温下放置 24 h 基
本稳定。
2. 2. 4 精密度试验和重复性试验 精密吸取没药
烷吉酮 10μL 重复进样 5 次，测定没药烷吉酮峰面
积的 RSD 为 0. 78%。
2. 2. 5 样品溶液制备 精确称取各紫金砂炮制品
5 g，以 95 % 乙醇按质量体积比 1 ∶ 8 ，回流提取 6
h，减压浓缩至干，以 10 mL色谱甲醇溶解，0. 45 μm
滤膜过滤，待测。
2. 2. 6 标准曲线的绘制 精密吸取 5 个质量浓度
的对照品溶液，按色谱条件测得峰面积，以进样质量
浓度为纵坐标，峰面积为横坐标，绘制标准曲线。数
据用 Origin7. 5 处理，测得没药烷吉酮标准曲线线性
回归方程为:y = 7. 368 686 × 10 －5 x + 0. 114 85，R
= 0. 999 0。
2. 2. 7 样品测定 按拟定的色谱条件测得 9 种样
品中没药烷吉酮的峰面积，根据线性回归方程计算
出样品中没药烷吉酮，见表 1。结果表明，与阴干饮
片相比，其它炮制品中没药烷吉酮含有量均有明显
下降，与加热温度和时间有关，加热温度越高、加热
时间越长损失越多。其中麸烘没药烷吉酮量下降最
严重，减少达 50%。
表 1 紫金砂不同炮制品中没药烷吉酮
Tab． 1 The content of the active bisabolangelone in differ-
ent processed Angelica polymorpha
样品编号 样品名称 样品中没药烷吉酮含有量 /%
① 阴干 2. 18
② 酒蒸 1. 58
③ 清炒 1. 45
④ 麸炒 1. 25
⑤ 麸烘 1. 06
⑥ 醋炒 1. 19
⑦ 土炒 1. 39
⑧ 姜汁炙 1. 69
⑨ 米泔水制 1. 67
2. 2. 8 加样回收率试验 称取约 0. 1 g 醋炒紫金
砂样品粉末(没药烷吉酮含有量为 1. 19%) ，精密称
定，共 5 份，加入含有量相近的没药烷吉酮对照品，
按 2. 2. 5 项制备供试品提取物，以 5 mL色谱甲醇溶
解，0. 45 μm 滤膜过滤，进样 10 μL ，按上述色谱条
件计算回收率，结果见表 2。
207
2012 年 4 月
第 34 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2012
Vol． 34 No． 4
表 2 加样回收试验结果(n =5)
Tab． 2 Recovery of the assay(n =5)
序
号
取样量
/ g
原有量
/mg
加入量
/mg
测定值
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 0. 100 0 1. 190 0 1. 201 1 2. 360 7 98. 73 98. 72 1. 43
2 0. 100 3 1. 193 6 1. 201 1 2. 372 6 99. 08
3 0. 101 1 1. 203 1 1. 201 1 2. 371 5 98. 64
4 0. 101 4 1. 207 8 1. 201 1 2. 368 1 98. 31
5 0. 101 5 1. 207 9 1. 201 1 2. 381 4 98. 85
2. 3 紫金砂不同炮制品 HPLC分析
2. 3. 1 色谱分析条件 Diamonsil C18色谱柱(4. 6
mm ×250 mm，5μm) ;流动相为(A)乙腈-(B)水，梯
度洗脱，0 ～ 23 min(15% ～ 55% A) ，23 ～ 35 min
(55% ～70%A) ，35 ～ 45 min(70% ～ 95% A) ，45 ～
50 min(95% A) ;进样量 10 μL，体积流量 1. 0 mL /
min;柱温25 ℃;检测波长 254 nm。
2. 3. 2 样品溶液制备 同 2. 2. 3 项操作。
2. 3. 3 稳定性和重现性试验 取样品溶液，按上
述色谱条件间隔 3 h 测 1 次，共测 24 h。结果各个
峰的出峰时间和峰面积 RSD 小于 0. 89%(n = 8) ，
表明供试品溶液室温下放置 24 h 基本稳定，试验重
复性良好。
图 1 紫金砂阴干饮片醇提物成分 HPLC色谱图
Fig． 1 The HPLC chromatography of the Angelica
polymorpha alcohol extract
2. 3. 4 紫金砂不同炮制品成分 HPLC 分析结果
见图 1 ～ 4。结果表明，9 种样品醇提物 HPLC 色谱
分析图有 15 个主要共有峰，而阴干、土炒、清炒、米
泔水制、醋炒、麸炒 6 种样品有 21 个主要共有峰，结
果见表 3;与阴干饮片相比，炮制后成分含有量变化
较大，主成分没药烷吉酮量不同程度下降，其中麸烘
没药烷吉酮量下降最严重，减少达 50%。土炒使
17、18 号峰化合物的量下降幅度达 82. 9% 和
81. 7%;麸烘和麸炒可以提高 8、9、10、11 号峰化合
物的量，其中麸烘后上升幅度分别为阴干样品的
8. 7 倍、31. 9 倍、2. 2 倍、1. 5 倍;同时存在峰的缺失，
经过姜汁炙、酒蒸、麸烘后，7 号峰以前的峰出现大
量的缺失。
图 2 紫金砂中分离得到单体化合物 HPLC色谱图
Fig． 2 The HPLC chromatograph of the monomers se-
perated from Angelica polymorpha
7. 水合氯化前胡素 10. 氯化前胡素 11. 佛手柑内脂 13. 没
药烷吉酮 16. 7-(3-methylbut-enyloxy)obromen 18. 异欧前胡素
7． oxypeucedaninhydrate 10． oxypeucedanin 11． bergapten 13．
bisabolangelone 16． 7-(3-methylbut-enyloxy)ohromen 18． isoim-
peratorin
图 3 紫金砂姜汁炙、酒蒸、麸烘 HPLC色谱图
Fig． 3 The HPLC chromatograph of stir-frying with gin-
ger juice，steaming with wine，bran baking
图 4 紫金砂土炒、清炒、米泔水制、醋炒、麸炒 HPLC
色谱图
Fig． 4 The HPLC chromatograph of stir-baked with
earth，simple stir-frying，preparing in wash-
ing water of ice，stir-frying with vinegar，stir-
frying with bran
307
2012 年 4 月
第 34 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2012
Vol． 34 No． 4
表 3 9 种紫金砂炮制饮片醇提物共有峰编号与面积
Tab． 3 Peaks owned by all nine kinds of processed Angelica polymorpha
共有
峰编号
共有峰面积 /mAU2
姜制 米泔水制 酒蒸 醋炒 阴干 麸炒 土炒 清炒 麸烘
7 6 606 7 608 6 099 6 144 5 139 3 146 4 791 4 349 4 687
8 52. 2 38. 2 17. 2 112 89. 4 618 38. 7 394 777
9 78. 2 64. 8 554 155 82. 6 1 281 46. 2 536 2 637
10 38. 4 69. 6 569 783 631 674 26. 2 489 1 420
11 455 775 606 1 214 429 558 442 1 439 645
12 390 197 594 566 886 343 351 624 553
13 3 202 2 724 2 622 1 367 4 656 1 586 2 001 2 432 1 070
14 157 2 820 1 286 537 3 740 445 1 548 1 718 501
15 1 180 903 2 466 1 377 2 716 3 030 1 074 1 241 1 693
16 290 367 410 556 412 337 259 401 351
17 709 720 749 881 2 803 1 198 485 748 1087
18 748 703 689 916 3 641 825 666 882 685
19 97. 7 179 240 179 186 158 180 123 128
20 117 32. 2 69 75. 6 204 129 43. 8 84. 6 56. 7
21 81. 1 52. 2 73. 4 102 232 135 52. 6 83. 9 55. 7
表 4 紫金砂不同炮制品对 H +，K + -ATPase抑制作用结果
Tab． 4 The H +，K + -ATPase inhibitory activity of different processed Angelica polymorpha
编号 样品
不同质量浓度的抑制率 /% IC50 /(μg·mL －1)
100 μg /mL 50 μg /mL 25 μg /mL 12. 5 μg /mL 6. 25 μg /mL 按生药量计算 相当没药烷吉酮
① 阴干 55. 16 78. 02 49. 03 42. 02 31. 05 144. 93 3. 16
② 酒蒸 85. 23 84. 29 41. 63 17. 56 4. 52 123. 28 1. 95
③ 清炒 62. 72 58. 43 38. 05 25. 12 12. 13 283. 04 4. 10
④ 麸炒 54. 20 70. 76 64. 32 32. 53 31. 39 148. 44 1. 86
⑤ 麸烘 47. 34 58. 73 48. 14 21. 39 25. 44 375. 38 3. 89
⑥ 醋炒 56. 43 80. 95 51. 43 41. 90 21. 90 129. 86 1. 54
⑦ 土炒 75. 0 52. 38 53. 10 38. 81 26. 42 171. 50 2. 38
⑧ 姜汁炙 65. 24 81. 43 75. 24 33. 10 24. 29 76. 64 1. 30
⑨ 米泔水制 83. 10 67. 62 41. 12 26. 07 10. 71 120. 70 2. 02
奥美拉唑 41. 37 72. 30 59. 35 47. 84 27. 91 25. 72
2. 4 紫金砂炮制品对 H +，K + -ATP酶活性的影响
2. 4. 1 待测样品溶液制备 取紫金砂不同炮制品
各 30 g，按质量体积比 1 ∶ 8，用 95%乙醇回流提取 6
h，将提取液减压浓缩至干，称取一定量醇提物及奥
美拉唑以无水乙醇配制成 10 mg /mL 溶液。用
DMEM培养液将供试样稀释成 100、50、25、12. 5、
6. 25 μg /mL备用。
2. 4. 2 胃壁细胞的获得 参考文献［11］采用胰酶
酶消化分离胃壁细胞，用 5 mL DMEM 培养基悬浮
胃壁细胞，备用。
2. 4. 3 H +，K + -ATPase 活性测定 将 DMEM 培养
液悬浮的壁细胞悬液制成约 5 × 106 个 /mL，按每孔
100 μL加入 96 孔细胞培养板，设置成空白组、奥美
拉唑对照组和待测药物组。并加入待测醇提物稀释
液 10 μL(每个质量浓度 6 孔)于 37 ℃ 5% CO2 培
养箱中孵 2 h 后，按照 H +，K + -ATP 酶活性测定试
剂盒操作说明对各组进行测定。
2. 4. 4 紫金砂不同炮制品醇提物对 H +，K + -ATP
酶抑制作用实验结果 以空白组作为参照基数按公
式计算抑制率［抑制率 =(空白组酶活 －加药组酶
活)/空白组 × 100% ］，IC50值通过 Origin7. 5 软件采
用插值法计算。结果见表 4。结果表明，不同炮制
方法对活性影响较大，与阴干药材相比，姜汁炙、米
泔水制、酒蒸、醋炒后的样品活性有不同程度的提
高，姜汁炙增效作用最明显。而麸炒、土炒、清炒、麸
烘后的样品活性有不同程度的降低，不同炮制品中
没药烷吉酮含有量与活性并不成线性关系。
3 讨论
紫金砂为土家族常用药物，治疗胃痛、腹痛疗效
确切。研究表明紫金砂具有良好的抗胃溃疡作用，
其主要活性成分为没药烷吉酮，没药烷吉酮具有一
定毒性。由于临床常用单味药水煎服用，而没药烷
407
2012 年 4 月
第 34 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2012
Vol． 34 No． 4
吉酮水溶性差，同时高温易挥发，因此，临床常用剂
量下，实际吸收的量远低于药材中的含有量，因此未
见不良反应报道，为了保证临床用药安全，我们采用
不同方法对紫金砂进行了炮制。研究表明不同炮制
方法对紫金砂成分和活性存在明显影响，说明对紫
金砂进行合理炮制，对保证临床疗效和安全是完全
必要的。
紫金砂经不同方法炮制后，没药烷吉酮量均有
不同程度下降，其中麸烘没药烷吉酮含量下降最严
重，减少达 50%。热处理易使没药烷吉酮挥发或转
化，加热温度越高、加热时间越长损失越多。姜汁炙
能较好地保留没药烷吉酮，但姜汁炙后没药烷吉酮
量仍然下降了 22%。同时，土炒使 17、18 号峰化合
物的量下降幅度较大，而麸烘和麸炒可以明显提高
8、9、10、11 号峰化合物的量，经过姜汁炙、酒蒸、麸
烘后，7 号峰以前的峰出现大量的缺失。不同成分
的量发生变化，必然对活性和毒性产生影响，因此有
必要通过合理炮制，调节紫金砂中不同成分比例，以
获得最佳活性和最低毒性。
紫金砂经不同方法炮制后，活性亦有变化，如姜
汁炙活性明显提高，而麸烘、清炒则降低活性。活性
与没药烷吉酮含有量总体成正相关，但不同炮制品
中没药烷吉酮含有量与活性并不成线性关系。表
明，紫金砂中不同成分相互作用关系复杂，不同类型
化合物，同一类型化合物不同结构对 K + -ATP 酶的
抑制活性具有不同影响，可表现出协同、拮抗或改变
毒性等不同作用。如姜汁炙等样品活性提高，麸烘
样品活性降低与 7 号峰(水和氧化前胡素)峰面积
正相关，表明水和氧化前胡素量增加有助于提高活
性，可能为有效成分或增效成分。姜汁炙、酒蒸、米
泔水制 3 个样品中 7、13、17、18 号峰面积相近，而活
性与 9、10 号峰峰面积负相关。同时醋炒、麸炒、麸
烘样品的活性也表现出 9、10 号峰峰面积增加活性
会降低，存在峰缺失的姜汁炙、酒蒸、麸烘样品的活
性同样表现出 9、10 等峰峰面积增加而活性降低。
由此表明氧化前胡素等化合物可能为拮抗性成分。
实验显示:通过炮制，调节不同成分的含有量，增强
有效成分的协同作用，减少拮抗作用或毒性作用，对
于最佳程度利用紫金砂具有最好意义，但不同成分
之间的相互作用需要进一步研究。同时，将传统炮
制方法与谱效监测相结合，有助于推进炮制技术
发展。
姜制法在中药炮制及临床应用中历史悠久，应
用广泛。通过姜汁炙达到了引药归经、协同增效减
毒的炮制目的。实验显示，姜汁炙能提高活性，减少
用药剂量，因此我们推荐使用姜汁炙炮制紫金砂。
但姜制方法有姜汁炙(炒)、生姜浸、生姜自然汁拌
蒸、姜汁煮、姜汁煨等近 20 种。选用何种姜制方法，
如何确定姜汁用量、姜汁体积、和闷润时间等参数需
要进一步实验。同时姜制是否能引药归经并降低毒
性有待深入研究。
参考文献:
［1］ 傅书遐． 湖北植物志(3) ［M］. 武汉:湖北科学技术出版社，
2002:237．
［2］ 湖北省食品药品监督管理局． 湖北省中药材质量标准:2009
年版［S］． 武汉:湖北科学技术出版社，2009:137-138．
［3］ 米彩峰，石慧丽，李富贤，等． 拐芹根化学成分研究［J］． 天
然产物研究与开发，1997，9(1) :43-45．
［4］ 蔡正军，但飞君，程 凡，等． 白根独活抗菌有效部位的化
学成分研究［J］． 中草药，2005，31(8)1610-161．
［5］ 汪鋆植，张荣平，叶 红，等． 土家族药紫金砂挥发油成分
分析和药理作用研究［J］． 中成药，2008，30(4) :596-58．
［6］ 张明发，沈雅琴． 氧化前胡素的抗腹泻和抗炎作用［J］． 中
草药，1996，27(12) :727-729．
［7］ Wang J Z，Zhu L B，Zou K，et al． The anti-ulcer activities of
bisabolangelone from Angelica polymorpha［J］． J Ethnopharma-
cology，2009，123(2) :343-346．
［8］ 朱烈彬，汪鋆植，石雅琴，等． 紫金砂提取物的急性毒性实
验［J］． 中成药，2008，30(12) :1839-1840．
［9］ 王晓梅，汪鋆植，郭志勇，等． 高效液相法快速测定紫金砂
中没药烷吉酮和异欧前胡素的含量［J］． 中成药，2011，33
(2) :294-27．
［10］ 卢金清，吴丹慧，何雪峰，等． 高效液相色谱法测定紫金砂
药材中没药烷吉酮的含量［J］． 中国医院药学杂志，2010，
30(8) :713-714．
［11］ 陈 蕾，黄威权，孙绪德，等． 大鼠胃壁细胞的分离及培养
［J］． 第四军医大学学报，2002，23(9) :769-771．
507
2012 年 4 月
第 34 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2012
Vol． 34 No． 4