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杜梨叶中根皮苷含量测定



全 文 :山东中医杂志 2011 年 3 月第 30 卷第 3 期
进样量(V/μl)
图 1 根皮苷标准曲线
25000
20000
15000
10000
5000
0
0 5 10 15
系列 1
线性(系列 1)
A
表 1 根皮苷加样回收率试验
样品中含量
(m/mg)
加入量
(m/mg)
测得量
(m/mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
5.255 5.0 9.94 96.9
5.303 5.0 10.07 97.7
5.238 5.0 9.87 96.4 97.08 0.57
5.185 5.0 9.86 96.8
5.265 5.0 10.02 97.6
杜梨(Pyrus betulaefolia Bge.)为蔷薇科梨属植
物,又名棠梨、海棠梨、野梨子、土梨。 杜梨在我国分
布较广,华北、西北、长江中下游流域及东北南部均
有栽培或野生[1],常作为庭荫树、防护林种植于园林
及作为砧木用。 其果实可用于消食止痢,治腹泻;枝、
叶可治霍乱,吐泻不止,转筋腰痛,反胃吐食;树皮可
煎水洗治皮肤溃疡等,是一种良好的药用植物。 《中
华本草》中记载:棠梨枝叶味酸、甘涩、寒、无毒;能舒
肝和胃,缓急止泻,所述的棠梨叶即杜梨叶,湖南安
化地区当地人有端午后采收棠梨叶的传统习惯,将
鲜叶采摘回家后放于院中,日晒夜露,约达 20 d 后,
叶片自然变红干燥,悬挂收藏于灶屋,夏季熬煮饮
用,为传统制法;现也有经过渥堆发酵使鲜叶变红,
再日晒干燥制成干叶的。 两种制法所得干叶经熬煮
使用,均能达到达到降暑、解渴的效果,其汤色红亮
清澈,口感甘甜、润和,多年来一直是安化地区除了
茶叶以外最传统的饮料之一。 本文测定并比较了杜
梨叶两种不同炮制方法根皮苷含量,旨在为杜梨叶
的资源开发提供可靠依据。
1 试验材料
1. 1 仪器 FA1004 电子天平;RE52-98 旋转蒸发
仪;Agilent 1100 高效液相色谱仪。
1. 2 药物与试剂 色谱纯乙腈、甲醇均为天津四友
公司; 根皮苷标准品由上海源叶生物科技有限公司
提供。
1. 3 样品 杜梨叶 1 号为日晒夜露传统制法,2 号
为渥堆发酵后晒干。
2 方法与结果[2-3]
2. 1 标准曲线的测定
2. 1. 1 色谱条件 色谱柱:SB C18(150mm×4.6 mm);
流动相:乙腈 - 水(25:75);进样量 6μl,流速 1.0ml/min;
柱温 25℃,检测波长 285 nm。 在该色谱条件下待测
组分可达到基线分离。
2. 1. 2 标准品溶液制备 标准品 10 mg,50%甲醇
溶解定容至 10 ml,0.45 μm 滤膜过滤,供测定用。
2. 1. 3 供试样品溶液制备 准确称取待测样品 1 g,
加 50%甲醇 10 ml 浸泡 1.5 h,超声 15 min,0.45 μm
滤膜过滤,供测定用。
2. 1. 4 标准曲线及线性关系考察 准确吸取对照
品溶液 1 μl、2 μl、4 μl、6 μl、8 μl、10 μl,按色谱条件
测得峰面积,以进样量(μl)为横坐标,峰面积为纵坐
标,绘制标准曲线。 回归方程为:Y=2126.5X+111.13,
r=0.9998。 见图 1。
2. 1. 5 稳定性试验 取样品溶液,间隔 3 h 测 1 次,
共测 6次。 结果根皮苷峰面积 RSD 为 1.81%(n=6),
表明供试品溶液室温下放置 24 h稳定。
2. 1. 6 精密度试验 精密吸取根皮苷等体积的对
照品溶液 6 μl 重复进样 5 次,测得根皮苷峰面积的
RSD=0.30%。
2. 1. 7 重复性试验 取样品 5 份,照“供试品溶液
制备”项操作,测得根皮苷平均含量 1.01%,RSD 为
1.07%
2. 1. 8 加样回收试验 精密称取已知含量样品 5
份,提取前分别加入与样品含量相当的对照品,测定
含量,计算回收率,结果见表 1。
杜梨叶中根皮苷含量测定
殷法杰 1,秦国培 1,蒋海强 1,张岭苓 2,李 楠 2,徐凌川 3
(1.山东中医药大学 2008 年级硕士研究生,山东 济南 250355; 2.湖南省白沙溪茶厂有限责任公司,湖南 安
化 413514; 3.山东中医药大学,山东 济南 250355)
[摘要] 目的:比较两种不同加工方法制成的杜梨叶中的根皮苷含量,为杜梨叶的资源开发利用提供依据。 方法:采用高效
液相色谱法测定根皮苷含量。 结果:经日晒夜露传统制法的杜梨叶中根皮苷含量为 1.01%,经渥堆变红后晒干的杜梨叶中根皮苷
含量为 0.41%。 结论:经渥堆发酵过的杜梨叶中根皮苷含量明显低于传统制法中根皮苷含量。
[关键词] 杜梨叶;根皮苷;高效液相色谱法
[中图分类号] R285.6 [文献标识码] A [文章编号] 0257-358X(2011)03-0200-02
[收稿日期] 2010-11-12
[作者简介] 殷法杰(1984-),男,山东临沂人,硕士研究生,主要从
事中药质量控制与药用真菌学研究。
[通讯作者] 徐凌川,教授,硕士生导师,主要从事中药质量控制与
药用真菌学研究。 E-mail:xulingchuan518@sina.com。 (下转第 215页)
200· ·
DOI:10.16295/j.cnki.0257-358x.2011.03.034
山东中医杂志 2011 年 3 月第 30 卷第 3 期
2. 2 根皮苷含量测定 按标准曲线的测定项下方
法制备样品溶液并进行含量测定,根皮苷含量测定
结果为:1号样品 1.01%,2号样品 0.41%。
3 讨论
3. 1 经测定,日晒夜露的传统制法和渥堆发酵法干
燥后的杜梨叶中根皮苷含量分别为 1.01%和 0.41%,
实验证明经渥堆发酵后杜梨叶中的根皮苷含量降
低,因此在选择这两种制法中,如果杜梨叶浸煮后的
口感和色泽差别不大时应考虑前者。
3. 2 根皮苷存在于苹果属、梨属等多种植物中,属
于二氢查尔酮苷类化合物,是由根皮素和配糖体结
合成的苷,糖基水解形成葡萄糖,其降解物根皮酚,
能够有效抑制真菌等微生物活动。 同时,根皮苷是
一种天然的非糖甜味剂,在糖尿病及其并发症的防
治中具有独特疗效[4],同时具有良好的抗氧化性、抗
癌、美白等作用 [5],因而,含根皮苷类成分植物在新
型药物和功能性食品的开发中具有广阔的应用前
景。
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潘瑞萍等[19]应用中药汤剂口服配合中药熏蒸治
疗慢性荨麻疹。 对照组给予中药汤剂(荆芥、防风、
地肤子、白鲜皮、赤芍、牡丹皮各 10 g,益母草 20 g,
生地黄、当归各 15 g,制何首乌 12 g,蝉蜕 6 g)口服;
治疗组除使用与对照组相同汤剂口服外,配合中药
熏蒸(处方:羌活、荆芥、防风各 15 g,益母草、牡丹
皮、白鲜皮、赤芍、苦参各 30 g,川芎 20 g)。 结果治疗
组总有效率 90.3%,对照组总有效率 73.3%,两组总
有效率比较有显著性差异,P<0.05,治疗组疗效明
显优于对照组。
夏辛[20]研究了中药配合音乐疗法治疗慢性荨麻
疹,将 60例符合入选标准的慢性荨麻疹患者随机分
成两组。 治疗组 32例口服当归饮子,服药后进行音
乐疗法辅助治疗;对照组 28 例单纯口服当归饮子。
观察两组治疗前后瘙痒、风团数目、风团大小和症状
积分下降指数(SsRI)及复发率、复发时间的变化。
结果显示,应用当归饮子配合音乐疗法治疗与单独
用当归饮子治疗对慢性荨麻疹均有较好疗效,但前
者疗效更明显,且在控制复发率方面优于后者。
3 讨论
西医学认为慢性荨麻疹的发病机制是各种因素
导致的过敏引起的,因此治疗也多是针对过敏,常用
抗组胺药物和一些激素类药物等,这些药物大都有
很多不良反应,有些还会引起更显著的过敏反应,而
且用西药大多会产生依赖性,停药后复发率高。 中医
以整体观念、辨证论治进行诊治,针对慢性荨麻疹的
病因病机,确立治则治法,并且因人、因地、因时确
立方剂。 通过中药内服、外用、针灸、拔罐、熏蒸等方
法治疗慢性荨麻疹,具有不良反应少、依赖性低、治
愈率高、复发率低的优势。
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