全 文 ：［收稿日期］ 20100916(006)
［基金项目］ 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻
0718002-2-13)
［通讯作者］ * 蒋珍藕，副主任中药师，硕士，研究方向:中草药
研究与开发，Tel:0771-5869102;E-mail:zhenou _
jiang@ yahoo. com. cn
木姜叶柯总黄酮的提取工艺
蒋珍藕* ，韦宝伟，黄明桂，邱宏聪，陆国寿
(广西中医药研究院，南宁 530022)
［摘要］ 目的:优选木姜叶柯总黄酮的提取工艺。方法:以总黄酮中主要有效成分根皮苷的提取量为考察指标，采用对比
试验与正交试验相结合的方法优选木姜叶柯总黄酮提取工艺条件。结果:木姜叶柯总黄酮的最佳提取工艺为:回流提取 3 次，
每次用 10 倍药材量的 70%乙醇，每次 2 h。结论:该提取工艺科学、合理、可行。
［关键词］ 木姜叶柯;总黄酮;根皮苷;提取工艺
［中图分类号］ R283. 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)03-0014-03
Study on Extraction Process of Total Flavones of Lithocarpus litseifolius
JIANG Zhen-ou* ，WEI Bao-wei，HUANG Ming-gui，QIU Hong-cong，LU Guo-shou
(Guangxi Academy of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences，Nanning 530022，China)
［Abstract］ Objective:To optimize the extraction process of the total flavones of Lithocarpus litseifolius.
Method:Main effective component of phloridzin in total flavones was taken as indexes，and extraction process was
optimized by comparative experiment and orthogonal test. Result:The optimum extraction process was determined
as follows:extracting three times by refluxing，10-fold drug amount and 70% alcohol added and extracted for two
hours. Conclusion:The extraction process is scientific，reasonable and feasible.
［Key words］ Lithocarpus litseifolius;total flavones;phloridzin;extraction process
木姜叶柯为壳斗科柯属植物 Lithocarpus litseifo-
lius(Hance)Chun. ［1］的干燥嫩叶，具有清热解毒，化
痰，祛风，降压的作用，主治湿热泻痢、肺热咳嗽、痈
疽疮疡、皮肤瘙痒、高血压［2］;现代研究表明，木姜叶
柯中的黄酮类成分具有降血糖、降血压、降脂及抗过
敏、抗炎等作用，尤其根皮苷在糖尿病及其并发症的
防治中具有独特的效果［3］，故木姜叶柯将可能是一
种新型的预防和治疗糖尿病的新药材。本研究对木
姜叶柯有效部位总黄酮的提取工艺进行研究，为进
一步分离纯化木姜叶柯总黄酮打下基础。
1 材料
LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津公司)、SPD-
20A紫外检测器(日本岛津公司)、威玛通用多媒体
色谱数据工作站;LIBROR AEL-200 电子天平(日本
岛津公司)。
根皮苷(SIGMA公司，批号 083K7072，质量分数
98%以上);乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均
为分析纯;乙醇为食用酒精(95%，南宁市广耀实验
装备有限责任公司)。
药材采自广西平果县海城乡荣芳村陆拥屯，经
广西中医药研究院中药资源研究所覃德海副研究员
及饶伟源副研究员鉴定为壳斗科柯属植物木姜叶柯
L. litseifolius的干燥嫩叶。
2 方法与结果
2. 1 根皮苷的含量测定
2. 1. 1 色谱条件 Thermo HYPERSIL ODS-2(4. 6
mm × 250 mm，5 μm)色谱柱;流动相乙腈-0. 1%磷
酸(21∶ 79);检测波长 280 nm;柱温室温，进样量 5
μL。理论塔板数按根皮苷峰计，应不低于 2 000。
色谱图见图 1。
·41·
第 17 卷第 3 期
2011 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 3
Feb.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.03.012
图 1 木姜叶柯根皮苷含量测定 HPLC
A. 对照品;B. 样品;C. 空白对照;1. 根皮苷
2. 1. 2 对照品溶液的制备 取根皮苷对照品适量，
精密称定，加甲醇制成 100 mg·L －1的溶液，即得。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 取样品 20 mg，精密
称定，精密加入甲醇 50 mL，称定质量，超声处理
(功率 80 W，频率 50 kHz)10 min，放冷，再称定
质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续
滤液，即得。
2. 1. 4 线性关系考察 精密称取根皮苷对照品
10. 5 mg，置 25 mL 量瓶中，加甲醇使溶解并稀释
至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取
对照品贮备溶液 0. 5，1，2，5，10 mL，分别置 10
mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别作为
对照品溶液，按上述色谱条件测定。以根皮苷对
照品进样量(μg)为横坐标(X)，峰面积积分值为
纵坐标(Y)绘制标准曲线，得回归方程 Y =
2 067 966X － 22 031. 903 7(r = 0. 999 9)，线性
范围 0. 105 ～ 2. 10 μg。
2. 1. 5 精密度试验 对同一供试品溶液，按上述色
谱条件连续测定 5 次，记录根皮苷峰面积。结果
RSD 1. 67%。
2. 1. 6 稳定性试验 对同一供试品溶液，于 0，1，2，
4，10，12 h 依法测定，记录根皮苷峰面积，结果 RSD
1. 73%。
2. 1. 7 重复性试验 对同一批样品 6 份，按 2. 1. 3
方法及上述色谱条件测定，计算根皮苷含量，结果
RSD 1. 96%。
2. 1. 8 加样回收率测定 精密称取根皮苷对照品
33. 0 mg，置 500 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至
刻度，摇匀，作为回收对照溶液。精密称取重复性试
验项下的样品约 10 mg，平行取 6 份，分别精密加入
上述根皮苷回收对照溶液 50 mL，按上述拟订的方
法提取、测定，计算回收率，结果平均回收率为
98. 74%，RSD 1. 70%，符合定量分析的要求。见
表 1。
表 1 根皮苷加样回收率测定结果
取样量 / g 样品含量 /mg 测得量 /mg 回收率 /%
0. 010 6 3. 173 6 6. 445 0 99. 13
0. 010 8 3. 233 5 6. 456 0 97. 65
0. 011 3 3. 383 26. 643 0 98. 78
0. 010 1 3. 023 9 6. 335 1 100. 34
0. 010 6 3. 173 6 6. 489 7 100. 49
0. 011 5 3. 443 1 6. 613 1 96. 06
注:对照品加入量均为 3. 300 0 mg。
2. 2 提取溶剂的选择 综合考虑各方面因素，以木
姜叶柯总黄酮中的根皮苷的提取量为考察指标，优
选提取溶剂。
2. 2. 1 水煎煮提取 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100 g，
水煎煮提取 2 次，每次加 10 倍量水，每次 2 h，合并
提取液，滤过，滤液浓缩至稠膏，真空干燥，称重，测
定根皮苷含量，按下式计算根皮苷提取量。
根皮苷提取量 =干膏量 ×根皮苷含量
2. 2. 2 乙醇回流提取 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100
g，加热回流提取 2 次，每次加 10 倍量 70%乙醇，每
次 2 h，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至稠膏，真
空干燥，称重，测定根皮苷含量，计算根皮苷提取量。
结果水煎煮和乙醇回流提取根皮苷的提取量分
别为 6. 42，7. 46 g，故选择乙醇为提取溶剂。
2. 3 提取方法的选择 用乙醇为提取溶剂，以根皮
苷的提取量为考察指标，比较冷浸法、渗漉法、回流
法、超声法等 4 种方法，优选出较佳提取方法。
2. 3. 1 冷浸法 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100 g，室温
浸渍 2 次，每次加 10 倍量 70%乙醇，每次 24 h，并时
时搅拌，合并浸提液，滤过，滤液减压回收乙醇浓缩
至稠膏，真空干燥，称重，测定根皮苷的含量，计算根
皮苷提取量。
2. 3. 2 渗漉法 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100 g，加入
适量 70%乙醇，浸渍 24 h后，以 1 ～ 3 mL·min －1的速
·51·
蒋珍藕，等:木姜叶柯总黄酮的提取工艺
度渗漉(共用 20 倍量 70%乙醇浸渍、渗漉)，收集渗
漉液，渗漉液减压回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥，
称重，测定根皮苷的含量，计算根皮苷提取量。
2. 3. 3 回流法 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100 g，加热
回流提取 2 次，每次加 10 倍量 70%乙醇，每次 2 h，
合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇浓缩至稠膏，
真空干燥，称重，测定根皮苷的含量，计算根皮苷提
取量。
2. 3. 4 超声处理法 取木姜叶柯嫩叶粗粉 100 g，
超声处理(功率 80 W，频率 50 kHz)2 次，每次加 10
倍量 70%乙醇，每次 1 h，合并提取液，滤过，滤液减
压回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥，称重，测定根皮
苷的含量，计算根皮苷提取量。
结果:以上 4 种提取方法根皮苷的提出量分别
为 6. 52，7. 20，7. 46，7. 57 g，超声法 >回流法 >渗漉
法 >冷浸法。超声法提取效果最好，但超声波设备
目前难以工业化，只适合实验室研究，而不适合大批
量的工业生产。回流法的提取效果在上述比较中仅
次于超声法，且所用设备也较简单，易开展较大规模
的工业生产，故综合考虑，选择回流提取法。
2. 4 乙醇回流提取工艺条件的优化
2. 4. 1 正交试验设计与因素水平选择 在材料
粉碎度以及所用溶剂一定条件下，溶剂的浓度、
回流时间、提取温度、提取次数以及溶媒量等因
素都会对提取产生影响，本试验选用乙醇为提取
溶剂，为了尽可能不破坏有效成分，回流提取温
度控制在 80 ～ 90 ℃，因此，选取乙醇体积分数、
乙醇用量、提取时间、提取次数作为考察因素，以
根皮苷的提取量为考察指标，按 L9(3
4)进行试
验。因素水平表见表 2。
表 2 乙醇回流提取工艺因素水平
水平
A乙醇体积
分数 /%
B乙醇用
量 /倍
C提取
时间 /h
D提取
次数 /次
1 60 8 1 1
2 70 10 2 2
3 80 12 3 3
2. 4. 2 试验方法 称取同一批木姜叶柯嫩叶粗粉
9 份，每份 100 g，按正交设计 L9(3
4)进行回流提取，
提取液回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥，称重，计算
干膏得率，测定根皮苷的含量，计算根皮苷提取量。
结果见表 3。
表 3 乙醇回流提取工艺 L9(34)正交试验结果
No. A B C D 根皮苷
提取量 / g
1 1 1 1 1 3. 56
2 1 2 2 2 5. 37
3 1 3 3 3 6. 49
4 2 1 2 3 7. 92
5 2 2 3 1 8. 05
6 2 3 1 2 6. 73
7 3 1 3 2 5. 86
8 3 2 1 3 7. 28
9 3 3 2 1 7. 31
K1 15. 42 17. 34 17. 57 18. 92
K2 22. 70 20. 70 20. 60 17. 96
K3 20. 45 20. 53 20. 40 21. 69
R 2. 43 1. 12 1. 01 1. 24
经直观比较分析正交试验结果，同时结合生产
实际，木姜叶柯总黄酮提取的最佳工艺条件为
A2B2C2D3，即木姜叶柯，加 10 倍量 70%乙醇回流提
取 3 次，每次 2 h。
2. 4. 3 验证试验 取同一批木姜叶柯嫩叶粗粉，称
取 100 g，共 3 份，按上述优选的最佳工艺条件进行
提取后，浓缩、干燥，测定根皮苷的含量。结果根皮
苷提取量分别为 7. 69，7. 61，7. 58 g，RSD 0. 74%。
表明按优选得到的工艺条件进行提取，根皮苷的含
量稳定，说明优选得到的工艺条件合理、稳定、可行。
3 讨论
该提取工艺简单，耗能低，在工艺过程中主要采
用乙醇提取，使原料中有害溶剂的残留量少，符合国
家对食品及药品的要求。
本研究对木姜叶柯总黄酮的提取工艺进行了比
较系统的研究，从提取溶剂、提取方法到提取工艺条
件都进行了优选，因此，该提取工艺是科学、合理、可
行的，可用于工业化生产。
［参考文献］
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志. 第
22 卷［M］.北京:科学出版社，1998，22:201.
［2］ 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草. 2卷［M］.
上海:上海科学技术出版社，1999:431.
［3］ Joel R L，Ehrenkranz，Norman G Lewis，et al. Phlorizin:a
review［J］. Diabetes Metab Res Rev，2005，21:31.
［责任编辑 仝燕］
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