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猫眼草不同药用部位总黄酮含量测定



全 文 :第 43 卷第 1 期
2014 年 1 月
应 用 化 工
Applied Chemical Industry
Vol. 43 No. 1
Jan. 2014
收稿日期:2013-07-31 修改稿日期:2013-10-17
基金项目:西安医学院大学生基金项目(12DXS03)
作者简介:杨黎彬(1973 -) ,男,甘肃秦安人,西安医学院副教授,博士,从事天然产物研究与开发。电话:1804957270,
E - mail:yangoyang@ sina. com
猫眼草不同药用部位总黄酮含量测定
杨黎彬,李康伟,刘少静,陈淋,刘萌,闫莉
(西安医学院 药学院,陕西 西安 710021)
摘 要:用 60%乙醇超声提取猫眼草根、茎、叶不同部位中的总黄酮,并以芦丁为对照品,用紫外分光光度计在
510 nm 处测定不同药用部位中总黄酮的含量。结果表明,芦丁标准溶液浓度在 12. 5 ~ 50 μg /mL 与吸光度呈良好
的线性关系,线性回归方程为 Y = 0. 011 5X - 0. 023 5,r = 0. 999 4(n = 5) ,全草的平均回收率为 99. 60%,RSD 为
1. 60%。测得猫眼草根、茎、叶中黄酮含量分别为 20. 30,16. 32,23. 53 mg /g,叶中的总黄酮含量比根、茎含量高。
关键词:猫眼草;总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号:TQ 461;R 284. 2;R 932 文献标识码:A 文章编号:1671 - 3206(2014)01 - 0187 - 02
Determination of total flavonoids in different sections of
Enphorbia lunulata Bge. by UV spectrophotometry
YANG Li-bin,LI Kang-wei,LIU Shao-jing,CHEN Lin,LIU Meng,YAN Li
(Pharmaceutical Institute,Xi’an Medical University,Xi’an 710021,China)
Abstract:Extracting the total flavonoids in different sections of Enphorbia lunulata Bge. by refluxing with
ultrasonic-assisted 60% ethanol and using rutin as the reference substance,the total flavonoids in Enphor-
bia lunulata Bge. were determined by UV absorption at 510 nm. The results showed that the linearity of
rutin was obtained within the range of 12. 5 ~ 50. 0 μg /mL(Y = 0. 011 5X - 0. 023 5,r = 0. 999 4) (n =
5) ,the average recovery rate was 99. 60% and RSD was 1. 60%(n = 9). The content of total flavonoids
in Enphorbia lunulata Bge. from root was 20. 30 mg /g,branch was 16. 32 mg /g and leaf was
23. 53 mg /g. The content of total flavonoids in Enphorbia lunulata Bge. from leaf was higher than root
and branch individual.
Key words:Enphorbia lunulata Bge.;total flavonoids;UV spectrophotomety
猫眼草(Enphorbia lunulata Bge)别名猫儿眼,
是大戟科(Euphorbiaceae)多年生草本植物。生于山
坡、荒野、田边及河岸向阳处。据中药大典记载,全
草含有黄酮类成分,临床证明对止咳祛痰有效,已鉴
定的有山柰酚、槲皮素、山柰酚-3-单-L-鼠李糖甙及
槲皮素-3-单-L鼠李糖甙等 4 种。种子中含有七叶
内酯及猫眼草素,这两种成分有体外抑菌作用。临
床研究表明,猫眼草的黄酮类化合物可用于预防和
治疗肿瘤、骨质疏松、衰老、心脑血管疾病,另外还可
用于抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、抗微生物、抗辐射
等[1-5]。
黄酮类化合物广泛分布于植物界中,药理活性
多种多样,引起了国内外的广泛关注。葛根、沙棘、
大豆、芦丁中黄酮提取研究较多[6-9],猫眼草中黄酮
类成分相关研究较少,特别是不同部位的总黄酮含
量研究还未有报道。本研究通过对猫眼草不同药用
部位的总黄酮含量进行测定,表明叶中总黄酮含量
最高,根次之,茎中含量最低。
1 实验部分
1. 1 试剂与仪器
猫眼草采于西安市北三环辛王路 1 号公路边,
经西安医学院药学院生药教研室汪兴军老师鉴定为
大戟科猫眼草 Enphorbia lunulata Bge.的全草;标准
品芦丁(中国药品生物制品检定所,批号:100080-
200707) ;亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇均为分
析纯;所用水为蒸馏水。
FA1004B 型电子天平;KQ5200B 型超声波清洗
器;UV-160A紫外分光光度计。
1. 2 溶液配制
1. 2. 1 供试品溶液的制备 将猫眼草全草于 50 ℃
烘干。把其根部、茎部和叶分开,分别粉碎,过 20 目
筛精密称取粉末 0. 2 g,置于 100 mL带塞锥形瓶中,
加入 100 mL 60%乙醇,浸泡 2 h。于 75 ℃水浴超声
DOI:10.16581/j.cnki.issn1671-3206.2014.01.040
应用化工 第 43 卷
1 h,趁热过滤,冷却后用 60%乙醇定容到 100 mL容
量瓶,置于 4 ℃冰箱保存备用。
1. 2. 2 对照品溶液的配制 精密称取芦丁对照品
5. 0 mg,在 100 ℃常压干燥至恒重,置于 50 mL容量
瓶中,加 60%乙醇超声溶解,放冷,加乙醇定容,得
芦丁对照品溶液 100 μg /mL。
1. 3 标准曲线绘制[6]
精密量取 0. 0,1. 25,2. 0,3. 0,4. 0,5. 0 mL对照
品溶液置于 10 mL 容量瓶中,分别加入 5%亚硝酸
钠 0. 3 mL摇匀,放置 6 min。精密加入 10%硝酸铝
0. 3 mL,摇匀,放置 6 min,加入 1% 的氢氧化钠
4 mL,用 60%乙醇添加至刻度,放置 15 min。以第
一管(无芦丁对照品)作为空白对照,在 510 nm 处
测定吸光度。以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘
制标准曲线,得线性回归方程 Y = 0. 011 5 X -
0. 023 5,r = 0. 999 4(n = 5) ,表明芦丁质量浓度在
12. 5 ~ 50. 0 μg /mL 范围内与吸光度呈良好的线性
关系。
2 结果与讨论
2. 1 精密度
精密量取对照品溶液(100 μg /mL)3 mL,置于
10 mL 量瓶中,按照 1. 3 节方法操作。显色后测定
吸收度,连续测定 5 次,结果见表 1。
表 1 精密度实验结果
Table 1 Results of the accurate tests
吸光度
1 2 3 4 5
平均值 RSD /%
0. 425 0. 421 0. 420 0. 418 0. 423 0. 421 0. 641
由表 1 可知,RSD值为 0. 641%,表明精密度良
好。
2. 2 稳定性
精密量取对照品溶液(100 μg /mL)3. 0 mL,置
于 10 mL 量瓶中,按照 1. 3 节方法操作,显色后在
30 min内每隔 6 min测定一次吸收度,结果见表 2。
表 2 稳定性实验结果
Table 2 The results of the stability tests
时间 /min 吸光度 平均值 RSD /%
0 0. 424
6 0. 421
12 0. 423 0. 423 0. 441
18 0. 425
24 0. 420
30 0. 423
由表 2 可知,RSD值为 0. 441%(n = 6) ,表明显
色后的溶液在 30 min内稳定。
2. 3 重现性
精密称取猫眼草全草粉末 5 份,每份 0. 2 g,制
备供试品溶液,显色后测定吸光度,计算总黄酮含
量,结果见表 3。
表 3 重现性实验结果
Table 3 Results of reproducibility experiments
总黄酮含量 /(mg·g - 1)
1 2 3 4 5
平均含量 /
(mg·g - 1)
RSD /%
18. 75 18. 70 18. 63 18. 87 19. 08 18. 81 0. 94
由表 3 可知,RSD 为 0. 94%(n = 5) ,表明该方
法重现性良好。
2. 4 加样回收率
精密称取已知总黄酮含量的猫眼草粉末 5 份,
每份约 0. 1 g,加入芦丁对照品适量,制备供试品溶
液,按照 1. 3 节方法显色,测定吸光度,计算加样回
收率,结果见表 4。
表 4 加样回收率
Table 4 Results of the recoveries
编号
原有量
/mg
加入量
/mg
测得总黄
酮含量 /mg
回收
率 /%
平均回
收率 /%
RSD /%
1 1. 881 1. 881 3. 827 101. 73
2 1. 898 1. 881 3. 735 98. 84
3 1. 898 1. 881 3. 811 100. 85 99. 60 1. 60
4 1. 862 1. 881 3. 678 98. 26
5 1. 918 1. 881 3. 735 98. 31
由表 4 可知,加样回收率为 99. 60%,RSD 为
1. 60%(n = 5)。
2. 5 样品不同药用部位含量测定
精密称取猫眼草不同药用部位粉末各 3 份,每
份约 0. 2 g,制备供试品溶液,按照 1. 3 节方法显色
后测定吸光度,计算样品中总黄酮含量(n = 3) ,结
果见表 5。
总黄酮含量(mg /g)=(C × V)/M
式中 C———供试品溶液中总黄酮浓度,mg /mL;
V———供试品溶液的定容体积,mL;
M———样品质量,g。
表 5 猫眼草不同药用部位总黄酮含量
Table 5 The total flavonoids in different sections in
Enphorbia lunulata Bge.
部位
含量 /(mg·g - 1)
1 2 3
平均含量
/(mg·g - 1)
RSD /%
根 20. 15 20. 32 20. 42 20. 30 0. 67
茎 16. 31 16. 50 16. 16 16. 32 1. 04
叶 23. 32 23. 70 23. 58 23. 53 0. 83
由表 5 可知,在猫眼草不同药用部位中,总黄酮
含量由高到低依次为:叶 >根 >茎。
3 结论
猫眼草根、茎、叶用 60%乙醇超声提取,用紫外
分光光度计在 510 nm处测定提取液中的总黄酮含量。
(下转第 191 页)
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第 1 期 赵芯等:飞机清洗剂清洗效率试验及影响因素分析
3 结论
(1)飞机清洗剂的清洗效率十分重要。清洗效
率过低,不能洗净污渍;清洗效率过高,极有可能伴
随一定程度的飞机材料腐蚀。清洗效率试验时引入
参照板,可以帮助我们一定程度的判断清洗剂是否
对材料造成腐蚀。只有选择清洗效率适当的飞机清
洗剂,才能满足飞机的日常维护需求和适航要求。
(2)飞机材料的表面粗糙度及种类等对清洗效
率有较大影响。因此,进行飞机清洗剂清洗效率测
试时,应考虑清洗剂所使用在飞机哪个部位、该部位
的材料以及材料的表面粗糙度、可能染上的油污种
类等实际情况,这样才能使试验结果更加真实可靠。
(3)飞机清洗剂清洗效率测试时,清洗时间的
掌控很重要,时间不够,使得评估结果变严;时间过
长,容易使得清洗效率不好的清洗剂有机可乘。用
上面的超声清洗方法进行试验,合理时间为 2 min
左右。
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(上接第 188 页)
测得根、茎、叶黄酮含量分别为 20. 30,16. 32,
23. 53 mg /g。表明猫眼草叶中总黄酮含量最高,根
次之,茎含量最低。
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