全 文 ：山东科学
SHANDONG SCIENCE
第 26 卷 第 4 期 2013 年 8 月出版
Vol． 26 No． 4 Aug． 2013
收稿日期:2013-03-12
基金项目:辽宁省普通高等教育本科教学改革研究项目(201203041-4)
作者简介:刘晓霞(1991 －) ，女，本科在读，研究方向为植物组织培养。
* 通讯作者，姜长阳(1953 －) ，男，教授，研究方向为植物技术。Email:changyangjiang@ 126. com。
DOI:10． 3976 / j． issn． 1002 － 4026． 2013． 04． 007
山苦菜试管苗微型根茎繁殖的研究
刘晓霞，刘帅，杨萌萌，杨文新，姜长阳*
( 辽宁师范大学 生命科学学院，辽宁 大连 116081)
摘要:为满足栽培和种质保护的需求，以山苦菜的微型根茎为材料，采用试管苗培养的方法，进行了微型根茎的瓶内培
养、苗床扦插和移植等研究。结果表明，以颗粒状炉灰渣为培养基的支持物，使用 1 /4MS + IAA 0. 2 mg·L －1 + 蔗糖
20 g·L －1作为培养基对试管苗进行微型根茎瓶内繁殖最佳; 具有 2个生长点的微型根茎段，在以炉灰渣为基质的温室苗
床上进行扦插繁殖，是理想的繁殖方法。微型根茎试管苗移植的成活率为 98. 6%。移植成活的微型根茎试管苗保持了
山苦菜的植物学性状。
关键词:山苦菜;试管苗;微型根茎
中图分类号:Q943. 1 文献标识码:A 文章编号:1002-4026(2013)04-0028-04
Miniature rhizome reproduction of tube seedlings of Ixeris chinensis
LIU Xiao-xia，LIU Shuai，YANG Meng-meng，YANG Wen-xin，JIANG Chang-yang*
(School of Life Sciences，Liaoning Normal University，Dalian 116081，China)
Abstract ∶ We performed miniature rhizome culture in a bottle，miniature rootstock cutting of seedbed and tube seedling
transplanting of miniature rootstock with the method of tube culture and micro rootstocks of Ixeris chinensis as materials to
satisfy the requirements of planting and seed quality preservation． Ｒesults show that 1 /4MS + IAA0． 2 mg·L － 1 + sucrose
20 g·L － 1 with cinder as a support is the best medium for bottle reproduction of tube seedlings． Cutting of micro rootstock
with 2 growing points on the seedbed with cinder as matrix is an ideal reproduction method． The transplanting survival rate
of the tube seedlings of micro rhizome is 98． 6%． The survival tube seedlings preserve all botany characteristics of wild
Ixeris chinensis．
Key words ∶ Ixeris chinensis;tube seedlings;micro rootstock
山苦菜(Ixeris chinensis)为菊科苦荬菜属多年生草本植物［1 － 2］，因具有重要的食用和药用价值，一直受到
人们的高度青睐。尽管山苦菜是一种分布较为广泛、数量较多的植物，但由于人们长期大量的采挖食用，在
很多地区已成为濒危植物。为了保护山苦菜的野生资源，满足人们的需求，张卓等［3］对其进行了组织培养
及高效再生体系建立的研究，已建立起山苦菜的无性系［4］，并且所繁殖的试管苗容易移栽、移植成活。在研
究中，张卓等发现在山苦菜的试管苗培养中，经过 50 d的培养，试管苗在瓶内就可以形成根茎，但是，根茎及
根茎上不定芽长势较弱，并且没有进行山苦菜根茎繁殖和扦插的研究。在野生的条件下，山苦菜主要是以根
和根茎进行繁殖的［5］。为此，本文对山苦菜试管苗的微型根茎繁殖进行了研究，以期获得用根茎繁殖的大
第 4 期 刘晓霞，等:山苦菜试管苗微型根茎繁殖的研究
量生长旺盛的试管苗，满足人们栽培和保护这种野生植物资源的需要。
1 材料与方法
1. 1 材料
5 月上旬，在旅顺菜大岭山坡采集生长旺盛的山苦菜，根据张卓［3］的方法，在 MS + BA 0. 5 mg /L + IBA
0. 5 mg /L + KT 0. 5 mg /L培养基上培养出再生芽，之后在 1 /4MS + IAA 0. 2 mg·L －1 +蔗糖 20 g·L －1培养
基上培养 70 d左右，从试管苗根部可诱导出 5 ～ 9 cm的微型根茎。把这种微型根茎的试管苗作为本研究的
试验材料。
1. 2 培养条件
培养条件:培养温度 21 ℃、光照强度为 2 000 Lx，其余与张卓等的研究相同［3］。
1. 3 试验方法
1. 3. 1 不同培养基支持物对微型根茎培养的影响
把在 1 /4MS + IAA 0. 2 mg·L －1 +蔗糖 20 g·L －1培养基上扩增培养的微型根茎切成具有 2 个生长点的
茎段后，接种到以琼脂(胨力强度为 240 g /cm2，以下简称琼脂)、颗粒状炉灰渣(经过反复洗涤，颗粒为
0. 1 ～ 0. 2 cm的炉灰渣，以下简称炉灰渣)和河沙(经过反复洗涤的河沙，以下简称河沙)3 种材料为固体培养
基支持物的 1 /4MS + IAA0. 2 mg·L －1 +蔗糖 20 g·L －1的培养基上，进行培养基的不同支持物对瓶内微型根
茎生根继代扩增培养的影响试验。每次重复试验继代培养 4 代，重复 3 次，每种培养基接种培养 200 个微型
根茎段。
1. 3. 2 不同基质、不同生长点数的微型根茎段对扦插试管苗和增殖倍数的影响
把在以炉灰渣为支持物、在 1 /4MS + IAA 0. 2 mg·L －1 +蔗糖 20 g·L －1培养基上培养的试管苗的微型
根茎分别切成，无生长点、具有 1 个生长点、具有 2 个生长点和具有 3 个生长点的 4 种不同微型根茎段后，直
接扦插到上层为肥沃园土、干净河沙和颗粒状炉灰渣 3 种不同基质中，进行不同基质、不同生长点数的微型
根茎段对扦插成活率和增殖倍数的影响试验。试验前 10 d保持温度 15 ℃以上、无直射光照、湿度 85%左右
的环境条件。试验重复 2 次，每种基质扦插 150 个微型根茎段。
1. 3. 3 微型根茎扦插苗的移植
把在以炉灰渣为苗床扦插基质扦插成活的微型根茎段试管苗，于 5 月上旬移植到旅顺菜大岭的山坡上。
移植后使其在野生环境生长，进行观察统计。移植 2 次，共移植 420 株。
2 结果及分析
2. 1 不同培养基支持物对微型根茎培养的影响
培养到 50 d时观察统计，第一次试验继代培养 4 代的平均结果见表 1。在液体培养基上试管苗不能生
长，不能形成根茎。在以河沙和琼脂为培养基支持物的培养基上，试管苗的长势较弱，微型根茎平均长度较
短。而以炉灰渣为培养基支持物的培养基上，试管苗长势旺盛、微型根茎长、繁殖系数大。观察表明，在以炉
灰渣为支持物的培养基上，培养到 20 d时可见试管苗根部开始生长根茎。随后，根茎迅速生长，培养到 50 d
时，平均每株试管苗可以生长出长 8. 6 cm 、具有 11. 4 个生长点的根茎，且根茎的生长点已经开始发芽、外观
上生长旺盛。统计分析显示，在这种培养基上，以具有 2 个生长点的微型根茎段为材料，每个培养周期
(50 d)的繁殖系数为 5. 1。据以这种繁殖速度计算，以 1 株试管苗的微型根茎段为材料进行繁殖，1 年至少
能繁殖出 10 万株试管苗。这种繁殖速度可以满足人们对山苦菜种苗的种质保存和栽培的大量需求。结果
证明，采用颗粒状炉灰渣为培养基支持物的 1 /4MS + IAA0. 2 mg·L －1 +蔗糖 20 g·L －1培养基是山苦菜试管
苗微型根茎瓶内繁殖的理想培养基。
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山 东 科 学 2013 年
表 1 不同培养基支持物对微型根茎培养的影响
Table 1 Impacts of different medium supports on cultivation of miniature roots
培养基支持物
培养茎
段数
试管苗
生长率 /%
试管苗
长势
微型根茎平
均长度 / cm
微型根茎继代扩增
培养的平均繁殖系数
琼脂 800 99. 4 + 2. 9 2. 1
炉灰渣 800 99. 8 + + 8. 6 5. 1
河沙 800 99. 0 + 4. 6 3. 3
注:+代表长势较弱;+ +代表长势旺盛。
2. 2 不同基质、不同生长点数的微型根茎对扦插试管苗和增殖倍数的影响
扦插后 12 d，可见大部分根茎段上部发出新芽。表 2 显示了扦插后 30 d 的统计观察结果:从不同扦插
基质看，以炉灰渣为基质的成活率最高，且在这种基质以上具有 2 个和 3 个生长点的微型根茎段为扦插材料
成活的试管苗长势旺盛;从增殖倍数看，以具有 3 个生长点的微型根茎段为材料的增殖倍数最小，具有 2 个
生长点微型根茎段次之，而具有 1 个生长点的微型根茎段最大。综合成活率、试管苗长势和增殖倍数 3 个方
面看，以具有 2 个生长点的根茎段为材料的效果最好。以具有 2 个生长点的试管苗微型根茎段为材料进行
扦插，平均增殖速度为 3. 8，这种增殖倍数比试管苗移栽提高 2. 8 倍。结果证明，采用具有 2 个生长点的微
型根茎段为材料、在炉灰渣为基质的温室苗床上对山苦菜的试管苗微型根茎进行扦插繁殖，是适宜的繁殖方
法。
表 2 不同基质、不同生长点数的微型根茎对扦插试管苗和增殖速度的影响
Table 2 Impacts of different matrix and different quantity growth points of miniature roots
on cottage test-tube plantlet and reproduction speed
扦插基质
微型根茎段
生长点个数
培养茎段数 成活段数 试管苗形成率 /% 试管苗长势
每株试管苗的微型
根茎平均繁殖倍数
肥沃园土 0 150 0 0 － 0
肥沃园土 1 150 12 8 + 5. 8
肥沃园土 2 150 59 39 + 3. 8
肥沃园土 3 150 63 42 + 1. 9
炉灰渣 0 150 0 0 － 0
炉灰渣 1 150 118 79 + 5. 8
炉灰渣 2 150 148 98. 7 + + 3. 9
炉灰渣 3 150 148 98. 7 + + 2. 1
河沙 0 150 0 0 － 0
河沙 1 150 78 52 + 5. 7
河沙 2 150 126 84 + 3. 8
河沙 3 150 120 80 + + 2. 0
注:－代表不生长;+代表长势一般;+ +代表长势较好。
2. 3 微型根茎扦插苗的移植
移植后 50 d统计显示，共成活 414 株，成活率为 98. 6%。观察表明，移植的微型根茎试管苗不仅生长旺
盛、当年开花结果，而且保持了山苦菜的植物学性状。
3 讨论
本研究所获得的山苦菜微型根茎试管苗保持了山苦菜的植物学性状，说明采用微型根茎的方法繁殖的
山苦菜试管苗，可以作为种质保存的材料，并且这种繁殖方法在进行瓶内繁殖时，1 株试管苗的微型根茎 1
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第 4 期 刘晓霞，等:山苦菜试管苗微型根茎繁殖的研究
年能繁殖 10 万多株试管苗，而采用具有 2 个生长点的微型根茎段进行苗床扦插，繁殖的速度又比试管苗移
栽提高了 2. 8 倍。这证明通过本研究的试管内微型根茎繁殖和苗床微型根茎扦插 2 条繁殖途径，1 株山苦
菜试管苗微型根茎 1 年能繁殖出近 30 万株试管苗。这种繁殖速度能满足栽培对种苗的大量需要。
在微型根茎试管苗瓶内繁殖试验中，以颗粒状炉灰渣为培养基的支持物取得了较理想的效果。这与颗
粒状炉灰渣本身的特点有关。首先，炉灰渣能吸附培养中产生的有害代谢产物，保证了根部进行正常的生命
活动;其次，炉灰渣为黑色，吸热性好，能使试管苗根茎处于较高的温度中，促进了根系的萌发和生长。此外，
炉灰渣颗粒具有很多微小空隙，有利于空气的流动与储存，能满足根部的生命活动对氧气的需求，也有利于
促进根系的生长发育。
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( 上接第 27 页)
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