全 文 ：作者简介:邸立杰 , 大学本科 , 副主任中药师;Tel:(0335) 3828700;E-mai l:qhdyjszy s@163.com
祖师麻药材鉴别及祖师麻甲素含量的测定
邸立杰 , 王晓云 (河北省秦皇岛市药品检验所 , 秦皇岛　066004)
摘要:　建立祖师麻的 T LC 鉴别及祖师麻甲素的含量测定方法 。采用 T LC法鉴别祖师麻 , 斑点清晰 , 分
离度好 , 专属性强。采用 HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素的含量 , 色谱柱为 shimpack VP -ODS , 流
动相为甲醇-0.5%醋酸 (35∶65), 检测波长为 327 nm , 流速为 1.0 mL·min-1 , 祖师麻甲素在 12.23 ～
110.07μg ·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系 (r=0.9999), 平均回收率为 98.86%, RSD为 1.2% (n
=9)。建立的方法能有效地控制祖师麻的质量。
关键词:　祖师麻;薄层色谱;高效液相色谱;祖师麻甲素
中图分类号:R927.2　　文献标识码:A　　文章编号:1002-7777 (2008)01-0043-03
Study on TLC Identification and Determination of Zu Shima
Di Lijie and Wang Xiaoyun (Hebei Provincial Qin Huangdao Institute fo r Drug Control , Qin Hangdao
066004)
ABSTRACT　A method o f TLC ident ification and dete rminat ion of Zu Shima w as established.Zu Shima
w as identif ied by T LC.The content o f daphnet in w as determined by HPLC.The studies show ed that spot
of naringo side on T LC could be w ell separated , the calibration curve of daphnet in w as linear the rang of
12.23 ～ 110.07μg ·mL-1 (r=0.9999), and the average recovery w as 98.86%(RSD=1.2%, n=9).
The method is simple and accurate w ith a st rong speci fici ty.The method can be used fo r the quality cont ro l
of Zu Shima.
KEYWORDS　Zu Shima;T LC;HPLC;daphnet in
　　祖师麻为瑞香科植物黄瑞香 Daphne giraldi i
Nitsche 的干燥茎皮及根皮 , 具有祛风通络 , 活血
止痛的功能 , 用于风湿痹痛 , 头痛胃痛等症 , 主含
香豆素类成分[ 1] 。祖师麻为非常用中药材 , 但制成
中成药后应用较广泛 , 如祖师麻片[ 2] 、祖师麻关节
止痛膏[ 3] 、 祖师麻膏药[ 3] 、 祖师麻注射液[ 4] 等 , 该
药材收载于地方药材标准[ 5] , 原标准中鉴别方法无
定量指标 , 为更好地控制祖师麻药材质量 , 本文以
祖师麻甲素为对照品以祖师麻为对照药材对祖师麻
进行 TLC 定性鉴别 , 所得色谱图斑点清晰 , 分离
度好 , 专属性强;采用 HPLC 法对所含祖师麻甲
素进行定量测定 , 完善了祖师麻药材标准。
1　仪器与试剂
LC-2010A高效液相色谱仪 (日本岛津 , 紫
外检测 , so lution 色谱数据工作站);祖师麻甲素
对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号:0900-
200001 供含量测定用);祖师麻对照药材 (中国药
品生物制品检定所 , 批号:1234-0301);硅胶 G
(青岛海洋化工有限公司 , 批号:060317);甲醇为
色谱纯 , 其它试剂为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　薄层色谱鉴别
2.1.1　供试品溶液的制备
取本品 2 g , 加甲醇 25 mL , 超声处理(功率:
220w ,频率:50kHz)20 分钟 , 滤过 , 滤液挥发至
干 , 残渣加甲醇 3 mL 使溶解 , 作为供试品溶液 。
2.1.2　对照药材 、对照品溶液的制备
取祖师麻对照药材 2 g , 同 2.1.1 制成对照药
材溶液 。再取祖师麻甲素对照品适量 , 加甲醇制成
每 1 mL 含 1 mg 的溶液 , 作为对照品溶液。
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DOI :10.16153/j.1002-7777.2008.01.004
2.1.3　薄层层析
照薄层色谱法试验[ 6] , 吸取上述 3 种溶液各
5μL , 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 , 以三氯甲烷
-醋酸乙酯-甲酸-乙醚(10∶1∶1∶3)为展开剂 ,
展开 ,取出 ,晾干 ,置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。
2.1.4　结果
供试品色谱中 , 在与对照药材色谱相应的位置
上 , 显相同颜色的斑点;在与对照品色谱相应的位
置上 ,显相同的一个黄色斑点 ,见图 1 。
1.对照品;2.对照药材;3.样品。
图 1　祖师麻 TLC 色谱图
2.2　祖师麻甲素含量测定
2.2.1　色谱条件
色谱柱为 shimpack VP -ODS (4.6mm ×
250mm , 5μm);流动相为甲醇-0.5%醋酸 (35∶
65);检测波长为 327 nm;流速为 1.0 mL ·min-1 ;
柱温为 30℃;理论板数按祖师麻甲素计算应不低
于 3000;进样量为 10μL。
2.2.2　对照品溶液制备
精密称取五氧化二磷干燥器中干燥 14小时的
祖师麻甲素对照品适量 , 加甲醇制成每 1 mL 含
60μg 的溶液 , 即得 。
2.2.3　供试品溶液的制备
取本品粉末 (过三号筛)1 g (同时另取本品
测定水分), 精密称定 , 置具塞的锥形瓶中 , 精密
加入 85%甲醇 50 mL , 密塞 , 称定重量 , 超声处
理 (功率:220w , 频率:50kHz)30 分钟 , 放冷 ,
用 85%甲醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤过 , 取续
滤液 , 用 0.45μm 的微孔滤膜滤过 , 即得 。
2.2.4　线性关系考察
精密称取祖师麻甲素对照品 (五氧化二磷干燥
器中干燥 14 小时)12.23 mg , 置 100 mL 容量瓶
中 , 加 85%甲醇溶解定容 。量取 1.0 , 3.0 , 5.0 ,
7.0 , 9.0 mL , 分别置 10 mL 量瓶中 , 加 85%甲
醇稀释至刻度 , 照 2.2.1项下方法测定 , 以峰面积
为纵坐标 , 浓度 (μg ·mL-1)为横坐标作线性回
归 , 回归方程为:
Y =3.43725×104 X +2.11991×104 　r=0.9999
结果表明 , 祖师麻甲素在 12.23 ～ 110.07μg ·mL-1
范围内呈良好的线性关系。
2.2.5　精密度试验
取祖师麻甲素对照品溶液 (61.15μg · mL-1)
10μL 连续进样 5 次 , 测得峰面积平均值为
2181447 , RSD为 0.8%。
2.2.6　重复性试验
取同一份样品 , 共 5 份 , 按含量测定方法测
定 , 祖师麻甲素含量平均值为 0.174%, RSD 为
1.0%, 表明重复性好 。
2.2.7　稳定性试验
取同一份样品溶液 , 分别在 0 , 4 , 8 , 12 , 16
小时测定祖师麻甲素的含量平均值为 0.364%,
RSD为 2.0%。结果表明 , 在 16小时内样品稳定
性好。
2.2.8　回收率试验
精密称取已知含量(0.364%)的祖师麻粉末(过
3号筛)0.5 g , 共 9份 , 分别精密加入相当于样品
含量 80%, 100%, 120%的祖师麻甲素对照品 ,依
法提取测定 ,计算 ,结果见表 1 。
表 1　回收率测定结果
样品含量
(mg)
加入量
(m g)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1.766 1.373 3.117 98.40
1.787 1.373 3.156 99.71
1.751 1.373 3.104 98.54
1.824 1.854 3.657 98.87
1.852 1.854 3.663 97.68 98.86 1.2
1.855 1.854 3.691 99.03
1.874 2.334 4.147 97.39
1.986 2.334 4.337 101.5
1.918 2.334 4.220 98.63
2.2.9　样品测定
测样品 5批 , 含祖师麻甲素按干燥品计算结果
见表 2 , 色谱图见图 2 。
表 2　样品测定结果 (n=4)
样品 含水量(%) 祖师麻甲素含量(%) RSD(%)
1 10.27 0.407 2.4
2 12.02 0.118 0.9
3 11.59 0.176 2.2
4 10.59 0.465 2.3
5 9.87 0.194 0.7
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a.对照品;b.样品;1.祖师麻甲素。
图 2　祖师麻 H PLC 色谱图
3　讨论
3.1　展开系统的选择
薄层色谱实验比较了 3种展开系统:三氯甲烷
-醋酸乙酯-甲酸-乙醚(10∶1∶1∶3)、甲苯-醋
酸乙酯-醋酸(5∶4∶1)、甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5
∶4∶1);两种显色方法:在氨蒸气中熏至斑点显
色清晰 、 喷以三氯化铁试液。结果 , 采用三氯甲烷
-醋酸乙酯-甲酸-乙醚 (10∶1∶1∶3)为展开
剂 , 显色方法为置氨蒸气中熏至斑点显色清晰 , 所
得色谱图分离效果好 , 斑点清晰 , 重现性好 。
3.2　检测波长的选择
取对照品溶液 , 用 UV -2450型紫外分光光
度计在 200 ～ 400nm 波长范围内扫描 , 祖师麻甲素
在 327nm 、 262nm 波长处有最大吸收 , 在 327nm
波长处吸收度较大 , 故采用 327nm 为检测波长 。
3.3　提取方法考察
取同一份样品 , 分别用甲醇 、 85%甲醇超声处
理 20 、 30 、 40 min , 提取测定 , 结果见表 3。结果
表明:采用超声处理 30分钟 , 85%甲醇提取较为
适宜。
表 3　提取方法的比较
超声处理(min) 含量(%)
85%甲醇 甲醇
20 0.388 0.329
30 0.403 0.343
40 0.381 0.355
3.4　不同样品的含量比较
测定的 5批样品中 ,含量存在着明显差异 ,含量
高的样品皮较粗 、厚 ,含量低的样品为幼苗的根 、茎
皮 ,对同一批样品中根与茎中祖师麻甲素的含量进
行测定 ,结果茎皮的含量高于根皮的含量 。为保证
中成药的质量 ,应把好药材关 ,完善药材标准。
参考文献:
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235.
[ 5] 宁夏中药材标准 [ S] .1993:131.
[ 6] 中国药典 [ S] .一部 , 2005:附录 Ⅵ B.
(上接第 35页)
4.2　应重视面向全系统的药品检验工作相关基础
数据库的建设
对一些与检验工作相关的基础数据 , 国家药监
局应协调各相关单位实现资源共享 , 包括药典的电
子化:将国家药典和相关的标准电子化;检验流程
与检验方法的规范化:将药典中的检验方法整理成
检验方法库 。完善药品品种信息库:包含药品名
称 、 规格 、包装规格 、生产厂家 、 批准文号 、执行
标准 , 以及企业基本信息库 , 医院制剂品种库等 。
4.3　建立统一的药品抽验管理平台
为提高药品检验工作效率 , 国家药监局应建立
面向全系统的药品统一抽验管理平台 , 随时可查看
药品抽验和发现假劣药品的各种信息 , 及时掌握全
国范围内不合格药品动态 , 避免重复抽验 , 以节省
药品检验资源 , 提高针对性 , 增强时效性 。
参考文献:
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