全 文 :2010年 第 28卷 第 4期
2010 Vol.28 No.4
新疆中医药
Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine
莴苣子汉语别名莴子、苣胜子、白苣子,维吾尔
语名称莴荀乌拉盖,为菊科(Compositae)植物莴苣
(Lactuca sativa L.)的干燥成熟瘦果[1- 6]。莴苣全国各
地均有栽培,它有许多栽培品种,但在分类学上都
*基金项目:新疆植物资源化学实验室择优支持项目(No.2009-03)。
作者简介:徐芳(1973-),女,副研究员,主要从事中药民族药新药研究与开发。
*通讯作用:阿吉艾克拜尔·艾萨(1965-),男,研究员,主要从事天然产物的研究工作。通讯方式:13899892388。
维吾尔药莴苣子中总黄酮含量的测定
徐 芳1, 谭 为1, 刘君琳1, 陈 燕1, 赵 军1, 阿吉艾克拜尔·艾萨2*
(1.自治区药物研究所维吾尔药重点实验室, 新疆 乌鲁木齐 830004;
2.中国科学院新疆理化技术研究所, 新疆 乌鲁木齐 830011)
摘 要 目的:建立维吾尔药莴苣子中总黄酮含量的测定方法。方法:以芦丁为对照品,以亚硝酸钠—硝酸
铝—氢氧化钠体系为显色剂,采用比色法测定总黄酮。结果:在0.2~1.2mg范围内线性关系良好(r=0.999 6);平均回
收率为103.3%,相对标准偏差(RSD)为0.7%(n=9)。结论:该方法简便、稳定、可靠,可作为莴苣子中总黄酮的含量测
定方法。
关键词 莴苣子;总黄酮;芦丁;含量测定
民 族
医 药
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5 讨论
混合痔术后疼痛一个重要原因是肛门部神经
分布密集,内括约肌具有消化道环肌层的固有特
性,即易痉挛,一般的有害刺激如药物灌肠、肛隐窝
炎、痔核以及直肠炎等易影响此暴露的部分,引起
内括约肌痉挛[2]。痔手术切口作为较大的伤害性刺
激,较易伴发内括约肌痉挛,产生难以忍受的躯体
复合内脏疼痛。
痔术后水肿原因较多,一般考虑有以下原因:
(1)缝合张力较大,如皮肤切除过多,保留皮桥宽度
小,缝合时切口张力势必较大,导致肛门部皮肤与
皮下组织受牵拉压迫,影响淋巴与静脉回流,而形
成水肿。(2)痔组织特别是曲张静脉组织及血栓剥
离不彻底,由于残留的痔组织内静脉与淋巴网被破
坏,静脉与淋巴回流障碍,引起水肿。这种情况多发
生于被保留的皮桥处及内痔结扎而外痔不作处理
时的外痔处。(3)切口引流差,多发生于切口过短的
病例。由于手术中未考虑到麻醉时肛管松弛向外下
移位等因素而导致切口过于短小,以致术后切口全
缩在肛皮线上方,因肛管呈收缩状态,创面引流不
畅,形成水肿。(4)内括约肌痉挛,术前内括约肌痉
挛或肛管压力较大,术中不作处理,术后内括约肌
痉挛或肛管压力较大继续存在,由于“钮扣孔”作用
导致直肠下静脉与肛门静脉回流障碍,引起水肿。
本术式通过术后适当扩肛,可部分解决内括约肌痉
挛,减少创面的的张力,将手术中对局部淋巴及静
脉回流的影响减到最小,使切口的引流通过适当扩
肛,达到引流通畅,将术后的局部水肿、疼痛减少。
方中红花活血通经,散瘀止痛,用予跌扑损伤,疮疡
肿痛;黄柏清热燥湿,解毒疗疮,泻火,用于湿热疮
疡肿毒;马齿苋清热解毒,凉血止血,用于热毒痈肿
疔疮、丹毒等外科疾患;苦参清热燥湿,用于阴肿阴
痒;芒硝清火消肿,用于外治痔疮肿痛。全方清热利
湿、消肿止痛,对于局部水肿所致疼痛疗效确切,加
之术中适当扩肛,使缝合张力减小,内括约肌痉挛
缓解,共同起到消肿止痛,减少患者痛苦的作用。
6 结论
本临床研究证实:混合痔术后行扩肛并配合中
药外洗无论在减轻局部疼痛,还是在消水肿等方面
均优于不行扩肛组及高锰酸钾外洗组。通过本次临
床试验,本法确为减轻混合痔术后疼痛、水肿等并
发症提供一种简单易行的方法,值得应用。
参考文献:
[1] 王净净,龙俊杰.中医临床病证诊断疗效标准[S].长沙:湖南科学
技术出版社,1993:361- 362.
[2] 张东铭.大肠肛门局部解剖与手术学[M].合肥:安徽科学技术出
版社,1998:20- 32.
(收稿日期:2010-04-01)
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是作为栽培变种来处理的。在维吾尔医中莴苣子药
性为二级干寒,味淡。功能为生干生寒,调节异常血
液质,凉血退热,清热止痛,清热解郁,除烦催眠,催
乳通闭,稀化精液,固精固发;主治湿热性或血液质
性疾病,如血液质性发热、热性头痛、心烦失眠,用
于热症引起的高烧、乳汁不下、尿闭及尿路炎症、热
性出血、神经衰弱等疾[1- 3]。中医中记载莴苣子味苦,
性寒,入胃、膀胱二经,功能通乳、利小便,用于产妇
乳汁不通,小便不通,阴囊肿大[4- 6]。现代研究表明莴
苣子具有降压、利尿、抗氧化、镇痛、抗炎、镇静催眠
等作用[7- 10]。
经化学成分预试研究,莴苣子中含有黄酮类、
有机酸、酚类、甾体、油脂等成分。为了进一步开发
和利用其药用价值,本实验采用比色法[11- 12]对维吾
尔药莴苣子的总黄酮含量进行了测定。
1 材料与仪器
1.1 材料
莴苣子:购于新疆米泉市郊区蔬菜种植基地,
由新疆维吾尔自治区药物研究所已故研究员张彦
福鉴定为菊科莴苣属植物莴苣Lactuca sativa L.干燥
成熟果实;芦丁对照品:由中国药品生物制品检定
所提供,批号:100080- 200707;其余试剂均为分析
纯。
1.2 仪器
BP211D型电子天平(德国Sartorius有限公司);
JM电子计数天平(浙江余姚纪铭称重校验设备有限
公司);岛津UV- 2501PC紫外可见分光光度计(日本
岛津有限公司);AS10200AD超声波清洗器(天津奥
特赛恩斯仪器有限公司);RE- 5298A旋转蒸发仪
(上海亚荣生化仪器厂);SHB- IIIS循环水式多用真
空泵(郑州长城科工贸有限公司);HH-W600三用恒
温水箱(江苏省金坛市医疗仪器厂)。
2 实验方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品
10mg,置10mL量瓶中,加甲醇适量,置水浴上微热使
溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取5mL,置
25mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1mL水中
含芦丁0.2mg)。
2.2 供试品溶液的制备
取莴苣子20g,精密称定,置圆底烧瓶中,加入
10倍量40%乙醇回流提取2次,每次1.5h,过滤,合并
滤液,浓缩近干,加水溶解并定容至50mL,摇匀,过
滤,精密量取续滤液2mL,置25mL量瓶中,加水至刻
度,摇匀,即得。
2.3 供试品溶液测定
精密量取供试品溶液适量,照标准曲线项下的
方法,自“各加水至6.0mL”起,依法测定吸光度,从
标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量,
计算即得。
2.4 标准曲线绘制及线性范围考察
精密量取对照品溶液lmL、2mL、3mL、4mL、5mL
与6mL,分别置25mL量瓶中,各加水至6.0mL,加5%
亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6min,加10%硝酸铝
溶液1mL,摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠试液
10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min,以相应试剂
为空白,在509nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵
坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线,标准曲线方程
为:y=0.525 1x- 0.022 3,r=0.999 6。表明芦丁在0.2~
1.2mg范围内线性关系良好。
2.5 方法学考察
2.5.1 精密度实验 精密吸取对照品溶液6份,照
标准曲线制备项下方法处理后,测定吸光度,结果
见表1。RSD为0.35%,表明该法精密度良好。
2.5.2 稳定性实验
(1)样品稳定性实验:将同一份供试品溶液分
别放置0、1、2、3、4、5天(冷藏避光),照样品的测定
方法项处理后,测定吸光度,结果见表2。RSD为
0.27%(n=6),表明供试品溶液放置5天对测定结果
无影响。
序号
1
2
3
4
5
6
RSD(%)
0.35
吸光度 平均值
0.299
0.298
0.300
0.299
0.297
0.298
0.298
表1 精密度实验结果
RSD(%)
0.27
含量(%) 平均值(%)
2.65
2.64
2.65
2.63
2.64
2.64
2.64
放置时间(天) 吸光度
0
1
2
3
4
5
0.423
0.421
0.423
0.420
0.422
0.421
表2 样品稳定性实验结果
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(2)显色稳定性实验:精密吸取同一份供试品溶
液,照样品的测定方法项处理后,分别于0、0.5、1、
1.5、2、2.5h时测定吸光度,结果见表3。结果表明供
试品显色后放置 2h对测定结果影响不大,
RSD=1.34%;但放置2h后会导致测定结果偏低,
RSD=2.73%。所以供试品应在显色后2h内测定完毕。
2.5.3 重复性实验 取同一批供试品6份,依法处
理后,测定吸光度,结果见表4。RSD为0.51%,表明
该法重复性良好。
2.5.4 加样回收率实验 取已知总黄酮含量的样
品制成供试品溶液,精密吸取相同体积供试品溶液
9份,分别精密加入高、中、低不同浓度的芦丁对照
品溶液适量,按照供试品溶液的制备方法和测定方
法操作,测定吸光度,结果见表5。平均回收率为
103.3%,RSD=0.7%。
2.6 供试品含量测定结果
取3批莴苣子,按照供试品溶液的制备及测定
项下操作,测定吸光度,结果见表6。莴苣子中总黄
酮平均含量为2.64%。
3 讨论
3.1 吸收波长的确定
分别将显色后的供试品溶液及芦丁对照品溶
液在400~700nm范围内进行扫描,结果表明供试品
溶液及芦丁对照品溶液均在509nm处有最大吸收
峰,因此,本试验选择509nm作为莴苣子总黄酮的测
定波长。
3.2 提取溶剂的确定
根据黄酮类化合物易溶解于乙醇的特点,本试
验考察了不同浓度乙醇(水、20%乙醇、40%乙醇、
60%乙醇和80%乙醇)回流提取对总黄酮含量测定
结果的影响。结果表明,40%乙醇提取总黄酮含量
最高,因此,确定提取溶剂为40%乙醇。
3.3 提取方法的确定
本试验考察了3种不同提取方法(回流提取法、
冷浸提取法、超声提取法)对总黄酮含量测定结果
的影响。结果表明,回流提取法总黄酮含量最高,因
此,确定提取方法为回流提取法。
3.4 小结
有关维吾尔药莴苣子中总黄酮的含量测定,目
前尚未见相关报道。本实验采用40%乙醇回流提
取,以NaNO2- A1(NO3)3- NaOH体系为显色剂,利用
比色法测定莴苣子中总黄酮含量,方法学考察结果
表明,该法用于测定莴苣子中总黄酮含量,稳定性、
重复性、精密度、回收率均符合含量测定的技术要
求,操作简便,可作为莴苣子总黄酮含量测定的方
法。
参考文献:
[1] 新疆维吾尔自治区卫生厅.维吾尔药材标准[S].乌鲁木齐:新疆
RSD(%)含量(%) 平均值(%)显色时间(h) 吸光度
1.34
2.65
2.65
2.63
2.61
2.57
2.62
0
0.5
1
1.5
2
0.423
0.423
0.420
0.416
0.409
2.5 0.392 2.47 2.60 2.73
表3 显色稳定性实验结果
序号
1
2
3
4
5
6
RSD(%)
0.51
平均值(%)
2.64
吸光度
0.423
0.425
0.421
0.419
0.420
0.420
含量(%)
2.65
2.66
2.64
2.63
2.63
2.63
表4 重复性实验结果
对照品加
入量(mg)
测得量
(mg)
序号
样品含量
(mg)
0.32
0.32
0.32
0.40
0.40
0.40
0.48
0.48
0.48
0.7566
0.7528
0.7509
0.8347
0.8309
0.8366
0.9147
0.9204
0.9185
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
0.4221
回收率
(%)
104.5
103.3
102.8
103.1
102.2
103.6
102.6
103.8
103.4
平均值
(%)
RSD
(%)
103.3 0.7
表5 加样回收率试验结果
样品批次
1
2
3
RSD(%)
0.26
0.22
0.79
总黄酮含量(%) 平均值(%)
2.64
2.63
2.64
2.65
2.64
2.66
2.64
2.62
2.66
2.63
2.65
2.64
表6 莴苣子总黄酮含量测定结果(n=3)
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已故王登正老师从事中医临床40余载,在中医
药治疗恶性肿瘤方面积累了丰富的经验,笔者导师
张洪亮主任医师有幸侍诊于侧,获益良多,在其指
导下将已故王老治疗胃癌术后用药经验整理成文,
与同道共勉。
1 辨证论治,根本之策
胃癌术后患者多表现为胃脘痛、贫血、消瘦、乏
力、泛酸、纳食不馨、腹泻或便秘等临床症状。王登
正老师常引用内经文“知标本者,万举万当”,认为
胃癌术后患者属本虚标实之证,患者既有脏腑气血
亏虚,又有气滞、血瘀、痰凝、湿阻等标实的情况,根
据患者临床表现常将本病辨证分为气血两虚、肝脾
不和、脾虚湿盛、气虚血瘀等类型。
1.1 气血两虚型
症见面色眼睑苍白、乏力、头晕、寐差、纳少、消
瘦,舌质淡、苔薄白,脉细。治法:健脾益气、养血安
神。方药:八珍汤加减。若血色素8g以下,使用红参、
白人参、生地;若头晕、失眠明显,方选归脾汤加减。
1.2 肝脾不和型
症见泛酸、嘈杂、纳呆、口干或口苦,舌质暗淡、
苔白厚或薄白,脉弦数或细涩。治法:疏肝健脾、活
血通络。方药:萸连丸合香砂六君子汤加减。如合并
有贫血,加用桃红四物汤。
1.3 脾虚湿盛型
症见纳呆腹胀,倦怠乏力,大便溏薄或里急后
重;舌苔厚白或白腻,脉濡滑。治法:健脾化湿、活血
化瘀。方药:香砂六君子汤加减。如兼血虚者,加当
归、炒白芍药;畏寒肢冷,加补骨脂;上腹胀明显,加
香橼皮、佛手、玉片。
1.4 气虚血瘀型
症见上腹隐痛,喜按,胃纳减少,面色苍白,消
瘦,舌质暗或伴瘀斑、舌苔薄白或腻,脉沉滑或涩。
治法:活血化瘀、散结理气止痛。方药:桃红四物汤
加减。如血瘀明显,去桃仁、红花,加莪术、土元、九
香虫、血竭。
2 脾虚血瘀,谨守病机
王老认为,恶性肿瘤的发病是一个复杂的过
程,尽管有各种各样的外界致病因素,但归根到底,
王登正先生治疗胃癌术后经验举要
张洪亮1, 肖春霞2
(1.自治区中医医院肿瘤二科, 新疆 乌鲁木齐 830000; 2.新疆医科大学31期研究生, 新疆 乌鲁木齐 830011)
摘 要 介绍王登正老师治疗胃癌术后的辨证用药经验。强调“辨证施治”为其根本之策,重视“脾虚血瘀”之
基本病机,按“度”使用活血化瘀药,将“防治并举,防重于治”灵活应用于治疗癌前病变及为术后放化疗减毒增效,
值得我们继承和推广。
关键词 王登正;胃癌;经验
老中医
经 验
11111
1
1
11111
1
1
1
科技卫生出版社,1993:353- 354.
[2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草·维吾尔药卷
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1111111111111111111111111111111111111
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