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白背黄花稔Sida rhombifolia的生物活性及化学成分研究



全 文 :农药学学报 2012,14(4) :377 - 382
Chinese Journal of Pesticide Science http:/ /www . nyxxb. com. cn
收稿日期:2012-05-02;修回日期:2012-05-17.
作者简介:陈维权,男,在读硕士研究生,E-mail:angle850810@ 163. com;* 通信作者(Author for correspondence) :徐汉虹,男,博士,教授,博
士生导师,主要从事天然源农药、昆虫毒理学研究,E-mail:hhxu@ scau. edu. cn
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项基金资助项目(200903052).
·研究论文·
白背黄花稔 Sida rhombifolia 的
生物活性及化学成分研究
陈维权, 张 恒, 徐汉虹*
(华南农业大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 /
天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广州 510642)
摘 要:用石油醚和乙酸乙酯分别对白背黄花稔 Sida rhombifolia L.地上部分的乙醇提取物进行萃
取,得不同萃取相;测定了乙醇提取物及不同萃取相对白纹伊蚊 Aedes albopictus Skuse 4 龄幼虫和
福寿螺 Ampullaria gigas Spix 的毒杀活性。结果表明,乙醇提取物和乙酸乙酯相对白纹伊蚊 4 龄幼
虫的杀虫活性明显,而石油醚相和乙醇提取物对福寿螺的杀螺活性较好。对乙酸乙酯相进一步分
离得到 11 个化合物,经核磁共振氢谱(1H NMR)和碳谱(13C NMR)鉴定其分别为已知化合物:间-
羟基苯甲酸(1)、棕榈酸 1-甘油酯(2)、丁香酸(3)、没食子酸(4)、β-谷甾醇(5)、豆甾醇(6)、东莨菪
内酯(7)、山奈酚(8)、5-羟基-7,4-二甲氧基二氢黄酮(9)、3-O-β-D-葡萄糖-(6-O-对羟基反式香豆
酰基)-山奈素苷(10)和 β-谷甾醇-3-O-葡萄糖苷(11)。其中化合物 2 对白纹伊蚊 4 龄幼虫具有较
好的杀虫活性,24 h和 48 h的 LC50值分别为 28. 66 和 13. 50 μg /mL。
关键词:锦葵科;白背黄花稔;生物活性;化学成分
DOI:10. 3969 / j. issn. 1008-7303. 2012. 04. 04
中图分类号:S482. 39 文献标志码:A 文章编号:1008-7303(2012)04-0377-06
Study on bioactivity and chemical constituents of Sida rhombifolia
CHEN Weiquan, ZHANG Heng, XU Hanhong*
(State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources /
Key Laboratory of Natural Pesticide and Chemical Biology,
Ministry of Education,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:The ethanol extract of the aerial part of Sida rhombifolia L. was extracted with petroleum
ether and ethyl acetate to give the petroleum ether extract,ethyl acetate extract and water phase. Toxic
activity of the ethanol extract and three crude extracts against the 4th-instars larva of Aedes albopictus
Skuse and Ampullaria gigas Spix was tested. It showed that the ethanol extract and ethyl acetate extract
had obvious insecticidal activity against the 4th-instars larva of A. albopictus,while petroleum ether
extract and the ethanol extract showed higher molluscicidal activity against A. gigas. Eleven known
compounds were isolated from the ethyl acetate extract through further phytochemical investigation,
their structures were identified as m-hydroxybenzoic acid(1) ,glyceroyl monopalmitate(2) ,syringic
acid(3) ,gallic acid(4) ,β-sitosterol(5) ,stigmasterol(6) ,scopoletin(7) ,kaempferol(8) ,5-hydroxy-
农 药 学 学 报 Vol. 14
7,4-dimethoxyflavanone(9) ,tiliroside(10) and β-sitosterol-3-O-glucoside(11) ,respectively,by
1H NMR and 13C NMR. Compound 2 exhibited potent insecticidal activity against the 4th-instars larva
of A. albopictus,with LC50 value of 28. 66 μg /mL and 13. 50 μg /mL after treatment in 24 h and 48 h,
respectively.
Key words:Malvaceae;Sida rhombifolia L.;bioactivity;chemical constituent
白背黄花稔 Sida rhombifolia L. 是锦葵科
(Malvaceae)黄花稔属的一种直立多枝半灌木,又名
菱叶拔毒散和麻笔,全草入药,有消炎解毒、祛风除
湿、止痛之功效[1],主要分布于我国云南、贵州、四
川、湖南、广东、广西、福建及台湾等省或自治区,资
源丰富。目前,国外有关白背黄花稔的化学成分和
药理作用已有报道[2–7],但对其是否具有农药活性
的研究未见报道;国内仅见白背黄花稔甲醇提取物
对柑桔粉虱 Dialeurodes citri Ashmead 具良好触杀
活性的报道[8],但并未报道其杀虫活性成分。为了
综合开发药用植物资源,寻找新的植物源杀虫剂,笔
者对白背黄花稔的农用生物活性和化学活性成分做
了进一步研究,首次从该种植物中分离得到 11 个已
知化合物,对其杀虫活性进行了测试。
1 材料与方法
1. 1 供试植物
白背黄花稔 Sida rhombifolia L. 地上部分于
2010 年 7 月采自广西南宁,由华南农业大学李秉滔
教授鉴定。
1. 2 试虫
白纹伊蚊 Aedes albopictus Skuse引自广东省卫
生防疫站,将取回的卵放入事先已脱氯的自来水中
孵化,待幼虫孵化 6 d(此时为 4 龄幼虫) ,选取个体
大小一致的幼虫供试。
福寿螺 Ampullaria gigas Spix 幼螺采自华南农
业大学实习农场,在实验室饲养 7 d 后,选取无损伤
且大小较一致的幼螺(约 0. 50 g)供试。
1. 3 仪器与试剂
FE-130DEF90 植物粉碎机(河北黄骅科学仪器
厂) ;DHG-9240A 型电热恒温鼓风干燥箱(上海精
宏实验设备有限公司) ;上海亚荣旋转蒸发器(上海
亚荣生化仪器厂) ;Sephadex LH-20 凝胶(Sweden
公司) ;ZF7 三用紫外分析仪(巩义市予华仪器有限
责任公司) ;X4 型显微熔点测定仪(温度未校正)
(北京第二光学仪器厂) ;Bruker AV-600 核磁共振
仪(瑞士 Bruker公司)。
MCI精细分离树脂(日本三菱化学股份有限公
司) ;硅胶(100 ~ 160 目、200 ~ 300 目)和 GF254硅胶
板(青岛海洋化工厂)。石油醚(30 ~ 60 ℃)等溶剂
均为分析纯。鱼藤酮(rotenone)标样(含量 > 95%,
Sigma公司)。
1. 4 化合物的提取与分离
将阴干的白背黄花稔地上部分在 50 ~ 60 ℃电
热恒温鼓风干燥箱内烘干,然后经植物粉碎机粉碎,
过 80 目筛(筛孔径为 0. 2 mm) ,得干粉。称取该干
粉(32. 0 kg) ,加入 3 倍体积质量分数为 85%的乙
醇进行浸提。共浸提 3 次,每次浸提 3 d。合并提取
液,抽滤,经旋转蒸发仪减压浓缩至干,得到白背黄
花稔乙醇提取物(2. 82 kg)。采用液液分配萃取法,
将白背黄花稔乙醇提物用少量甲醇溶解后,加入等
体积水充分摇匀,分别用石油醚和乙酸乙酯萃取
3 次,将各部分萃取液浓缩至干,分别得到石油醚相
浸膏(409. 7 g)、乙酸乙酯相浸膏(437. 0 g)和水相
(1 832. 5 g)。
通过杀虫活性测定,选取活性较好的乙酸乙酯
相浸膏(437. 0 g)进行硅胶柱层析(200 ~ 300 目)。
先加入适量的甲醇溶解乙酸乙酯相浸膏,再加入等
量的硅胶(100 ~ 160 目)拌样,干法上样,分别以
V(石油醚)∶ V(乙酸乙酯)= 20 ∶ 1 ~ 1∶ 1的混合溶液
为洗脱剂进行梯度洗脱,最后用甲醇冲柱,共得到
7 个馏分。选取馏分Ⅱ、Ⅳ和Ⅵ再进行细分,分别将
这 3 个馏分过 MCI 柱,以除去色素,再以选定的溶
剂系统进一步进行硅胶柱层析分离,结合 Sephdex
LH-20 柱层析,最终得到化合物 1 ~ 11,其质量分别
为 54. 3、34. 1、24. 8、78. 2、54. 1、24. 6、20. 3、25. 2、
27. 9、34. 7 和 31. 3 mg。
1. 5 生物活性测定
1. 5. 1 乙醇提取物及不同萃取相对白纹伊蚊 4 龄
幼虫杀虫活性测定 参考黄素青等[9]和王学贵
等[10]的方法。准确称量乙醇提取物和各萃取相,先
用丙酮(水相用甲醇)配制成高浓度母液,超声波处
理 5 min以增加其溶解度,再用蒸馏水配成质量浓
度为 2. 5 mg /mL 的供试药液,同时以丙酮水(或甲
醇水)为空白对照。将发育一致的 4 龄白纹伊蚊幼
虫放入配制好的药液中,每处理 3 次重复,每重复
873
No. 4 陈维权等:白背黄花稔 Sida rhombifolia的生物活性及化学成分研究
30 头幼虫。分别于处理 24 h和 48 h后检查试虫死
亡情况,按(1)式计算校正死亡率。
校正死亡率 /% =
处理组死亡率 - 对照组死亡率
100 - 对照组死亡率
× 100 (1)
选取杀虫效果较好的化合物,设置 5 个浓度梯
度(2. 5、1. 25、0. 625、0. 312 5 和 0. 156 25 mg /mL) ,
处理方法同上。将质量浓度转化为常用对数,死亡
率转化为几率值,建立毒力回归方程(Y = a + bx) ,
求出其对白纹伊蚊的毒力(LC50)。
1. 5. 2 乙醇提取物及不同萃取相对福寿螺的杀螺活
性测定 参考董道青等[11]和 Vasconcellos等[12]的方
法。准确称量乙醇提取物和各萃取相,分别用甲醇配
制成高浓度的母液,然后用去氯水稀释成所需浓度。
初筛按 400 mg /L 配制药液,对在 72 h 内福寿螺死
亡率达 80%以上的处理进入复筛试验,复筛分别按
400、200、100、50、25 mg /L 配制药液,以甲醇水溶液
作为空白对照。初筛和复筛每个处理各设 3 个重复。
在盛有 200 mL 药液的 500 mL 烧杯中各放入个体
大小一致的福寿螺幼螺 20 头和少量浮萍食料,以纱
布封口。分别于处理后 24、48、72 h 按照 Santos
等[13]的方法判断福寿螺死亡数,计算死亡率。
1. 5. 3 化合物对白纹伊蚊 4 龄幼虫的杀虫活性测
定 准确称取各供试化合物,用二甲基亚砜
(DMSO)溶解,再用蒸馏水稀释配制成质量浓度为
50 μg /mL 的供试药液,以 20 μg /mL 的鱼藤酮为药
剂对照,同时以 DMSO 水溶液为空白对照。按
1. 5. 1 节方法进行初筛,计算校正死亡率。根据各
化合物的初筛结果,对杀虫活性较好的化合物进行
精密毒力测定,按化合物质量浓度分别为 50、25、
12. 5、6. 25、3. 125 μg /mL 配制药液,鱼藤酮按 20、
10、5、2. 5、1. 25 μg /mL 配制药液,按 1. 5. 1 节方法
处理并求出化合物对白纹伊蚊 4 龄幼虫的毒力
(LC50值)。
2 结果与分析
2. 1 乙醇提取物及不同萃取相对白纹伊蚊的杀虫
活性
测定结果表明,乙醇提取物和乙酸乙酯相对
白纹伊蚊 4 龄幼虫的杀虫活性较好,处理 48 h 后,
其校正死亡率分别达到 96. 55%和 100. 00%。由
表 1 结果可见:处理 48 h后,乙醇提取物和乙酸乙
酯相对白纹伊蚊 4 龄幼虫的 LC50值分别为 0. 94
和 0. 75 mg /mL。
表 1 白背黄花稔乙醇提取物和乙酸乙酯相对白纹伊蚊 4 龄幼虫的毒力
Table 1 Toxicity of ethanol extract and ethyl acetate extract of S. rhombifolia against
the 4th-instars larva of Aedes albopictus
药剂
Insecticide
处理时间
Treatment time /h
毒力回归方程
Regression equation
相关系数
Correlation coefficient(r)
LC50
(95% FL)/(mg /mL)
乙醇提取物 24 Y = 4. 201 3 + 1. 624 6x 0. 997 7 3. 10(1. 88 ~ 5. 13)
Ethanol extract 48 Y = 5. 068 1 + 2. 668 2x 0. 992 0 0. 94(0. 80 ~ 1. 12)
乙酸乙酯相 24 Y = 4. 208 1 + 1. 381 5x 0. 992 9 3. 74(2. 01 ~ 6. 96)
Ethyl acetate extract 48 Y = 5. 344 5 + 2. 787 6x 0. 926 6 0. 75(0. 65 ~ 0. 88)
2. 2 乙醇提取物及不同萃取相对福寿螺的杀螺
活性
初筛结果显示,乙醇提取物和石油醚相对福寿
螺具有良好的杀螺活性,其校正死亡率与处理时间
呈正相关,处理 72 h后,校正死亡率分别为 89. 66%
和 93. 10%。毒力测定结果(表 2)显示,处理 72 h
后,乙醇提取物和石油醚相对福寿螺的 LC50值分别
为 198. 9 和 154. 7 mg /L。
表 2 白背黄花稔石油醚相和乙醇提取物对福寿螺的毒力
Table 2 Toxicity of petroleum ether extract and ethanol extract of S. rhombifolia against Ampullaria gigas
药剂
Insecticide
处理时间
Treatment time /h
毒力回归方程
Regression equation
相关系数
Correlation coefficient(r)
LC50
(95% FL)/(mg /L)
石油醚相 24 Y = 1. 138 4 + 1. 431 3x 0. 997 4 498. 8(230. 2 ~ 1 080)
Petroleum ether extract 48 Y = 1. 316 2 + 1. 476 4x 0. 983 1 312. 7(117. 6 ~ 550. 6)
72 Y = 0. 245 1 + 2. 171 8x 0. 960 8 154. 7(116. 2 ~ 205. 8)
乙醇提取物 24 Y = 1. 507 2 + 1. 092 4x 0. 974 3 1 575(286. 9 ~ 8 645)
Ethanol extract 48 Y = 0. 851 8 + 1. 513 0x 0. 969 4 551. 8(252. 6 ~ 1 205)
72 Y = - 0. 367 3 + 2. 355 0x 0. 937 9 198. 9(143. 4 ~ 275. 9)
973
农 药 学 学 报 Vol. 14
2. 3 化合物 1 ~ 11 的结构鉴定
运用 1H NMR 和13 C NMR 等手段对分离得到
的 11 个化合物进行了结构鉴定。其理化性质及波
谱数据如下:
化合物 1:白色针状晶体;m. p. 200 ~ 202 ℃;1H
NMR(600 MHz,C5D5N) ,δ:6. 94(m,1H,H-2) ,7. 18(d,1H,
J = 7. 8 Hz,H-4) ,7. 46(m,1H,H-5) ,8. 26(dd,1H,J = 1. 8
Hz,7. 8 Hz,H-6) ;13C NMR(150 MHz,C5D5N) ,δ:174. 5(s,
- COOH) ,115. 3(s,C-1) ,117. 6(d,C-2) ,162. 8(s,C-3) ,
119. 0(d,C-4) ,131. 2(d,C-5) ,135. 2(d,C-6)。以上数据
与文献[14]报道基本一致,故确定该化合物为间羟
基苯甲酸(m-hydroxybenzoic acid)。
化合物 2:白色粉末;m. p. 68 ~ 70 ℃;1H NMR(600
MHz,CDCl3) ,δ:4. 19(dd,1H,J = 12. 0 Hz,4. 8 Hz,H-1a) ,
4. 13(dd,1H,J = 11. 4 Hz,6. 0 Hz,H-1b) ,3. 91(m,1H,H-
2) ,3. 68(dd,1H,J = 12. 0 Hz,4. 2 Hz,H-3a) ,3. 60(dd,1H,
J = 11. 4 Hz,6. 0 Hz,H-3b) ,2. 50(brs,1H,- OH) ,2. 33(t,
2H,J = 1. 8 Hz,H-2) ,2. 07(brs,1H,- OH) ,1. 60(m,2H,H-
3) ,1. 26(m,24H,H-4 ~ 15) ,0. 86(t,3H,J = 7. 2 Hz,H-
16) ;13C NMR(150 MHz,CDCl3) ,δ:65. 4(t,C-1) ,70. 5(d,
C-2) ,63. 6(t,C-3) ,174. 6(s,C-1) ,34. 4(t,C-2) ,32. 1(t,
C-3) ,29. 9(t,C-4 ~ 8) ,29. 8(t,C-9) ,29. 7(t,C-10) ,
29. 6(t,C-11) ,29. 5(t,C-12) ,29. 3(t,C-13) ,25. 1(t,C-
14) ,22. 9(t,C-15) ,14. 3(q,C-16)。以上数据与文献
[15]报道相符,故确定该化合物为棕榈酸 1-甘油酯
(glyceroyl monopalmitate)。
化合物 3:黄色粉末;m. p. 207 ~ 209 ℃;1H NMR
(600 MHz,C5D5N) ,δ:12. 87(s,1H,- COOH) ,8. 04(s,2H,
H-2,6) ,3. 93(s,6H,2 × - OCH3) ;
13C NMR(150 MHz,
C5D5N) ,δ:122. 6(s,C-1) ,108. 9(d,C-2,6) ,149. 2(s,C-3,
5) ,142. 8(s,C-4) ,169. 7(s,C-7) ,56. 8(q,2 × - OCH3)。
根据波谱数据并与文献[16]对照,将化合物 3 鉴定
为丁香酸(syringic acid)。
化合物 4:白色晶体;m. p. 217 ~ 219 ℃;1H NMR
(600 MHz,DMSO-d6) ,δ:9. 19(s,2H,3,5-OH) ,8. 82(brs,
1H,4-OH) ,6. 91(s,2H,H-2,6) ;13 C NMR(150 MHz,
DMSO-d6) ,δ:120. 4(s,C-1) ,108. 7(d,C-2,6) ,145. 4(s,C-
3,5) ,138. 0(s,C-4) ,167. 5(s,C-7)。以上数据与文献
[17]一致,因此鉴定为没食子酸(gallic acid)。
化合物 5:白色针状晶体;m. p. 135 ~ 137 ℃;13 C
NMR(600 MHz,CDCl3) ,δ:37. 5(t,C-1) ,29. 4(t,C-2) ,72. 0
(d,C-3) ,42. 5(t,C-4) ,141. 0(s,C-5) ,121. 9(d,C-6) ,32. 0
(t,C-7) ,32. 1(d,C-8) ,50. 4(d,C-9) ,36. 7(s,C-10) ,21. 3
(t,C-11) ,39. 9(t,C-12) ,42. 6(s,C-13) ,57. 0(d,C-14) ,
24. 5(t,C-15) ,28. 5(t,C-16) ,56. 2(d,C-17) ,12. 3(q,C-
18) ,19. 3(q,C-19) ,36. 4(d,C-20) ,19. 0(q,C-21) ,34. 2(t,
C-22) ,26. 3(t,C-23) ,46. 1(d,C-24) ,31. 9(d,C-25) ,19. 6
(q,C-26) ,19. 2(q,C-27) ,23. 3(t,C-28) ,12. 0(q,C-29)。
其碳谱数据与文献[18]报道一致,且与 β-谷甾醇对
照品共薄层,R f 值及显色一致,混合熔点不下降,故
化合物 5 鉴定为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 6:白色晶体;m. p. 166 ~ 168 ℃;13 C NMR
(600 MHz,CDCl3) ,δ:37. 5(t,C-1) ,31. 9(t,C-2) ,72. 0(d,
C-3) ,42. 4(t,C-4) ,141. 0(s,C-5) ,121. 9(d,C-6) ,32. 1(t,
C-7) ,32. 0(d,C-8) ,50. 4(d,C-9) ,36. 7(s,C-10) ,21. 3(t,
C-11) ,40. 0(t,C-12) ,42. 5(s,C-13) ,57. 1(d,C-14) ,24. 6
(t,C-15) ,29. 1(t,C-16) ,56. 3(d,C-17) ,12. 2(q,C-18) ,
20. 0(q,C-19) ,40. 7(d,C-20) ,21. 4(q,C-21) ,138. 5(d,C-
22) ,129. 5(d,C-23) ,51. 5(d,C-24) ,32. 1(d,C-25) ,21. 3
(q,C-26) ,19. 2(q,C-27) ,25. 6(t,C-28) ,12. 5(q,C-29)。
其碳谱数据与文献[18]报道一致,且与豆甾醇对照
品共薄层,Rf 值及显色一致,因此将化合物 6 鉴定
为豆甾醇(stigmasterol)。
化合物 7:无色针状晶体;m. p. 204 ~ 206 ℃;
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6) ,δ:7. 91(d,1H,J = 9. 0 Hz,
H-4) ,7. 22(s,1H,H-5) ,6. 21(d,1H,J = 9. 6 Hz,H-3) ,3. 81
(s,3H,6-OCH3) ;
13 C NMR(150 MHz,DMSO-d6) ,δ:160. 7
(s,C-2) ,111. 7(d,C-3) ,144. 5(d,C-4) ,109. 6(d,C-5) ,
145. 3(s,C-6) ,151. 1(s,C-7) ,102. 8(d,C-8) ,149. 5(s,C-
9) ,110. 5(s,C-10) ,56. 0(q,6-OCH3)。以上数据与文献
[19–20]报道的东莨菪内酯一致,故确定化合物 7
为东莨菪内酯(scopoletin)。
化合物 8:黄色无定形粉末;m. p. 274 ~ 276 ℃;1H
NMR(600 MHz,DMSO-d6) ,δ:12. 45(s,1H,5-OH) ,10. 76
(brs,1H,-OH) ,10. 09(s,1H,-OH) ,9. 35(brs,1H,- OH) ,
8. 02(d,2H,J = 9. 0 Hz,H-2,6) ,6. 90(d,2H,J = 9. 0 Hz,H-
3,5) ,6. 42(d,1H,J = 1. 8 Hz,H-8) ,6. 17(d,1H,J = 1. 8
Hz,H-6) ;13C NMR(150 MHz,DMSO-d6) ,δ:146. 8(s,C-2) ,
135. 7(s,C-3) ,175. 9(s,C-4) ,160. 7(s,C-5) ,98. 2(d,C-6) ,
163. 9(s,C-7) ,93. 5(d,C-8) ,156. 2(s,C-9) ,103. 1(s,C-
10) ,121. 7(s,C-1) ,129. 5(d,C-2,6) ,115. 5(d,C-3,5) ,
159. 2(s,C-4)。以上波谱数据与文献[21]报道基本
一致,故确定化合物 8 为山奈酚(kaempferol)。
化合物 9:无色晶体;m. p. 103 ~ 105 ℃;1H NMR
(600 MHz,CDCl3) ,δ:12. 02(s,1H,5-OH) ,7. 36(d,2H,J =
7. 8 Hz,H-2,6) ,6. 94(d,2H,J = 6. 4 Hz,H-3,5) ,6. 05(d,
1H,J = 1. 8 Hz,H-8) ,6. 02(d,1H,J = 2. 4 Hz,H-6) ,5. 35
(dd,1H,J = 12. 6 Hz,3. 0 Hz,H-2) ,3. 82(s,3H,- OCH3) ,
3. 79(s,3H,- OCH3) ,3. 09(dd,1H,J = 17. 4 Hz,13. 2 Hz,
H-3a) ,2. 77(dd,1H,J = 17. 4 Hz,3. 0 Hz,H-3b) ;13 C NMR
(150 MHz,CDCl3) ,δ:79. 2(d,C-2) ,43. 4(t,C-3) ,196. 2(s,
C-4) ,164. 4(s,C-5) ,95. 3(d,C-6) ,168. 2(s,C-7) ,94. 5(d,
C-8) ,163. 1(s,C-9) ,103. 4(s,10) ,130. 6(s,C-1) ,128. 0
083
No. 4 陈维权等:白背黄花稔 Sida rhombifolia的生物活性及化学成分研究
(d,C-2,6) ,114. 5(d,C-3,5) ,160. 3(s,C-4) ,55. 9(q,
- OCH3) ,55. 6(q,- OCH3)。以上波谱数据与文献
[22–23]报道一致,所以鉴定该化合物为 5-羟基-
7,4-二 甲 氧 基 二 氢 黄 酮 (5-hydroxy-7,4-
dimethoxyflavanone)。
化合物 10:黄色无定形粉末;m. p. 246 ~ 248 ℃;
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6) ,δ:7. 99(d,2H,J = 9. 0 Hz,
H-2,6) ,6. 85(d,2H,J = 9. 0 Hz,H-3,5) ,6. 38(d,1H,J =
1. 8 Hz,H-8) ,6. 14(d,1H,J = 1. 8 Hz,H-6) ,7. 37(d,2H,J =
8. 4 Hz,H-2″,6″) ,6. 79(d,2H,J = 8. 4 Hz,H-3″,5″) ,7. 34(d,
1H,J = 16 Hz,H-7″) ,6. 11(d,1H,J = 16 Hz,H-8″) ,12. 57(s,
1H,5-OH) ,5. 45(d,1H,J = 7. 8 Hz,Glc-1) ,3. 15 ~ 3. 40(m,
4H,Glc-2-5) ,4. 28(dd,1H,J = 1. 8 Hz,12. 0 Hz,Glc-6a) ,
4. 02(dd,1H,J = 5. 4 Hz,12. 0 Hz,Glc-6b) ;13 C NMR(150
MHz,DMSO-d6) ,δ:156. 7(s,C-2) ,133. 3(s,C-3) ,177. 7(s,
C-4) ,161. 4(s,C-5) ,99. 1(d,C-6) ,164. 6(s,C-7) ,94. 0(d,
C-8) ,156. 6(s,C-9) ,104. 1(s,C-10) ,121. 0(s,C-1) ,130. 4
(d,C-2,6) ,115. 4(d,C-3,5) ,160. 1(s,C-4) ,125. 2(s,
C-1″) ,131. 1(d,C-2″,6″) ,116. 0(d,C-3″,5″) ,160. 3(s,C-
4″) ,144. 9(d,C-7″) ,113. 9(d,C-8″) ,166. 4(s,C-9″) ,101. 3
(d,Glc-1) ,74. 5(d,Glc-2) ,76. 5(d,Glc-3) ,70. 2(d,Glc-4) ,
74. 4(d,Glc-5) ,63. 2(t,Glc-6)。综合以上数据,查阅相
关文献[24–25],鉴定该化合物为 3-O-β-D-葡萄糖-(6-
O-对羟基反式香豆酰基)-山奈素苷(tiliroside)。
化合物 11:白色粉末;m. p. 288 ~ 290 ℃;1 H NMR
(600 MHz,C5D5N) ,δ:0. 65(s,3H,H-18) ,0. 85(d,3H,J =
1. 2 Hz,H-26) ,0. 88(s,3H,H-27) ,0. 89(s,3H,H-29) ,0. 93
(s,3H,H-21) ,0. 98(d,3H,J = 6. 6 Hz,H-19) ,5. 34(t,1H,
J = 2. 4 Hz,H-6) ,5. 05(d,1H,J = 7. 8 Hz,H-1) ,4. 57(dd,
1H,J = 12. 0 Hz,2. 4 Hz,H-5) ,4. 41(dd,1H,J = 12. 0 Hz,
4. 8 Hz,H-2) ,4. 29(t,2H,J = 8. 4 Hz,H-6) ,4. 08(t,2H,
J = 7. 8 Hz,H-3) ,3. 99(m,1H,H-4) ,2. 74(m,1H,H-3) ;
13C NMR(150 MHz,C5D5N) ,δ:37. 3(t,C-1) ,30. 0(t,C-2) ,
78. 4(d,C-3) ,39. 1(t,C-4) ,140. 7(s,C-5) ,121. 7(d,C-6) ,
32. 0(t,C-7) ,31. 8(d,C-8) ,50. 1(d,C-9) ,36. 7(s,C-10) ,
21. 1(t,C-11) ,39. 7(t,C-12) ,42. 3(s,C-13) ,56. 6(d,C-
14) ,24. 3(t,C-15) ,28. 3(t,C-16) ,56. 0(d,C-17) ,11. 8(q,
C-18) ,19. 2(q,C-19) ,36. 1(d,C-20) ,18. 8(q,C-21) ,34. 0
(t,C-22) ,26. 2(t,C-23) ,45. 8(d,C-24) ,29. 3(d,C-25) ,
19. 8(q,C-26) ,19. 0(q,C-27) ,23. 2(t,C-28) ,11. 9(q,C-
29) ,102. 4(d,C-1) ,75. 1(d,C-2) ,77. 9(d,C-3) ,71. 5(d,
C-4) ,78. 3(d,C-5) ,62. 6(t,C-6)。其碳谱数据与文献
[26]报道一致,故将该化合物鉴定为 β-谷甾醇-3-O-
葡萄糖苷(β-sitosterol-3-O-glucoside)。
2. 4 化合物的杀虫活性
在供试的 11 个化合物中,化合物 2 对白纹伊蚊
4 龄幼虫表现出较强的杀虫活性,处理 48 h 后,其
LC50值为 13. 50 μg /mL(表 3) ,而其余的化合物基
本没有杀虫活性;所有处理的杀虫活性均低于对照
药剂鱼藤酮。
表 3 化合物 2 对白纹伊蚊 4 龄幼虫的毒力
Table 3 Toxicity of compound 2 against the 4th-instars larva of Aedes albopictus
药剂
Insecticide
处理时间
Treatment time /h
毒力回归方程
Regression equation
相关系数
Correlation coefficient(r)
LC50
(95% FL)/(μg /mL)
化合物 2 24 Y = 2. 571 7 + 1. 666 4x 0. 896 4 28. 66(18. 54 ~ 44. 29)
Compound 2 48 Y = 2. 915 3 + 1. 844 2x 0. 963 7 13. 50(10. 19 ~ 17. 90)
鱼藤酮 24 Y = 3. 341 6 + 1. 760 5x 0. 992 5 8. 75(6. 18 ~ 12. 39)
Rotenone 48 Y = 4. 465 5 + 1. 846 2x 0. 997 1 1. 95(1. 27 ~ 2. 98)
3 结论与讨论
本文报道了白背黄花稔乙醇提取物及各萃取相
的生物活性,结果表明,乙醇提取物和乙酸乙酯相对
白纹伊蚊 4 龄幼虫表现出较强的杀虫活性,而石油
醚相和乙醇提取物对福寿螺的杀螺活性较好。从乙
酸乙酯相中分离得到 11 个化合物,且均为首次从该
种植物中分离得到,其中只有化合物 2(棕榈酸 1-甘
油酯)对白纹伊蚊有较强的杀虫活性,处理 48 h 后,
其 LC50值为 13. 50 μg /mL,由此推测棕榈酸 1-甘油
酯可能为白背黄花稔的活性成分之一。此外,实验
还表明,在 50 μg /mL 下所有化合物对福寿螺基本
无毒杀活性。本研究只选取了乙酸乙酯相的 3 个馏
分进行分离纯化,其他馏分和萃取相是否还含有其
他活性成分有待进一步研究。
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(责任编辑:金淑惠)
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