全 文 ：岗梅根醇提液对小鼠的半数致死量 （LD50） 的测定
罗雅劲，孙永学 *，曾绮雯，郑少萍
（华南农业大学兽医学院，广东 广州 510642）
收稿日期：2009- 10- 19
岗梅根（Roughhaired Holly Root）是冬青科
植物梅叶冬青（Ilexasprella(Hook.f.etArn.)
Champ.exBenth）的根，有清热解毒、活血生津等功
效,可用于治疗感冒、喉痛和跌打损伤等[1]。国内外
对该药的研究甚少，目前没有该药急性毒性方面
的研究报道。岗梅根醇提液是由笔者制备，但该药
应用于临床还需进行深入的药理毒理学评估。在
前期研究的基础上，本文进行了其半数致死量的
试验测定。
1 试验材料
1.1 试剂和器材 岗梅根醇提液（自制，相当于
每毫升药液含生药1 g），使用前，分别配制成不
同浓度；注射器（1 mL）；METTLER 电子称；其他试
剂均为分析纯。
1.2 试验动物 健康KM小鼠100只，雌雄各半，
体重18～22 g。试验前，将小鼠置20～25℃空调动
物房中适应饲养1 w，标准饲料，饮用水为自来水。
2 试验方法
2.1 预试 找出0%（Dn）和100%（Dm）估计致死剂
量[2,3]。取小鼠25只，按性别分类后，根据体重随
机分成5组，每组5只。禁食24 h后开始进行预
试验。配制系列浓度的药液，以0.03 mL/g的剂量
对小鼠进行一次性腹腔注射，连续观察7 d，每天
观察3次，记录动物死亡情况。根据观察结果，在
5/5和1/5致死组上下递增或递减，假如某组死
亡数为5/5，其前一组是4/5或3/5，则以该组剂
量为Dm；假如前一组是1/5或2/5，则以该组剂量
的 1.5 倍为 Dm；同法，找出 Dn。重复预试，确定
Dm、Dn分别为67 500 mg/kg和27 648 mg/kg。
2.2 正式试验
2.2.1 分组及剂量计算 按照完全随机法，分组常
以4～9组为宜，剂量比值（1:K）一般为1:0.75～
摘 要： 用寇氏（k- r ber） 法测定了岗梅根醇提液腹腔注射对小鼠的半数致死量（LD50），结果显示，岗
梅根醇提液腹腔注射的 LD50为 37 786. 27 mg/ kg, 95%可信限为 33 744. 27～42 315. 55 mg/ kg。表明岗梅根
醇提液属实际无毒级，临床日用量安全。
关键词：岗梅根醇提液；半数致死量；小鼠
中图分类号： S859.2 文献标识码： A 文章编号： 1005-8567(2010)01-0037-03
广东畜牧兽医科技 2010年(第 35卷)第 1期
LD50 of Gangmeigen extract Determined in Mice by ip injection
Luo Yajin， Sun Yongxue*, Zeng Qiwen
(Laboratory of Veterinary Phamacology,South China Agric.Univ.,Guangzhou,510642,China）
Abstract： Using Karbers method to test the LD50 of Gangmeigen extract in mice by ip injection.Results
showed that the LD50 values in this experiment is 37 786.27mg/kg， with the 95% confidence limit of 33
744.27～42 315.55 mg/kg. Gangmeigen extract is a drug with real non-toxic level.The clinical daily dose of
which is safe.
Keywords： Gangmeigenextract； LD50； Mice
基金项目：广东省教育部产学研结合项目( 2007040635)
*：通讯作者
试验研究 37· ·
式计算 LD50；lgLD50的标准误按 <2> 式计算；LD50
的95%平均可信限按<3>式计算；回归系数（回归
直线的斜率）按<4>式计算；回归方程式见<5>
式；LD10按<6>式计算。
LD50=lg-1［Xm-i·（∑p-0.5）］… <1>
其中：Xm为最大剂量的对数；i为相邻两组高
剂量与低剂量之比的对数；p为各组死亡率（以小
数表示）；∑p为各组动物死亡率的总和。
lgLD50的标准误：Sx50=i· …<2>
其中：n为每组动物数；q=1-p。
LD50的 95%平均可信限 =LD50±4.5·LD50·Sx50
…<3>
回归系数（回归直线斜率）：b=（Yh-Yl）/（iR）
…<4>
其中：Yh是高半组Y值平均数；Yl是低半组Y
值平均数；R是Yh与Yl间相差的组距数。
回归方程式：y=bx+5-b·lgLD50…<5>
3 结果
3.1 小鼠中毒反应 从5组试验小鼠给药后的
临床反应来看，均出现呼吸困难、烦躁不安等症
状，死亡小鼠病死前症状更加突出；死亡时，出现
乱蹦乱跳，抽搐直至无力，呼吸渐加深加快至死，
且有尸体僵硬，出现强直症状。存活小鼠在给药
3 d后恢复正常，以后均未出现行为异常。各组小
鼠死亡只数及死亡时间见表2。
表 2 各组小鼠死亡只数及死亡时间表
3.2 急性毒理参数 岗梅根醇提液半数致死量
试验原始数据和计算资料见表3。按表内数据，可
按照公式算出岗梅根醇提液 LD50有关的全部数
据。
LD50=37 786.27 mg/kg
Sx50=0.025 08
LD50的 95%平均可信限 =33 744.27～ 2
315.55 mg/kg
回归直线斜率：
b=8.4546
回归方程式：
y=bx+5-b·lgLD50
即y=8.4546x-33.699
0.8，不宜超过0.6～0.9的范围。根据相关文献报
道，可按表1[4]来选择分组数及剂量比值。预试试验
中，Dm=67 500 mg/kg，Dn=27 648 mg/kg，查表以
K=0.8，N=5（N为分组数）为适宜。从而可以计算各
组剂量分别为：第1组：67 500 mg/kg；第2组：67
500×0.8=54 000 mg/kg；第 3 组：67 500×
0.82=43 200 mg/kg；第4组：67 500×0.83=34 560
mg/kg；第5组：67 500×0.84=27 648 mg/kg。
2.2.2 给药方案 将 50 只小鼠随机分成 5 组，
每组10只，雌雄各半，用苦味酸标记。试验前禁食
24 h，正常给水。然后，分别将各组小鼠按照
2.2.1计算所得的剂量进行1次性腹腔注射，注
射完毕后，将小鼠置 20～25℃空调动物房中饲
养，饲喂全价日粮。
2.3 观察指标 给药后，连续观察7 d，详细记录
小鼠死亡数目、时间及主要毒性反应。
2.4 统计方法 试验完毕，统计各组小鼠死亡
数，计算死亡率（p），按孙氏改良寇氏公式[2,4,6]<1>
剂量比值（1/K） K值 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8 0.85 0.88 0.9
最高、最低致
死量相差的
倍数（Dm/Dn）
2倍左右 - - - 3～4组 4组 5～6组 6～7组 7～8组
3倍左右 - 3～4组 4组 4～5组 5组 6～8组 9组 -
4倍左右 3～4组 4～5组 5组 5～6组 7～8组 9组 - -
6倍左右 4～5组 5～6组 6组 7～8组 9组 10组 - -
10倍左右 5～6组 6～7组 8组 9～10组 10组 - - -
14倍左右 6～7组 7组 8～9组 10组 - - - -
岗梅根醇提液对小鼠的半数致死量（LD50） 的测定—罗雅劲，等
表 1 选择分组组数及剂量比值简表
组别
死亡数
（只）
死亡时间（d）
1 2 3 4 5 6 7
1 10 9 1 - - - - -
2 9 3 6 - - - - -
3 7 3 4 - - - - -
4 3 1 1 1 - - - -
5 2 1 1 - - - - -
试验研究38· ·
表 3 岗梅根醇提液半数致死量试验原始数据和计算资料
注：Y由查 GB15193[ 1] . 3- 2003急性毒性试验:反应率 - 概率单位表所得。
剂量（mg/kg） 死亡数 计算资料已知数据 组次 死亡率（p） P2 Y
67 500 10/10 Dm=67 500 mg/kg 1 1.0 1.00 6.88
Yh=5.913
Yl=3.455
R=3
54 000 9/10 Xm=4.8293 2 0.9 0.81 5.88
43 200 7/10 n=10 3 0.7 0.49 .98
34 560 3/10 N=5 4 0.3 0.09 3.66
27 648 2/10 i=0.09691 5 0.2 0.04 3.25
试验研究
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中国诞生了执业兽医
2009年农业部在吉林、河南、广西、重庆、宁夏等5个省（区、市）开展执业兽医资格考试试点
工作。根据全国执业兽医资格考试委员会第三次全体会议确定的2009年执业兽医资格考试成绩合
格分数线，共有5226名考生取得执业兽医资格，其中执业兽医师1086人，执业助理兽医师4140
人。近日，农业部向通过执业兽医资格考试的考生核发了执业兽医师资格证书和执业助理兽医师资
格证书。这标志着我国终于诞生了执业兽医。
执业兽医是指具备兽医相关技能，依照国家规定取得兽医执业资格，从事动物诊疗和动物保健
等活动的兽医技术人员。执业兽医是我国新型兽医队伍的重要组成部分，在国家兽医工作体系中发
挥着重要作用。一方面，执业兽医通过开展动物疫病预防、诊疗和咨询等服务活动，减少因动物疫病
引起的畜牧生产损失。另一方面，执业兽医通常是动物疫情第一发现人或者报告人，是疫情控制的
主要力量，在动物疫病防控中起着及时发现和报告疫情的前哨作用。
推行执业兽医制度，是我国兽医事业与世界上多数国家和地区的通行做法，是全面贯彻落实
《动物防疫法》和《国务院关于推进兽医管理体制改革的若干意见》文件的重要举措。执业兽医的诞
生，将对提高兽医队伍整体素质和从业能力，做好重大动物疫病防控，保障畜牧业健康持续发展，维
护公共卫生安全发挥重要作用，在兽医事业发展史上具有里程碑意义。
（信息来源：ht t p: / / www. cadc. gov. cn/）
岗梅根醇提液对小鼠的半数致死量（LD50） 的测定—罗雅劲，等
4 讨论
由于试验动物的抽样误差，药物引起动物死
亡的剂量大多在50%质反应的上下，呈现正态分
布。在急性毒性试验中，50%质反应即所谓半数致
死量（LD50）[4]。在这样的质反应中药物剂量和质反
应间呈S形曲线，其两端处较平，而在50%质反应
处曲线斜率最大，因此，药物剂量稍有变动，则动
物的死或活的反应就会出现明显差异，所以测定
半数致死量能比较准确地反映出其毒性大小。半
数致死量与毒性成反比，即致死量越小，毒性越
大；致死量越大，毒性越小。
通过本次试验，笔者测定了岗梅根醇提液经
腹腔注射的半数致死量为 37 786.27 mg/kg，其
95%平均可信限为33 744.27～42 315.55 mg/kg，
证明该药液属实际无毒级[2]，可以安全应用于临
床。但在本次试验中，小鼠由于适应饲养了1周，
体重普遍偏高，这可能会造成测得的半数致死量
偏大。
参考文献：
[1] 刘郴淑,陈华萍,李卫群,等.岗梅根乙醇提取物的抗炎作用
[J].中药材,2004,(7):519-520.
[2] 卫生部GB15193.3-2003号公告.急性毒性试验国标[S].
2003.
[3] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,
2000,166.
[4] 周登高,冉婧,田淑琴.复方秦皮提取液半数致死量(LD50)的
测定[J].中国牧业通讯,2008,(19):38-43.
[5] 陈杖榴.兽医药理学[M].第二版.北京:中国农业出版社,
2002.9.
[6] 史志诚.动物毒物学[M].北京:中国农业出版社,2001.
889-893.
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