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复方桐叶烧伤油对烫伤性溃疡模型大鼠的影响研究



全 文 :复方桐叶烧伤油对烫伤性溃疡模型大鼠的影响研究
许向平1,李勇敏2,朱克俭2
(1. 湖南省汩罗市人民医院,湖南 汨罗,414400;
2. 湖南省中医药研究院附属医院,湖南 长沙,410006)
[摘要] 目的:研究复方桐叶烧伤油对烫伤性溃疡的治疗作用。方法:将 60 只 SD 大鼠按体质量随机分为空白对照组
( 10 只) 和造模组( 50 只) ,雌雄各半。对造模组大鼠进行造模,方法:大鼠脊柱两侧躯干部位皮肤用脱毛剂脱毛,塑胶板中间
开窗,将食用油烧热至 140℃,沾湿纱布棉垫,立即贴于塑胶板窗中的脱毛皮肤上,使烫伤部位为深Ⅱ度烫伤,制成油烫伤溃疡
模型。将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、京万红组、复方桐叶烧伤油低、中、高剂量组,每组 10 只,雌雄各半。于造模后
第 4 天开始用药,分别于创面涂麻油,50%京万红,25%、50%、100%复方桐叶烧伤油,均治疗 14d。测定不同时间各组大鼠创
面面积,观察溃疡区组织病理特征。结果:与模型组比较,给药组多数大鼠创面可见大片新生肉芽组织和小条状疤痕形成,且
溃疡面积明显缩小;病理切片可见表层有明显肉芽组织、疤痕组织、新生毛细血管,内有大量胶原纤维、炎性细胞,呈正在愈合
状态。结论:复方桐叶烧伤油对烫伤性溃疡有较好的治疗作用。
[关键词] 复方桐叶烧伤油;烫伤性溃疡;创面面积;病理切片;实验研究
[中图分类号]R285. 5 [文献标识码]A [文章编号]1003 - 7705(2013)06 - 0120 - 02
通讯作者:朱克俭,湖南省中医药研究院附属医院,邮编:410006,E - mail:zkjo0731@ 263. net
复方桐叶烧伤油处方由桐叶、麻油组成。功能为清热解
毒,消肿止痛,祛腐生肌,用于面积小于 29%的Ⅱ度烧烫伤。本
研究以油深度烫伤溃疡大鼠模型为对象,观察其对烫伤性溃疡
的治疗作用。现介绍如下。
1 实验材料
1. 1 药物与试剂 复方桐叶烧伤油,由桐叶、麻油组成,每
瓶 30mL。批准文号:国药准字 Z20063825,由湖南省湘西宏
成制药有限责任公司提供,生产批号:20080501。阳性药物
京万红,规格:每支装 20g。批准文号:国药准字 Z12020440,
由天津达仁堂京万红药业有限公司生产,生产批号:211619。
实验时用凡士林稀释成 50%浓度备用。赋形剂(基质) :麻
油,市售,用时高温消毒;凡士林,75%乙醇,医用。
1. 2 动物 SD系清洁级大鼠 60 只,体质量 180 ~ 200g,雌
雄各半,合格证号:0060191,上海西普尔 -必凯实验动物有
限公司提供,许可证号:SCXK(沪)2008 - 0016。
2 方法与结果
2. 1 方法[1] (1)动物模型制备。将大鼠脊柱两侧躯干部
位皮肤用脱毛剂脱毛,面积约 3cm × 3cm。用温水洗净脱毛
剂,归笼观察 24h左右,见皮肤无损伤、红肿、皮疹等异常现
象。将 0. 5cm厚的塑胶板中间开窗,面积 2. 5cm × 2. 5cm,再
制成 2. 5cm × 2. 5cm大的纱布棉垫(面积 2. 5 × 2. 5cm,厚约
1cm,内衬棉花) ,将食用油烧热至 140℃,沾湿纱布棉垫,取
出立即贴于塑胶板窗中的脱毛皮肤上,雌性 30s,雄性 35s后
取下,使烫伤部位为深Ⅱ度烫伤,观察 3d后见创面有明显的
充血、水肿、溃疡等,表明溃疡模型成功。各组大鼠烫伤的
面积及深度相似,记录大鼠的创面面积。(2)分组与给药。
取体质量 180 ~200g清洁级 SD大鼠,雌雄各半。按体质量随
机取同批大鼠 10只为空白对照组,其余 50只动物造模后,按
性别、体质量随机分成模型对照组、京万红组、复方桐叶烧伤
油低、中、高剂量组,每组各 10 只,雌雄各半。造模后第 4 天
开始用药,用棉球于创面分别涂麻油、50%京万红、25%复方
桐叶烧伤油、50%复方桐叶烧伤油、100%复方桐叶烧伤油,涂
药以局部保持湿润状态并不流为宜,可分 2次,直到涂完。棉
球先浸药物后挤干,再定量给药。用药剂量根据人与动物体
表面积计算法,得出大鼠用量为 0. 1mL/次。将成品视为
100%浓度,依次用基质稀释成 25%、50%、100%浓度作为动
物用药的低、中、高剂量。阳性药 50%京万红大鼠用量为
0. 8g /d,每天换药 1次。常规饲养,自由饮水、进食,治疗时间
为 14d。(3)观察指标。①一般状态观察:每天观察并记录各
组动物的生理、行为特征,创面形态,创面分泌物及动物死亡
情况。创面含水量:取大鼠部分烧伤区皮肤(连带真皮,所取
皮肤面积重量、剪取位置应大致相同) ,称皮肤湿重和干重,
计算创面含水量,其公式如下:创面含水量 =[(皮肤湿重 -
皮肤干重)/皮肤湿重]× 100%,其结果见表 1。②
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
创面愈合
鱼叶苷的含量较高,建立这 2 种成分的含量测定对控制产品
质量具有一定意义。本实验采用 HPLC 法同时测定大蓟配
方颗粒中蒙花苷和柳穿鱼叶苷的含量,所建立方法简单快
捷、重复性好,为制定大蓟配方颗粒质量标准提供了依据。
在实验过程中,还考察了大蓟配方颗粒中的另外 2 种指标成
分咖啡酸、芹菜素的含量,但初步实验结果显示二者含量较
低,故未进行进一步的研究。
参考文献
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国医药科技出版社,2010:23.
[2] 陈发奎,刘晓秋 . 中药有效成分含量测定[M]. 北京:人民卫
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( 收稿日期: 2013 - 03 - 25)
·021·
第 29 卷第 6 期
2013 年 6 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 6
June 2013
程度测定:采用固定数码像机照像,photoshop 参比法得到溃
疡面积,计算创面愈合率(%)=(原始创面面积 -未愈合创
面面积)/原始创面面积,其结果见表 2。溃疡区组织病理学
观察:剪取各组大鼠溃疡区右侧皮肤组织,迅速置入 10%福
尔马林溶液中固定,按常规方法石蜡包埋、石蜡切片,行 HE
染色,光学显微镜观察,测定肉芽增生厚度、疤痕组织厚度、
毛细血管增生数量及炎症细胞数,其结果见表 3。
2. 2 结果 一般状态观察:大鼠烫伤 3d后受伤皮肤出现明
显红肿、水肿与溃疡。给药治疗 1 ~ 5d 时,由于溃疡皮肤处
于炎症期,模型组动物皮肤出现少量分泌物,治疗各组开始
结痂。7d时高剂量组大鼠的创面周围可见肉芽甚至疤痕形
成,溃疡面积缩小。14d后多数大鼠创面可见大片新生肉芽
组织,小条状疤痕形成,溃疡面积明显缩小。与模型组比
较,给药各组创面更小,高剂量组有个别基本愈合。病理切
片可见,表层可见明显肉芽组织、疤痕组织、新生毛细血管,
内有大量胶原纤维、炎性细胞,呈正在愈合状态。
表 1 复方桐叶烧伤油对大鼠烫伤性溃疡皮肤组织含水量的影响(x ± s)
组别 n 皮肤湿重(g) 皮肤干重(g) 含水量(%)
空白对照组 10 0. 2714 ± 0. 0239 0. 1038 ± 0. 0098 61. 76 ± 1. 33
模型对照组 10 0. 2196 ± 0. 0098 0. 0751 ± 0. 0062 65. 81 ± 2. 06
京万红组 10 0. 1872 ± 0. 0307 0. 0670 ± 0. 0106 64. 16 ± 0. 99a
复方桐叶烧伤油低剂量组 10 0. 1811 ± 0. 0261 0. 0646 ± 0. 0090 64. 32 ± 1. 24
复方桐叶烧伤油中剂量组 10 0. 1890 ± 0. 0217 0. 0698 ± 0. 0085 63. 10 ± 1. 12bc
复方桐叶烧伤油高剂量组 10 0. 1885 ± 0. 0244 0. 0701 ± 0. 0084 62. 77 ± 1. 16bd
注:与模型对照组比较,aP < 0. 05,bP < 0. 01;与京万红组比较,cP < 0. 05,dP < 0. 01
表 2 复方桐叶烧伤油对大鼠烫伤性溃疡创面愈合的影响(x ± s,cm2)
组别 n
不同时间的创面大小
0d 1d 3d 5d 7d 14d
空白对照组 10 - - - - - -
模型对照组 10 5. 02 ± 0. 99 5. 01 ± 0. 87 4. 85 ± 0. 87 4. 60 ± 0. 49 4. 06 ± 1. 30 2. 56 ± 1. 13
京万红组 10 5. 24 ± 0. 51 4. 55 ± 0. 55 4. 17 ± 0. 59 3. 88 ± 0. 99 3. 60 ± 0. 98 1. 98 ± 0. 39
复方桐叶烧伤油低剂量组 10 5. 21 ± 0. 65 4. 98 ± 0. 53 4. 29 ± 0. 62 3. 99 ± 0. 86 3. 64 ± 0. 63 2. 11 ± 0. 34
复方桐叶烧伤油中剂量组 10 5. 04 ± 0. 59 4. 58 ± 0. 74 4. 11 ± 0. 75 4. 01 ± 0. 75 3. 24 ± 0. 52 1. 72 ± 0. 26a
复方桐叶烧伤油高剂量组 10 5. 23 ± 0. 76 4. 44 ± 0. 50 3. 91 ± 0. 83a 3. 81 ± 1. 23 2. 83 ± 1. 17b 1. 53 ± 0. 62b
注:与模型对照组比较,aP < 0. 05,bP < 0. 01
表 3 复方桐叶烧伤油对大鼠烫伤性溃疡皮肤组织病理的影响(x ± s)
组别 n 肉芽厚度(μm) 疤痕厚度(μm) 增生毛细血管(根) 炎症细胞(个)
空白对照组 10 - - - -
模型对照组 10 7199. 0 ± 832. 2 1394. 0 ± 216. 4 34. 5 ± 3. 3 153. 6 ± 31. 5
京万红组 10 5984. 0 ± 1499. 4a 1656. 0 ± 266. 9a 29. 8 ± 7. 9 119. 3 ± 33. 2a
复方桐叶烧伤油低剂量组 10 6188. 0 ± 1058. 7a 1563. 5 ± 406. 8 30. 0 ± 7. 3 122. 1 ± 48. 8
复方桐叶烧伤油中剂量组 10 4715. 0 ± 1180. 4a 1783. 0 ± 370. 0b 26. 4 ± 8. 4b 104. 2 ± 32. 4bc
复方桐叶烧伤油高剂量组 10 4267. 0 ± 1311. 8bd 2013. 0 ± 422. 4bc 24. 1 ± 7. 2b 85. 1 ± 42. 6b
注:与模型对照组比较,aP < 0. 05,bP < 0. 01;与京万红组比较,cP < 0. 05,dP < 0. 01
3 讨 论
慢性皮肤溃疡是常见病、多发病,病程长,且难以治愈,其
主要病因为创伤和创伤后合并感染。中医认为,慢性皮肤溃
疡的全程存在着致病因素“虚、瘀、腐”的相互作用为患。其
中“虚、瘀”为本,“腐”为标。“腐”在本病形成的早期起主要
作用,而“虚”往往决定了“瘀”、“腐”发展的程度,同时又是慢
性皮肤溃疡后期的必然结果和主要矛盾,而“瘀”则往往贯穿
于疾病发展的始终[2]。现代医学认为,慢性皮肤溃疡在发生
至愈合的过程中,各种生长因子起非常重要的作用,如炎症期
的转化生长因子 β(TGF - β)、肿瘤坏死因子(TNF - α)等,作
为炎症细胞的趋化剂而发挥重要作用[3]。本实验观察结果
表明,大鼠烫伤型溃疡皮肤组织的病理变化明显,溃疡皮肤组
织为炎症及愈合的中心。但愈合面积的变化与实际愈合程度
有一定差别,这可从肉眼观察溃疡周边情况和病理切片结果
得到验证。此外,其烫伤深度比皮肤缺损模型要深得多,但从
表观面积大小难以判断,因此,在操作该模型时应特别注意烫
伤的温度与时间[4]。
参考文献
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( 收稿日期: 2013 - 03 - 28)
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