全 文 ：上海中医药杂志２０１３年第４７卷第１１期ＳＨ．Ｊ．ＴＣＭ　Ｎｏｖ．，２０１３；Ｖｏｌ．４７Ｎｏ．１１
岩黄连提取物对ＣＣｌ４致小鼠肝损伤的保护作用
蒙田秀，谢丽莎，黄茂春
广西中医药大学赛恩斯新医药学院（广西　南宁　５３０２２２）
【摘要】　目的　研究岩黄连提取物对小鼠肝损伤的保护作用。方法　昆明小鼠７２只随机分为正常对照组，模型对照组，阳性对照组
（联苯双酯，６００ｎｇ／ｇ），岩黄连高、中、低剂量组（１５．０、３０．０、６０．０μｇ／ｇ）。各组给予相应药物连续灌胃１０ｄ后，除正常组外，余组采用
四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导小鼠肝损伤模型。测定血清中丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）和天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）含量以及小鼠肝组织
中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量，肝脏指数及脾脏指数，观察岩黄连提取物对肝损伤的保护作用。结果　与正常
对照组比较，模型组小鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ含量升高，肝组织ＳＯＤ降低，ＭＤＡ升高，肝脏指数增大，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。
与模型组比较，岩黄连高、低剂量组小鼠血清ＡＬＴ含量降低，岩黄连高、中、低剂量组小鼠血清 ＡＳＴ含量降低，岩黄连各剂量组小鼠
肝组织ＳＯＤ升高、ＭＤＡ降低，肝脏指数降低，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。与阳性对照组比较，岩黄连中剂量组ＡＬＴ
含量及岩黄连高剂量组ＡＳＴ含量差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。岩黄连各剂量组之间各指标差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
结论　岩黄连提取物对ＣＣｌ４ 引起的小鼠肝脏损伤有保护作用。
【关键词】　岩黄连提取物；肝损伤；四氯化碳
【中图分类号】　Ｒ２８５．５　　　【文献标志码】　Ａ　　　【文章编号】　１００７－１３３４（２０１３）１１－００８９－０３
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ　ｍｉｃｅ
ＭＥＮＧ　Ｔｉａｎ－ｘｉｕ，ＸＩＥ　Ｌｉ－ｓｈａ，ＨＵＡＮＧ　Ｍａｏ－ｃｈｕｎ
Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓｅｖｅｎｔｙ－ｔｗｏ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ
ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｉｎｔｏ　ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｂｉｆｅｎｄａｔｅ，６００ｎｇ／ｇ）ａｎｄ　ｔｈｒｅｅ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｇｒｏｕｐｓ（１５．０，３０．０，６０．
０μｇ／ｇ）．Ａｌ　ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｂｙ　ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　１０ｄａｙｓ．Ｅｘｃｅｐｔ　ｆｏｒ　ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒｓ　ｗｅｒｅ
ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｌｉｖｅｒ　ｄａｍａｇｅ　ｍｏｄｅｌｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４．Ｔｈｅ　ＡＬＴ　ｌｅｖｅｌｓ　ＡＳＴ　ｌｅｖｅｌ，ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｌｉｖｅｒ　ｉｎｄｅｘ，ｓｐｌｅｅｎ　ｉｎｄｅｘ　ｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｏｆ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ
ｏｆ　ＡＬＴ，ＡＳＴ，ＭＤＡ　ａｎｄ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｄｅｘ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ＳＯＤ　ｗａｓ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ
＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ＡＬＴ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ－ｄｏｓｅ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ＡＳＴ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅ　ＭＤＡ　ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ
ｇｒｏｕｐｓ，ｗｉｔｈ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｂｉｆｅｎｄａｔｅ　ｇｒｏｕｐ，
ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＡＬＴ　ｏｆ　ｍｅｄｉｕｍ－ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ＡＳＴ　ｏｆ　ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ａｍｏｎｇ
Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｓ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ
ｍｉｃｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ　ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔ；ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ；ＣＣｌ４
［基金项目］广西壮族自治区科技攻关项目（０８１５００５－１－１２）
［作者简介］蒙田秀，女，硕士，助教，中药师，从事天然药物研究
工作。
［通讯作者］谢丽莎，硕士生导师，主任药师。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｏｎｇ１５０６４５２５９＠１２６．ｃｏｍ
　　岩黄连为罂粟科紫堇属植物石生黄堇（Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ
ｓａｘｉｃｏｌａ　Ｂｕｎｉｎｇ）的干燥根或全草，是黔、桂石灰岩山
区名贵中药材，分布局限于石灰岩山区，属石山特有
种［１］。岩黄连性凉味苦，具有清热解毒、利湿止痛、散
瘀消肿等功能［２－３］，临床用于治疗疮疖肿毒、急性黄疸
型肝炎、肝硬化、肝癌等疾病［４］。目前，国内外对岩黄
连的研究主要集中在岩黄连总生物碱的成分分析［５］、
引种栽培方面［６］，药理活性方面对实验性肝损伤是否
有保护作用尚未见报道。本研究旨在探讨岩黄连对四
氯化碳（ＣＣｌ４）致小鼠肝损伤的保护作用及其作用机
制，为该药的临床应用提供实验依据。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　动物　昆明种小白鼠７２只，雌雄兼用，体质量
（２２±２）ｇ，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合
格证号：ＳＹＫＧ（桂）２００３－０００５。
１．１．２　药物与试剂　岩黄连水提取物，自提；ＣＣｌ４ 分
析纯，武汉市江北化学试剂厂，批号为２０１０１１１２；联苯
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上海中医药杂志２０１３年第４７卷第１１期ＳＨ．Ｊ．ＴＣＭ　Ｎｏｖ．，２０１３；Ｖｏｌ．４７Ｎｏ．１１
双酯滴丸，浙江万邦药业有限公司，批号为１１０６０２；丙
氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）测定试剂盒，南京建成生物技
术研究所，批号为２０１１０５２２；天门冬氨酸氨基转移酶
（ＡＳＴ）测定试剂盒，南京建成生物技术研究所，批号为
２０１１１０１２；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）检测试剂盒，南京建
成生物技术研究所，批号为２０１１０９１３；丙二醛（ＭＤＡ）
检测 试 剂 盒，南 京 建 成 生 物 技 术 研 究 所，批 号
为２０１１１００８。
１．１．３　仪器　Ａｇｉｌｅｎｔ　８４５３紫外分光光度计，美国安
捷伦公司；ＴＤＬ８０－２Ｂ离心机，广西南宁博豪电子科技
有限公司；ＤＫ－Ｓ２２电热恒温水浴锅，上海精宏实验设
备有限公司。
１．２　分组、造模、给药及取材［７－８］　７２只小鼠随机分为
６组，即正常对照组、模型组、阳性对照组（联苯双酯，
６００μｇ／ｋｇ），以及岩黄连低、中、高剂量组（１５．０、３０．０、
６０．０μｇ／ｇ）。正常对照组及模型组灌胃给予０．９％
ＮａＣｌ溶液，其余各组灌胃给予相应的药物，给药容量
每１０　ｇ体质量０．２　ｍｌ，每天１次，连续给药１０天。末
次给药后开始禁食不禁水，８　ｈ后除正常对照组外，均
腹腔注射０．１％ＣＣｌ４ 花生油溶液（提前７天配制，每天
摇动１０　ｍｉｎ），给药容量每１０　ｇ体质量０．１　ｍｌ，继续禁
食不禁水，１６　ｈ后摘取眼球取血，分离血清，按照试剂
盒说明书测试血清内ＡＬＴ、ＡＳＴ含量［９］。摘眼球取血
后，快速处死小鼠，取肝脏、脾脏，４℃０．９％ＮａＣｌ溶液
冲洗，滤纸拭干后称重，计算肝脏系数和脾脏系数。另
取肝左叶相同部位一小块肝组织，用４℃０．９％ＮａＣｌ
溶液漂洗后制成１０％的肝匀浆，离心，取上清液，测定
各组肝组织中ＳＯＤ活性和 ＭＤＡ含量。
１．３　检测指标
１．３．１　ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＭＤＡ、ＳＯＤ含量　均按照试剂盒
说明书进行测定。
１．３．２　肝脏、脾脏指数
肝脏指数（ｍｇ／ｇ）＝肝脏重量（ｍｇ）／体质量（ｇ）
脾脏指数（ｍｇ／ｇ）＝脾脏重量（ｍｇ）／体质量（ｇ）
１．４　统计学方法　实验数据以ＳＰＳＳ　１３．０软件统计
分析。计量数据以ｘ±ｓ表示，采用ｔ检验。以Ｐ＜０．
０５为差异有统计学意义。
２　结果
２．１　血清ＡＬＴ、ＡＳＴ含量情况　与正常对照组比较，
模型组ＡＬＴ、ＡＳＴ含量显著升高，差异有统计学意义
（Ｐ＜０．０１），表明造模成功。与模型组比较，岩黄连高、
低剂 量 组 ＡＬＴ 含 量 降 低，差 异 有 统 计 学 意 义
（Ｐ＜０．０１），而中剂量组ＡＬＴ含量差异无统计学意义
（Ｐ＞０．０５）；岩黄连高、中、低剂量组ＡＳＴ含量降低，差
异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。与阳性对照组比较，岩黄
连中剂量组ＡＬＴ及岩黄连高剂量组ＡＳＴ差异有统计
学意义（Ｐ＜０．０５）。岩黄连高、中、低剂量之间差异无
统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表１。
表１　各组小鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ含量比较（ｎ＝１２，ｘ±ｓ）
组别 剂量（μｇ／ｇ） ＡＬＴ（Ｕ／Ｌ） ＡＳＴ（Ｕ／Ｌ）
正常对照组 － ３８±２０　 ９６±２１
模型组 － １２６±１７＊＊ ２０４±４３＊＊
阳性对照组 ６００　 ６８±３２＃＃ １５２±１２＃＃
岩黄连高剂量组 ６０　 ５９±３０＃ １１６±１４＃＃△
岩黄连中剂量组 ３０　 ８５±２８△ １３８±２７＃
岩黄连低剂量组 １５　 ６３±１８＃＃ １２５±１３＃＃
注：与正常对照组比较，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃ Ｐ＜０．０５，
＃＃Ｐ＜０．０１；与联苯双酯组比较，△Ｐ＜０．０５，△△Ｐ＜０．０１
２．２　肝组织中ＳＯＤ、ＭＤＡ含量情况　与正常对照组
比较，模型组ＳＯＤ含量明显降低（Ｐ＜０．０１）；与模型组
比较，各给药组ＳＯＤ的含量显著提高（Ｐ＜０．０１）。与
正常对照组比较，模型组肝组织 ＭＤＡ含量明显升高
（Ｐ＜０．０１）；与模型组比较，各给药组 ＭＤＡ含量降低，
差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。与阳性对照组比较，
岩黄 连 各 剂 量 组 ＳＯＤ、ＭＤＡ 含 量 差 异 不 明 显
（Ｐ＞０．０５）。岩黄连高、中、低剂量之间ＳＯＤ、ＭＤＡ含
量差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表２。
表２　各组小鼠肝组织中ＳＯＤ、ＭＤＡ 含量比较（ｎ＝
１２，ｘ±ｓ）
组别 剂量（μｇ／ｇ）ＳＯＤ（Ｕ／ｍｇ） ＭＤＡ（ｎｍｏｌ／ｇ）
正常对照组 － １１２．４±５．２　 ０．８４±０．０７
模型组 － ６８．２±７．５＊＊ ２．７７±０．０２＊＊
阳性对照组 ６００　 １０１．３±３．２＃ １．４２±０．０４＃
岩黄连高剂量组 ６０　 ９１．７±３．０＃ １．１６±０．０５＃
岩黄连中剂量组 ３０　 ８６．３±２．８＃ １．３８±０．０７＃
岩黄连低剂量组 １５　 ８３．２±６．８＃ １．２５±０．０３＃
注：与正常对照组比较，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜
０．０１
２．３　肝脏、脾脏指数情况　与正常对照组比较，模型
组小 鼠 的 肝 脏 指 数 升 高，差 异 有 统 计 学 意 义
（Ｐ＜０．０１）；与模型组比较，各给药组肝脏指数降低，差
异有统计学意义（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。与阳性对照组
比较，岩黄连高、中、低剂量肝脏指数差异无统计学意
义（Ｐ＞０．０５）。岩黄连高、中、低剂量之间比较肝脏指
数差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。各组间脾脏指数差
异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表３。
３　讨论
ＣＣｌ４ 是一种典型的肝毒剂，在肝微粒体细胞色素
Ｐ４５０作用下转化为三氯甲基自由基（·ＣＣｌ３）等。这些自
由基可引起脂质过氧化，导致细胞质内的ＡＬＴ和ＡＳＴ
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上海中医药杂志２０１３年第４７卷第１１期ＳＨ．Ｊ．ＴＣＭ　Ｎｏｖ．，２０１３；Ｖｏｌ．４７Ｎｏ．１１
进入血液，使血清中的ＡＬＴ及ＡＳＴ含量升高［１０］。
表３　各组小鼠肝脏、脾脏指数比较（ｎ＝１２，ｘ±ｓ）
组别 剂量（μｇ／ｇ） 肝脏指数（ｍｇ／ｇ） 脾脏指数（ｍｇ／ｇ）
正常对照组 － ４３．２６±４．２５　 ３．４８±０．６７
模型组 － ５６．２３±３．１４＊＊ ３．７４±０．２３
阳性对照组 ６００　 ４８．１２±３．５６＃ ３．１４±０．７８
岩黄连高剂量组 ６０　 ４７．５６±２．７５＃ ３．０２±０．７２
岩黄连中剂量组 ３０　 ５０．２８±２．７８＃＃ ３．５７±１．０３
岩黄连低剂量组 １５　 ５２．１２±４．２５＃＃ ３．７９±０．８２
注：与正常对照组比较，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜
０．０１
同时ＣＣｌ４ 还能减弱体内抗氧化酶（如ＳＯＤ）活性，致使
大量自由基无法清除，可进一步损伤肝细胞的结构，导
致肝细胞坏死。肝细胞内转氨酶含量约为血中含量的
１００倍，只要有１％的肝细胞坏死，就足以使血清中转
氨酶活力增加１倍。因此血清转氨酶（ＡＬＴ、ＡＳＴ等）
含量是肝细胞损伤的敏感指标［１１］。
本实验结果显示，岩黄连水提取物对ＣＣｌ４ 诱导的
急性肝损伤所致小鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ含量升高有显
著的降低作用，并且能够降低肝损伤小鼠的肝脏指数，
缓解肝脏肿胀。本实验结果亦表明，岩黄连提取物能
降低ＣＣｌ４ 引起肝损伤小鼠肝组织 ＭＤＡ含量，同时提
高肝组织ＳＯＤ活性，有效减轻肝脏脂质过氧化损伤，
增强肝细胞对ＣＣｌ４毒性的抵抗力，提示岩黄连对ＣＣｌ４
引起肝损伤小鼠具有保护作用且其作用可能与脂质过
氧化有关。
综上所述，岩黄连对ＣＣｌ４ 引起的急性肝损伤具有
一定的保护作用，其保肝作用机制可能是多环节的，尚
需进一步深入研究。
参考文献：
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编辑：季春来
收稿日期：２０１３－０８
櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍櫍
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