全 文 ：岩黄连药材的提取工艺研究
王　静 ,陆兔林 ,毛春芹 ,胡　芳 ,黄　玮
(南京中医药大学药学院 , 210046)
[摘　要 ] 　目的　正交实验优选岩黄连药材的最佳提取工艺。方法　以岩黄连中总生物碱 、脱氢卡维丁的含量为
指标 , 比较乙醇和酸水两种不同提取溶媒以及回流 、渗漉两种不同提取方法 ,采用 L9(34)正交设计 , 对影响岩黄连提取
工艺中的溶剂浓度 、溶剂用量 、提取时间 、提取次数等 4个因素进行优化筛选。结果　乙醇提取优于酸水提取 , 回流法提
取效果优于渗漉法。醇提最佳工艺条件为:用 75%乙醇提取 , 每次加醇量 10倍 ,提取 3次 ,每次提取时间 2 h。结论　优
选得到的工艺简便 、稳定 、可行。
[关键词 ] 　岩黄连;提取工艺;生物碱;脱氢卡维丁
[中图分类号 ] 　R282.71;R284.2　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2010)03-0360-04
OptimizationofExtractingTechnicsforIsolatingTotalAlkaloidsandDehydrocavidin
fromCorydalissaxicolaBunting
WANGJing, LUTu-lin, MAOChun-qin, HUFang, HUANGWei(SchoolofPharmacy, NanjingUniversityof
TraditionalChineseMedicine, Nanjing210046, China)
ABSTRACT　Objective　Tooptimizetheextractingtechnicsforisolatingtotalalkaloidsanddehydrocavidinfrom
CorydalissaxicolaBuntingbyorthogonaldesign.　Methods　CorydalissaxicolaBuntingwasextractedwithethanoloracidby
refluxandpercolation, respectively.Thenthefourfactorscausedthequantityandconcentrationofsolvents, extractingtimeand
frequencywereoptimized.　Results　Theethanolrefluxingprocesswasbetterthanotherprocessesforisolatingtotalalkaloids
anddehydrocavidinfromCorydalissaxicolaBunting.Theoptimalconditionwasasfolows:extractedthecrudedrugwith10times
more75% ethanolfor3 times(120 min/time).　Conclusion　Thisoptimizedextractionprocessissimple, stableand
feasible.
KEYWORDS　CorydalissaxicolaBunting;Extractingtechnics;Alkaloids;Dehydrocavidin
　　岩黄连为罂粟科植物石生黄堇(Corydalissaxicola
Bunting)的全草 ,是贵州 、广西高寒山区珍贵的中草药
材 。本品味苦 、性凉 ,具有清热解毒 、利湿 、镇痛止血之
功效 ,主治肝炎 、口舌糜烂 、火眼 、目豁 、痢疾 、腹泻 、腹
痛 、痔疮出血等 [ 1] 。岩黄连中主要有效成分是以脱氢
卡维丁为代表的生物碱类化合物 [ 2] ,这类化合物具有
潜在的抗乙型肝炎病毒(HBV)活性和肝保护活性[ 3] 。
笔者比较了乙醇和酸水两种不同提取溶媒以及回
流 、渗漉两种不同提取方法 ,采用 L9(34)正交设计 ,以
岩黄连中总生物碱 、脱氢卡维丁的含量为考察指标 ,对
影响岩黄连醇提工艺的因素水平进行研究 ,优选出最
佳提取工艺条件 。
1　仪器与试剂　
752型紫外 -可见分光光度计(上海光谱仪器有限
公司);Agilent1100高效液相色谱仪 (美国安捷伦公
[收稿日期 ] 　2009-01-05　　　[修回日期 ] 　2009 -
09-27
[作者简介 ] 　王　静(1985 -), 女 , 江苏南京人 , 在读硕
士 , 研究方向:中药 炮制及新药开发 研究。 电话:(0)
13951765802, Email:savva@163.com。
[通讯 作者 ] 　陆兔 林 , 教授 , 硕士生 导师 , E-mail:
lutuling2005@126.com。
司);FA1104型电子分析天平(上海精密科学仪器有
限公司)。脱氢卡维丁对照品(批号:111667-200601)
由中国药品生物制品检定所提供 ,供定量测定用。乙
腈为色谱纯;水为重蒸水(自制);其他试剂均为分析
纯 。岩黄连药材购自广西东兰县农业局 ,经南京中医
药大学药学院鉴定教研室鉴定为罂粟科植物石生黄堇
(CorydalissaxicolaBunting)的全草。
2　方法与结果　
2.1　岩黄连总生物碱的测定　
2.1.1　对照品溶液的制备　精密称取脱氢卡维丁对
照品 10.14 mg,置 100 mL量瓶中 ,加入 1%盐酸甲醇
溶液至刻度 ,摇匀 ,作为贮备液(101.4 μg· mL-1),备
用 。
2.1.2　供试品溶液的制备　精密称取岩黄连药材粉
末 0.2 g置 50 mL量瓶中 ,加入 1%盐酸甲醇溶液约
40 mL,超声 60 min,冷却 ,定容 ,摇匀 ,过滤 ,精密量取
续滤液 1.0mL至 25mL量瓶中 ,用 1%盐酸甲醇溶液
定容 ,即得。
2.1.3　标准曲线的绘制　精密量取对照品贮备液 ,以
1%盐酸甲醇溶液为溶剂 , 分别配制成为 2.028,
4.056, 6.084, 8.112, 10.140, 12.168 μg· mL-1的溶
液 ,以 1%盐酸甲醇溶液为空白 ,在 347 nm波长处测
·360· HeraldofMedicineVol.29 No.3March2010
定吸光度 ,以吸光度为纵坐标 ,对照品浓度为横坐标 ,
绘制标准曲线 。回归方程和相关系数分别为 Y=
0.076 9X-0.002 3, r=0.9995(n=6)。结果表明岩
黄连总生物碱在 2.028 ～ 12.168 μg· mL-1范围内呈
良好的线性关系 。
2.1.4　精密度实验 　取线性实验项下浓度为
8.112 μg·mL-1的对照品溶液 ,重复测定 6次 , 测得
吸光度的 RSD为 0.22%。
2.1.5　稳定性实验　取同一份供试溶液 ,依次于不同
时间测定紫外吸光度 ,在 12h内稳定 , RSD为 0.46%。
2.1.6　重复性实验　称取岩黄连药材粉末 6份 ,按上
述确定的供试品溶液制备方法进行制备 ,测定紫外吸
光度 ,标准曲线法计算含量 , RSD为 1.40%。
2.1.7　加样回收率实验　精密称取已知含量的岩黄
连药材粉末 0.1g,共 6份 ,置 50mL量瓶中 ,分别精密
加入脱氢卡维丁对照品贮备液 20mL,再加入 1%盐酸
甲醇溶液 20 mL,超声 60 min,冷却 ,定容 ,过滤 ,精密
量取续滤液 1.0mL至 25mL量瓶中 ,用 1%盐酸甲醇
溶液定容 ,即得。测定含量 ,平均回收率为 100.76%,
RSD为 1.23%。
2.1.8　样品测定方法　取供试品溶液 ,以 1%盐酸甲
醇溶液为空白 ,在 347nm波长处 ,依法测定吸光度 ,代
入回归方程算出供试品溶液中总生物碱的含量 ,计算 ,
即得。
2.2　脱氢卡维丁的测定　
2.2.1　色谱条件 　色谱柱为 KromasilC18柱
(250 mm× 4.6 mm, 5 μm);流 动 相:乙 腈 -
0.01mol·L-1磷酸二氢钾 (25：75, pH=5);检测波
长:347 nm;进样量:10 μL;柱温:30 ℃;体积流量:
1 mL· min-1;理论塔板数按脱氢卡维丁计算应不低于
3 000。
2.2.2　对照品溶液的制备　精密称取脱氢卡维丁对
照品 9.83 mg,置 10 mL量瓶中 ,加入甲醇至刻度 ,摇
匀 ,作为贮备液(983 μg·mL-1)。
2.2.3　供试品溶液的制备　将岩黄连药材粉碎 ,过孔
径 0.833 mm(20目)筛 ,取粉末 0.2 g,精密称定 ,置
50 mL量瓶中 ,加入甲醇 40 mL,超声处理 60 min,冷
却 ,定容 ,摇匀 ,过微孔滤膜(孔径 0.45 μm),取续滤
液作为供试品溶液。
2.2.4　线性范围考察　精密吸取对照品贮备液置量
瓶中 , 分别 配成 19.66, 39.32, 78.64, 98.30,
117.96 μg· mL-1的对照品溶液 ,吸取不同浓度对照品
溶液各 10 μL,进行分析测定。以对照品峰面积为纵坐
标 ,对照品浓度为横坐标 ,绘制标准曲线。回归方程和
相关系数为:Y=32.319X+6.920 9, r=0.999 7(n=
5),结果表明脱氢卡维丁在 0.019 66 ～ 0.117 96mg范
围内 ,其峰面积(Y)与浓度(X)呈良好的线性关系。
2.2.5　精密度实验　精密吸取 39.32 μg· mL-1对照
品溶液 10 μL,按上述色谱条件 ,连续进样 6次 ,脱氢
卡维丁峰面积的 RSD为 0.34%,表明仪器精密度良
好 。
2.2.6　稳定性实验　取同一供试品溶液分别在 0, 1,
2, 4, 8, 12h进样测定峰面积值 , RSD为 0.30%,表明
供试品溶液在 12 h内稳定。
2.2.7　重复性实验　称取岩黄连药材粉末 6份 ,按上
述供试品溶液的制备方法进行制备 ,并按上述色谱条
件测定 , 测得脱氢卡维丁含量为 1.23%, RSD为
1.46%,结果表明 ,在同一条件下 , 6次测得样品中脱
氢卡维丁含量一致 ,本方法重复性好 。
2.2.8　加样回收率实验　分别精密称取已知含量
(含脱氢卡维丁 1.23%)的岩黄连药材粉末 0.1g,共 9
份 ,置 50mL量瓶中 ,分别加入等同于样品中脱氢卡维
丁含量 80%, 100%, 120%的对照品 ,按上述供试品溶
液的制备方法制备样品 , 测定含量 , 平均回收率为
99.80%, RSD为 1.35%。
2.2.9　样品测定方法　分别精密吸取对照品溶液与
供试品溶液各 10 μL,注入高效液相色谱仪 ,测定 ,即
得 。高效液相色谱(HPLC)图见图 1。
　　图 1　阴性空白溶液(A)、脱氢卡维丁对照品 (B)、岩黄
连提取液(C)的 HPLC图　
1.脱氢卡维丁
Fig.1　HPLCchromatogramsofnegativecontrol(A),
dehydrocavidinereference substance(B) and ethanolic
extracted-liquidofCorydalissaxicolaBunting(C)
1.dehydrocavidine
2.3　不同提取溶媒的比较　取岩黄连药材 20g,分别
用 1%盐酸 、80%乙醇回流提取 ,每次 8倍量 ,共 2次 ,
每次 2 h, 合并提取液 ,过滤 ,备用。每种提取溶媒平
行 2份 。按拟定方法测定脱氢卡维丁 、岩黄连总生物
碱含量 。测定结果见表 1。
结果显示 , 80%乙醇提取比 1%盐酸提取所得到
的脱氢卡维丁的含量以及总生物碱含量高 ,因此拟用
80%乙醇作为提取溶媒 。
·361·医药导报 2010年 3月第 29卷第 3期
2.4　不同提取方式的比较　取岩黄连药材 20g,分别
用 80%乙醇溶液进行回流提取和渗漉提取 ,提取液分
别合并 ,备用 。每种提取方式各平行 2份。进行脱氢
卡维丁 、岩黄连总生物碱的测定 ,测定结果见表 2。
表 1　不同提取溶媒对脱氢卡维丁 、总生物碱提取量的比较
Tab. 1 　 Comparison of extraction yield of
dehydrocavidineandtotalalkaloidsbydifferentdissolvent
mg· g-1
提取溶媒 脱氢卡维丁含量 总生物碱含量
1%盐酸提取-1 7.57 35.52
1%盐酸提取-2 7.50 35.38
80%乙醇提取-1 10.42 39.72
80%乙醇提取-2 10.79 38.91
表 2　不同提取方式对脱氢卡维丁 、总生物碱提取量的比较
Tab. 2 　 Comparison of extraction yield of
dehydrocavidineandtotalalkaloidsbydifferentmethods
mg· g-1
提取方式 脱氢卡维丁含量 总生物碱含量
80%乙醇回流提取-1 10.58 39.02
80%乙醇回流提取-2 10.92 39.27
80%乙醇渗漉-1 6.18 19.15
80%乙醇渗漉-2 6.51 20.88
　　结果表明:以脱氢卡维丁及总生物碱含量为指标 ,
加热回流提取效果明显优于渗漉的提取效果 ,所以拟
定乙醇回流提取方法为正交实验方法 。
2.5　醇提正交实验　参考溶剂乙醇浓度 、用量 、回流时
间 、次数拟定四因素三水平正交实验 ,各取 20g药材 ,按
表 3因素水平表进行实验 ,提取液过滤 ,按上述样品测
定方法进行测定 。结果见表 4,方差分析见表 5, 6。
表 3　正交实验因素水平表　
Tab.3　Factorsandlevelsoforthogonaltest
因素
水平
乙醇浓度
(A)/%
乙醇用量
(B)/倍
回流次数
(C)
回流时间
(D)/h
1 65 8 1 1
2 75 10 2 2
3 85 12 3 3
　　实验数据方差分析结果表明:A、B、D因素对脱氢
卡维丁及总生物碱指标差异无显著性 , C因素对其差
异有显著性 ,结合直观分析 ,考虑到生产实际成本 ,故
确定醇提最佳工艺条件为 A2B2C3D2 ,即:用 75%乙醇
提取 ,每次加醇量 10倍 ,提取 3次 ,每次提取时间 2 h。
2.6　最佳工艺验证实验　取岩黄连药材 20 g,按正交
实验得到的最佳工艺条件提取进行验证 ,结果测得脱
氢卡 维 丁 、总 生 物 碱 的 含 量 分 别 为 9.87,
35.61 mg·g-1 ,与最佳工艺的平均含量相近 ,说明该工
艺稳定 、可行 。
表 4　L9(34)正交实验及结果　
Tab.4　ResultsofL9(34)orthogonaltest
序号 A B C D 脱氢卡维丁 /(mg·g-1)
总生物碱 /
(mg· g-1)
1 1 1 1 1 7.52 20.72
2 1 2 2 2 9.44 35.73
3 1 3 3 3 10.19 40.44
4 2 1 2 3 9.64 34.02
5 2 2 3 1 9.95 34.29
6 2 3 1 2 8.43 29.74
7 3 1 3 2 10.03 33.76
8 3 2 1 3 9.01 28.03
9 3 3 2 1 8.37 26.21
脱氢卡维丁
K1 27.14 27.18 24.96 25.84 CT=757.55
K2 28.02 28.41 27.45 27.90
K
3 27.41 26.98 30.17 28.83
SSi 0.13 0.40 4.53 1.57
总生物碱
K1 101.90 93.50 83.50 86.22 CT=9 213.12
K2 98.06 98.06 95.97 99.23
K3 88.00 96.40108.49102.50
SSi 34.34 3.55104.11 49.41
表 5　脱氢卡维丁方差分析表　
Tab.5　Varianceanalvsisfordehydrocavidine
方差来源 SSi F 均方 F值 显著性
每次用量(B) 0.40 2 0.20 2.95 P<0.05
提取次数(C) 4.53 2 2.26 33.69 P>0.05
提取时间(D) 1.57 2 0.79 11.68 P>0.05
误差 A
　(乙醇浓度) 0.13 2 0.07
　　F1-0.05(2, 2)=19.00
表 6　总生物碱方差分析表　
Tab.6　Varianceanalvsisfortotalalkaloids
方差来源 SSi F 均方 F值 显著性
乙醇浓度(A) 34.34 2 17.17 9.70 P>0.05
提取次数(C) 104.11 2 52.05 29.34 P<0.05
提取时间(D) 49.41 2 24.71 13.93 P>0.05
误差 B
　(每次用量) 3.55 2 1.77
　　F
1-0.05(2, 2)=19.00
3　讨论　
岩黄连中的生物碱类成分(以脱氢卡维丁为主)
性质稳定 ,在热 、酸 、碱等条件下均不会降解 ,条件温和
的提取方法如渗漉不能将小檗碱类生物碱提取完全 ,
因此 ,采用加热回流法 ,以最大限度地提取岩黄连中的
小檗碱类成分。
根据文献研究报道 ,季铵碱类生物碱大多采用酸
水或浓度较高的乙醇提取 ,笔者研究表明乙醇提取结
果比酸水好 ,可能乙醇提取可以先将大类成分提取出
·362· HeraldofMedicineVol.29 No.3March2010
来 ,而酸水提取率较低 ,但具体原因需进一步研究。
关于岩黄连的提取工艺研究方面的文献报道很
少 ,笔者采用正交实验 ,对影响岩黄连中小檗碱类成分
醇提工艺的各种因素进行考察 ,优选出最佳提取工艺
条件 ,对实际生产有一定的指导意义 。
[ DOI] 　10.3870/yydb.2010.03.032
[参考文献 ]
[ 1] 　国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草(第 3册)
[ M] .上海:上海科学技术出版社 , 1999:639.
[ 2] 　柯珉珉.岩黄连有效成分的研究 [ J] .药学通报 , 1980, 15
(6):41.
[ 3] 　JANBAZAKH, GILANIAH.Studiesonpreventiveand
curative efects of berberine on chemical-induced
hepatotoxicityinrodents[ J] .Fitoterapia, 2003, 71(1):
25-33.
甲硝唑薄膜衣片的制备与质量评价
吴昌富 ,申献玲 ,肖　峰
(湖北省荆州市第一人民医院药学部 , 434000)
[摘　要 ] 　目的　探讨甲硝唑薄膜衣片的制备方法。 方法　采用喷雾法给甲硝唑片包裹羟丙基甲基纤维素薄膜
衣。按《中华人民共和国药典》 2005年版中对甲硝唑片的要求与方法对甲硝唑薄膜衣片进行检测。结果　检测指标均
符合相关规定;两种样品的溶出参数经过 t检验 , t50、td、M值均差异无显著性。结论　甲硝唑薄膜衣片的衣膜对药物的
溶出影响不显著 , 制备工艺简单 , 容易操作。
[关键词 ] 　甲硝唑;薄膜衣片;羟丙基甲基纤维素
[中图分类号 ] 　R978.19;TQ460.6　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2010)03-0363-02
　　甲硝唑片给药途径多为口服 ,为改善口感 ,笔者通
过给甲硝唑片包裹以羟丙基甲基纤维素(HPMC)为主
要衣材的薄膜衣 [ 1] ,掩盖苦味 。按 《中华人民共和国
药典》2005年版规定 ,在崩解时限 、含量 、溶出度等方
面 ,对两种样品(甲硝唑片和甲硝唑薄膜衣片 ,下同)
分别测定 ,通过对比 ,以评价甲硝唑薄膜衣片的质量 。
1　材料与仪器　
甲硝唑原料药(宜都东阳光制药有限公司 ,批号:
0501164);甲硝唑对照品(中国药品生物制品检定所 ,
批号:100191-200305);HPMC(规格 E30,湖州展望天
明药业有限公司 ,批号:0608027);ZP-19A旋转压片机
(中南制药机械厂);调速糖衣锅 (湖北荆州振兴医疗
器械厂改装);ZRS-4智能溶出实验仪(天津大学无线
电厂);BJ602片剂崩解仪(北京医疗设备四厂);UV-
2201紫外分光光度计(日本岛津公司)。
2　方法与结果　
2.1　甲硝唑片的制备　甲硝唑 0.2g,淀粉 、硬脂酸镁
适量 ,将甲硝唑 、淀粉混匀后加适量淀粉浆湿法制粒 ,
烘干 ,整粒后加适量硬脂酸镁混匀 ,直径 9.5 mm,浅凹
[收稿日期 ] 　2009-06-08　　　[修回日期 ] 　2009 -
08-20
[作者简介 ] 　吴昌富(1952 -), 男 , 湖北松滋人 , 主管药
师 , 研究方向:医院制剂。电话:0716 -8112773 , E-mail:sxlzizi
@sina.com。
冲膜压片即得 ,片质量约 0.3 g[处方来源为湖北省荆
州市第一人民医院制剂室 , 批准文号:鄂药制字
(2001)第 LX02-49号 ] 。
2.2　甲硝唑薄膜衣片的制备　
2.2.1　包衣液的准备　取纯化水 150 mL置容器中 ,
将 HPMC15g撒布在水中浸泡 ,不定时搅动 ,使其成
为无白点胶状物 ,另取聚乙二醇(相对分子质量 4 000)
15 g,用适量乙醇溶解后再与以上胶状物混合 ,加乙醇
至 1 000 mL,搅匀 ,过滤即得 。
2.2.2　包衣　取 “2.1”中甲硝唑片置包衣锅中 ,调整
转速 4 ～ 6r·min-1 ,用喷枪将上述包衣液喷雾在滚动
的片芯上 ,吹适宜温度热风干燥。在不粘连情况下可
连续喷雾 、吹热风干燥 。反复操作至衣膜达到一定厚
度 ,停止喷雾 ,干燥后继续吹风使药片至室温取出 ,置
干燥器中放置 >24 h即得。衣膜厚度控制在使片芯
增质量 1% ～ 2%。
2.3　两种样品的含量 、崩解时限测定与比较　甲硝唑
片的质量控制按 《中华人民共和国药典 》2005年版甲
硝唑片项下的规定进行 [ 2] 。甲硝唑薄膜衣片的崩解
时限按 《中华人民共和国药典 》2005年版崩解时限检
查法进行测定 [ 2] 。含量测定参照甲硝唑片含量测定
法 ,取甲硝唑薄膜衣片 10片 ,精密称定 ,研细 ,精密称
取适量(约相当于甲硝唑 50 mg),置 100 mL量瓶中 ,
加盐酸溶液(9※1 000)约 80 mL,微温使甲硝唑溶解 ,
·363·医药导报 2010年 3月第 29卷第 3期