全 文 ：ChineseJournalofNewDrugs2009, 18(9)
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中国新药杂志 2009年第 18卷第 9期
[作者简介 ] 　高春华 ,女 ,讲师 ,硕士研究生 ,主要从事中药制剂分析
研究。联系电话:15940654201, E-mail:gchgch555@ 163.com。
·实验研究·
丁香油和高良姜油对阿魏酸透皮吸收的促进作用
高春华 ,郭伟英 ,张亚秋 ,赵　咏
(辽宁医学院药学院 ,锦州 121001)
　　[摘要 ] 　目的:研究丁香油和高良姜油对阿魏酸透皮吸收的促进作用 。方法:采用离体昆明种小鼠皮肤为
渗透屏障 ,以阿魏酸为指标成分 ,应用 Tp-6型透皮吸收扩散仪和 HPLC检测方法 ,考察丁香油 、高良姜油对阿魏
酸透皮吸收的促进作用。结果:丁香油 、高良姜油对阿魏酸的透皮吸收均有一定的促进作用;但丁香油 、高良姜
油与乙醇合用对阿魏酸的透皮吸收无协同作用。结论:丁香油 、高良姜油能够促进阿魏酸的透皮吸收。
[关键词 ] 　丁香油;高良姜油;阿魏酸;促渗剂
[中图分类号 ] R943.1;R283.5　[文献标识码 ] A　[文章编号 ] 1003-3734(2009)09-0844-03
PromotingeffectofClovebudoilandGalangaloilon
percutaneousabsorptionofferulicacid
GAOChun-hua, GUOWei-ying, ZHANGYa-qiu, ZHAOYong
(SchoolofPharmacy, LiaoningMedicalColege, Jinzhou121001, China)
[ Abstract] 　Objective:TostudythepromotingefectofClovebudoilandGalangaloilonpercutaneousab-
sorptionofferulicacid.Methods:ThepenetrationexperimentwasperformedontheTp-6difusionceldeviceini-
solatedmouseskin, andferulicacidwasusedasanindexanddeterminedbyHPLCmethod.Results:Clovebud
oilandGalangaloilpossessedasignificantpromotingefect, whichwerestrongerthanAzoneonpercutaneousab-
sorptionofferulicacid.ClovebudoilandGalangaloilincombinationwith10% ethanolonenhancingthepercuta-
neousabsorptionofferulicaciddidnotrevealanycooperativeefect.Conclusion:ClovebudoilandGalangaloil
canbeusedtoenhancethepercutaneousabsorptionofferulicacid.
[ Keywords] 　Clovebudoil;Galangaloil;feruliaacid;penetrationenhancers
　　经皮给药制剂具有避免肝脏首过效应 、维持恒
定的血药浓度及给药方便等优点 ,但由于皮肤的屏
障作用 ,很多药物穿过皮肤的通透率很低 。透皮吸
收促渗剂的应用 ,已成为增加药物透皮吸收的首选
方法。近年来 ,从中药宝库中寻找透皮吸收促渗剂
已日益引起人们的重视 。
丁香挥发油是桃金娘科植物丁香树 Eugenia
caryophylataThunb.的干燥花蕾经水蒸汽蒸馏后得
到的无色液体 ,丁香酚为其中的主要成分 。高良姜
油是从姜科多年生草本植物高良姜 Alpiniaoficina-
rumHance的根茎经水蒸气蒸馏后得到的无色液
体 。沈崎等 [ 1 -3]报道丁香油 、高良姜油对 5-氟脲嘧
啶 、苯甲酸的透皮吸收均有促进作用。阿魏酸(feru-
licacid)存在于当归 、川芎等多种中药中 ,现已人工
合成 ,属桂皮酸衍生物 ,具有扩张冠脉血管 、增加冠
脉流量 、改善心肌缺血 、抗动脉粥样硬化 、抗血小板
凝集和抗血栓等多种心脑血管药理作用 。阿魏酸口
服易吸收但代谢快 ,半衰期短 [ 4] ,必须多次给药 。
实验证明在 Valia-chine水平扩散池中 ,阿魏酸可以
透过离体裸鼠皮肤 , Azone对其有一定的促透作
用[ 5] 。本实验以丁香油 、高良姜油作为促渗剂 , 并
与氮酮做参照 ,以阿魏酸为指标成分 ,考察丁香油 、
高良姜油对阿魏酸透皮吸收的影响 ,以开发更为有
效的阿魏酸透皮吸收促渗剂 ,也为含有阿魏酸的中
药如当归 、川芎等开发新的外用制剂提供实验依据 。
材料与方法
1　动物 、仪器与试药
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中国新药杂志 2009年第 18卷第 9期
1.1　动物　云南昆明种小鼠 ,雌雄不拘 ,体重 20 ～
25g,动物合格证号 SCXK(辽)2003-0007(辽宁医
学院实验动物中心提供)。
1.2　仪器　高效液相色谱系统(日本 HITACHI系
列);KQ-100A型超声波清洗器(昆山市超声仪器
有限公司);FA2004N电子天平(上海精密科学仪器
有限公司)
1.3　试药　阿魏酸对照品(中国药品生物制品检
定所 ,批号:0773-9910);阿魏酸(上海化学试剂公
司 ,批号:20031218);氮酮(天津市博达化工有限公
司 ,批号:20030524);丁香 、高良姜(安徽省亳州市
中药饮片厂 ,由辽宁中医药大学中药鉴定教研室鉴
定);丁香油 、高良姜油(自提);色谱甲醇(天津市科
密欧化学试剂有限公司);其余试剂均为分析纯 。
2　体外透皮吸收实验方法
取昆明种小鼠 ,断颈处死后 ,用电推剪小心剪去
背部鼠毛 ,确保角质层完好无损 ,分离背部皮肤 ,除
去皮下黏液组织和脂肪组织 ,用蒸馏水 、生理氯化钠
溶液冲洗数遍 ,直至洗液澄清为止 ,浸入生理氯化钠
溶液中 ,密封 ,置冰箱冷藏保存备用。实验时取离体
鼠皮固定于扩散池中间 ,使角质层面向供给池 ,供给
池中加入约 10 mL释放液 ,接收池精密加入 16mL
生理氯化钠溶液。扩散面积 S为 2.27cm2。池内循
环水温度为(37±0.5)℃,恒速磁力搅拌。加样平
衡 30min开始计时 ,分别于 1, 2, 4 , 6, 8, 10h取样 ,
每次取样 0.4mL,同时补充同量预温 37℃的生理
氯化钠溶液。所取样品微孔滤膜 (0.45 μm, Υ13
mm)过滤后 ,用 HPLC检测模型药物阿魏酸的峰面
积 ,代入标准曲线回归方程 ,求得阿魏酸浓度(Ci)。
按下式计算通过单位面积的累积渗透量 (Qs, μg·
cm-2)及稳态渗透速率(Jss, μg·cm-2·h-1)。
Cn校 =Cn测 +Vi/V∑Ci
Cn校 =JssAt/V+截距
Qs=Cn校V/A
其中:Cn校:校正后的药物浓度;Cn测:实际测得
的药物浓度;∑Ci:该取样点前各点的测定浓度之
和;Jss:稳态渗透速率;A:扩散池横截面积;V:接受
池中接受液体积;Vi:第 i次取样的体积 (0.4mL);
Qs:单位面积的累积渗透量 。
药物的渗透系数(Kp)从下式计算:Kp=Jss/C0 ,
其中 C0为供给池中供试液药物浓度 。
增渗倍数(ER)可从下式得到 ER=Kp/Kp0 ,
Kp为加促渗剂后药物的渗透系数 , Kp0为药物固有
的渗透系数 。
3　阿魏酸 HPLC分析测试方法
3.1　色谱条件　色谱柱为 ODS-C18(200mm×4.6
mm, 5μm),流动相为甲醇 -0.5%乙酸(45∶55),流
速为 1.0mL·min-1 ,检测波长 322nm。
3.2　标准曲线的制作　精称阿魏酸对照品 5.0mg,
置 50mL棕色量瓶中 ,用流动相定容 。精密吸取上
述溶液 0.1, 0.5, 1.0 , 2.5, 5.0, 10.0mL于 10mL棕
色量瓶中 ,用流动相定容 ,摇匀 ,备用 。在已确定好
的色谱条件下取 10μL进样 ,以峰面积为纵坐标 ,以
浓度为横坐标作线性回归 ,求得回归方程为 y=
3.799×105 -2.267×104 , r=0.999 9。阿魏酸溶液
浓度在 1 ～ 100mg·L-1范围内具有良好的线性关系。
3.3　精密度实验　50mg·L-1对照品溶液连续测定
6次 , RSD=0.53%(n=6)。
3.4　稳定性实验　测 50mg·L-1样品溶液的日内
稳定性 ,每 2.5h测 1次 ,共测 6次 , RSD=0.49%
(n=6),说明 15h样品溶液稳定性良好。
3.5　回收率实验　在 10h空白皮肤通过液中精密
加入一定量的阿魏酸对照品 ,测定浓度 ,计算平均回
收率 =99.20%, RSD=0.27%(n=6)。
结　　果
1　丁香油作为促渗剂对阿魏酸透皮吸收的影响
分别以含 1%, 2%, 3%丁香油 、2%丁香油 +
10%乙醇的阿魏酸溶液(1g·L-1)为供试液 ,以不含
促渗剂 、1%氮酮的阿魏酸溶液作为对照组 ,进行透
皮吸收实验 。促渗剂在不同时间对阿魏酸的累积渗
透浓度作图 ,见图 1。将曲线的直线部分(2 ～ 10h)
进行回归 ,累积渗透浓度与时间呈线性关系 ,其关系
符合零级动力学过程 ,该直线的斜率即为 Jss。样品
用 HPLC检测求得阿魏酸浓度(Ci),并以扩散平衡
后的矫正浓度对时间作图 ,计算 Kp和 ER。结果见
图 1和表 1。
图 1　丁香油促进阿魏酸的透皮吸收图
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表 1　丁香油对阿魏酸透皮吸收的影响 n=8, x±s
分　组　 透皮吸收曲线回归方程 r Kp/10-3cm·h-1 ER
空白对照 C校 =0.675t-0.241 0.994 7 4.75±0.22
氮酮对照 C校 =1.785t-0.774 0.993 5 12.57±0.76 2.65
1%丁香油 C校 =4.076t-2.967 0.992 9 28.70±4.22ab 6.04
2%丁香油 C校 =10.072t-3.722 0.992 4 70.93±2.68a 14.93
3%丁香油 C校 =7.958t-5.710 0.988 2 56.04±3.66ab 11.80
2%丁香油 +10%乙醇 C校 =7.861t-3.044 0.993 8 55.36±3.70b 11.65
　　与氮酮对照组比较 , a:P<0.01;与 2%丁香油比较 , b:P<0.01
　　由表 1和图 1可知 ,与氮酮对照组相比 , 3种浓
度的丁香油均可显著提高阿魏酸的 Kp(P<0.01),
表明 1%, 2%和 3%丁香油对阿魏酸的透皮吸收均
有显著的促进作用;其中 , 2%丁香油对阿魏酸透皮
吸收的促进作用最强 。同时 ,与 2%丁香油相比 ,
2%丁香油与 10%乙醇合用的 Kp显著降低 (P<
0.01),说明 2%丁香油与 10%乙醇合用对阿魏酸的
透皮吸收无协同作用。
2　高良姜油作为促渗剂对阿魏酸透皮吸收的影响
分别以含 2%高良姜油 、3%高良姜油 、2%高良姜
油 +10%乙醇的阿魏酸溶液(1g·L-1)为供试液 ,以不
含促渗剂 、1%氮酮的阿魏酸溶液作为对照组 ,进行透
皮吸收实验。促渗剂在不同时间对阿魏酸的累积渗透
浓度作图 ,计算渗透系数 Kp和 ER。结果见图 2和表 2。
图 2　高良姜油促进阿魏酸的透皮吸收图
表 2　高良姜油对阿魏酸透皮吸收的影响 n=8, x±s
分　组　 透皮吸收曲线回归方程 r Kp/10-3cm·h-1 ER
空白对照 C校 =0.675t-0.241 0.994 7 4.75±0.22
氮酮对照 C校 =1.785t-0.774 0.993 5 12.57±0.76 2.65
高良姜油 C校 =4.866t-2.731 0.993 0 34.26±2.26a 7.21
高良姜油 C校 =3.707t-2.867 0.986 4 26.10±2.16ab 5.49
2%高良姜油 +10%乙醇 C校 =3.515t-3.334 0.990 8 24.75±1.81b 5.21
　　与氮酮对照组比较 , a:P<0.01;与 2%高良姜比较 , b:P<0.01
　　由表 2和图 2可知 ,与氮酮对照组相比 , 2%和
3%高良姜油均可提高阿魏酸的 Kp(P<0.01),表
明 2%和 3%高良姜油对阿魏酸的透皮吸收均有一
定的促进作用;并且 2%高良姜油对阿魏酸透皮吸
收的促进作用强于 3%高良姜油(P<0.01)。同时
与 2%高良姜油相比 , 2%高良姜油与 10%乙醇合用
的 Kp显著降低(P<0.01),说明 2%高良姜油与
10%乙醇合用对阿魏酸的透皮吸收也无协同作用 。
讨　　论
笔者对加样平衡时间 0, 10, 20和 30min进行
考察 ,发现在加样平衡时间 30min开始计时透皮吸
收曲线的线性良好 ,最终确定本实验在加样平衡 30
min开始计时。
丁香油 、高良姜油具有止痛 、温里 、散寒的功能 ,
发挥着促渗 、治疗的双重功能 ,并且刺激性小 、廉价
易得。本研究发现 ,丁香油 、高良姜油对阿魏酸的透
皮吸收均有不同程度的促进作用 ,其中 2%丁香油
对阿魏酸透皮吸收的促进作用最强;同时丁香油 、高
良姜油与乙醇合用对阿魏酸的透皮吸收均无协同作
用。丁香油 、高良姜油影响阿魏酸透皮吸收的机制
还有待进一步研究。
[ 　参　考　文　献　]
[ 1] 　沈崎 ,蔡贞贞 ,徐莲英 ,等.中药丁香促进对 5-氟脲嘧啶透皮吸
收的作用研究 [ J] .中草药 , 1999, 30(8):601-602.
[ 2] 　沈崎 ,胡晋红 ,徐莲英.肉桂等 3种挥发油对苯甲酸透皮吸收
的影响 [ J].中国医院药学杂志 , 2001, 21(4):197-199.
[ 3] 　沈崎 ,李文姬 ,徐莲英.高良姜油等中药对 5-氟尿嘧啶的促渗
作用 [ J].中药材 , 2000, 23(11):697-699.
[ 4] 　常明向 ,徐莲英 ,陶建生.阿魏酸钠大鼠体内药物动力学研究
[ J].西北药学杂志 , 1995, 10(2):81-83.
[ 5] 　魏莉 ,蔡贞贞 ,徐莲英.阿魏酸透皮吸收的实验研究 [ J].中成
药 , 1998, 20(6):1-2, 50.
编辑:朱振家 /接受日期:2008-08-22