全 文 ：药王茶总黄酮含量测定分析
　收稿日期：２０１１－１０－２３
　作者简介：白吉庆（１９７７－），男，陕西洛南县人，讲师，主要从事中草药资源开发与利用研究。
　通讯作者：：王小平。
白吉庆１，王小平１，王　媚１，许建强２
（１．陕西中医学院，陕西 咸阳　７１２０４６；２．陕西太白山天然植物开发有限公司，陕西 西安　７１００７５）
摘　要：目的：测定药王茶中总黄酮的含量，为药王茶的产地加工及质量控制提供参考。方法：采用分光光度
法测定药王茶中总黄酮的含量，以芦丁作为对照品，在硝酸铝－亚硝酸钠显色后以分光光度计在５００ｎｍ测
定。结果：５批药王茶中总黄酮的含量均在２０％以上，经统计分析，蒸品高于生品；海拔对总黄酮含量的影响
无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；８月份高于６月份（（Ｐ＜０．０５），高于７月份（（Ｐ＜０．０１）。结论：测定结果线性良好，
能反应总黄酮含量情况，蒸制能提高药王茶总黄酮含量，不同采收月份对药王茶总黄酮含量有影响，药王茶总
黄酮可以作为其质量控制指标之一。
关键词：药王茶；总黄酮；分光光度法
　　药王茶，又名观音茶，为蔷薇科委陵菜属植物
华西 银 腊 梅 Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａ　ａｒｂｕｓｃｕｌａ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．
ｖｅｉｔｃｈｉ（Ｗｉｌｓ．）Ｔ．Ｎ．Ｌｉｏｕ的干燥叶及花。生长于
太白山海拔１　８００－３　０００ｍ的高山坡上。具有清
热、健胃、调经的功效，用于暑热眩晕、胃气不和、滞
食及妇女月经不调等症。相传自唐孙思邈始用为
保健茶喝，现为太白山特色中草药之一，并在当地
作为名贵保健茶饮［１］。关于药王茶中化学成分的
研究报道较少，为更好的开发利用这一药用资源，
根据该类植物多含有黄酮类成分的特征［２］，作者对
药王茶中总黄酮含量进行了测定，旨在为药王茶的
产地加工和质量控制提供实验依据。
１　仪器及材料
１．１　仪器
ＵＶ７５０紫外可见分光光度计（上海精密科学
仪器有限公司）；８９５３Ｄｉｅｔｉｋｏｎ型电子分析天平
（瑞士，精度０．１ｍｇ）；ＫＱ－４００ＫＤＥ型高功率数
控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）等。
１．２　试剂及药品
乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、石油醚
（６０℃－９０℃）等均为分析纯，芦丁对照品（１０００８０
－２００７０７）由中国药品生物制品鉴定所提供。药
王茶由陕西太白山天然植物开发有限公司提供，
样品经陕西中医学院白吉庆鉴定为华西银腊梅
Ｐ．ａｒｂｕｓｃｕｌａ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．ｖｅｉｔｃｈｉｉ（Ｗｉｌｓ．）Ｔ．Ｎ．
Ｌｉｏｕ。
２　方法与结果
２．１　芦丁对照品标准曲线的绘制［３，４］
精密称取无水芦丁对照品２０．５６ｍｇ，置１００
ｍｌ的量瓶中，加７０％乙醇至刻度，摇匀，即得芦丁
对照品溶液。精密吸取芦丁对照品溶液１．０，１．５，
２．０，２．５，３．０，３．５，４．０ｍｌ，分别置１０ｍｌ量瓶中，加
５％的亚硝酸钠０．４ｍｌ，摇匀，放置６ｍｉｎ，加１０％
硝酸铝０．４ｍｌ，摇匀，放置６ｍｉｎ，加４％的氢氧化
钠４ｍｌ，加水稀释至刻度，摇匀，放置１５ｍｉｎ，以相
应试剂为空白，按紫外－可见分光光度法（《中国药
典》２０１０年版一部附录ＶＡ），在５００ｎｍ处测定吸
光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。绘制标
准曲线。Ｙ＝１１．９８７Ｘ－０．０８６９，ｒ＝０．９９９８，总黄酮
（以芦丁计）浓度在２０．５６－８２．２４μｇ／ｍｌ范围内与
吸光度线性关系良好。
２．２　供试品溶液的制备
取药王茶粉末１ｇ，精密称定，分别置于具塞
三角瓶中，加３０ｍｌ石油醚（６０－９０℃），超声３０
ｍｉｎ，弃去石油醚液，药渣挥干石油醚后，精密加
入６０％乙醇３０ｍｌ，称定重量，超声３０ｍｉｎ，放置
至室温，补足重量，过滤，精密吸取续滤液１ｍｌ，
置１０ｍｌ量瓶中，加６０％乙醇至刻度，摇匀，即
得。
２．３　方法学考察
２．３．１　稳定性试验　取同一供试品溶液，分别在
０ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、５ｈ，按“２．１”项下的方法测定吸
·８１· 陕　西　农　业　科　学 ２０１２（２）
光度，其ＲＳＤ为０．７％，表明供试品溶液在５ｈ内
是稳定的。
２．３．２　重复性试验　取同一批供试品６份，按
“２．２”项下的方法制备供试品溶液，按“２．１”项下
的方法测定吸光度，ＲＳＤ为０．８％，结果表明重复
性符合要求。
２．３．３　精密度试验　取同一供试品溶液，按
“２．１”项下的方法测定吸光度，连续测定５次，其
ＲＳＤ为０．９％。表明仪器精密度良好。
２．３．４　加样回收试验　取已知含量的样品适量，
精确称定，精密加入一定量的对照品，按“２．２”项
下的方法制备供试品溶液，测定其吸光度，计算回
收率。结果见表１。
２．４　供试品总黄酮测定
精确吸取各样品溶液１ｍｌ，置１０ｍｌ量瓶中，
按“２．１”项下的方法测定吸光度，计算样品中总黄
酮含量，使用ＳＰＳＳ１８．０统计学软件进行ｔ检验，
具体结果见表２。
表１　加样回收率
样品中的含量（ｍｇ） 加入芦丁的量（ｍｇ） 测得的总量（ｍｇ） 回收率（％） 平均回收率（％）
０．３４０７　 ０．４１１２　 ０．７５０２　 ９９．５８６５
０．３１８３　 ０．４１１２　 ０．７２０２　 ９７．７３８３
０．３５６９　 ０．４１１２　 ０．７７１６　 １００．８５１１　 ９９．７４
０．３６９５　 ０．４１１２　 ０．７８２４　 １００．４１３４
０．３４８８　 ０．４１１２　 ０．７６０５　 １００．１２１５
表２　药王茶中总黄酮含量测定结果（ｎ＝３）
编号 采样时间（年·月） 产地海拔及加工 总黄酮含量％（以芦丁计，Ｘ±ＳＤ）
１　 ２０１０·６ 中海拔△；生晒 ２２．９０±０．９５
２　 ２０１０·６ 中海拔；蒸制 ２５．２２±０．６３＃
３　 ２０１０·７ 中海拔；生晒 ２２．２４±１．２０＊
４　 ２０１０·７ 高海拔△△；生晒 ２３．５７±０．８２▲
５　 ２０１０·８ 中海拔；生晒 ２５．７９±０．８５＊＊ ■■
　　注：△２　０００ｍ＜中海拔＜２　５００ｍ，△△ 高海拔＞２　８００ｍ；＃１号样品与２号样品比较Ｐ＜０．０５；＊１号样品与３
号样品比较Ｐ＞０．０５；＊＊１号样品与５号样品总黄酮含量比较 Ｐ＜０．０５；■３号样品与５号样品总黄酮含量比较 Ｐ＜
０．０１；▲３号样品与４号样品比较Ｐ＞０．０５。
　　结果表明，５批药王茶的总黄酮含量均在
２０％以上。１，２号是蒸制前后的２个样品，从测
定结果看蒸制品高于生晒品，统计分析（Ｐ＜
０．０５），表明蒸制品显著高于生品总黄酮含量。１，
３，５号样品是中海拔所采药王茶的生晒品，从测
定结果看，５号含量最高，统计分析，１号与３号无
统计学意义（Ｐ＞０．０５），１号与５号有显著统计学
意义（Ｐ＜０．０５），３号与５号有极显著统计学意义
（Ｐ＜０．０１），表明采收月份对药王茶总黄酮含量
有影响。通过对３，４号不同海拔样品总黄酮的测
定结果分析（Ｐ＞０．０５），无统计学意义，表明海拔
高度对同期采收药王茶总黄酮含量影响不显著。
３　结论与讨论
黄酮类化合物又称生物黄酮或植物黄酮，是植
物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产
物，黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿
瘤等广泛的生物活性和多种药理活性，近年来特别
是对黄酮类成分在心血管、脑血管、肿瘤等方面的
研究已经比较深入，此外黄酮类物质还有低毒性的
特点，因此长期以来一直是天然药物和功能性食品
研究开发的热点［５］。药王茶总黄酮含量蒸品高于
生品，表明产地加工对总黄酮溶出具有促进作用或
蒸制有利于保护总黄酮在药王茶中存在状态。对
同海拔高度范围不同月份采收药王茶中总黄酮含
量分析表明，所采样品中以８月份为高，药王茶采
收期应考虑黄酮含量变化。对同期不同海拔高度
药王茶总黄酮含量分析，表明海拔高度对总黄酮成
分积累影响不显著。实验对药王茶总黄酮含量的
测定依据现行药典方法，结果真实可靠，反映了客
观实际，结合总黄酮药理作用考察，药王茶总黄酮
可作为药王茶质量考察指标之一。
参 考 文 献：
［１］　中国科学院西北植物研究所·秦岭植物志（第一卷
第一册）［Ｍ］·北京：科学出版社，１９７４：５４７－５４９．
［２］　任燕利，曲玮，梁敬钰等．委陵菜属植物研究进展
［Ｊ］．海峡药学，２０１０，２２（５）：１－８．
［３］　国家药典委员会．中华人民共和国药典一部［Ｍ］．．
北京：化学工业出版社，２０１０：３３３－３３３．
［４］　王小平，白吉庆．藤梨根总黄酮提取方法及含量测定
研究［Ｊ］．陕西中医学院学报，２００８，３１（３）：６５－６６．
［５］　罗艺萍．黄酮类化合物的药理活性研究进展［Ｊ］．亚
太传统医药，２０１０，６（４）：１２６－１２８．
·９１·白吉庆等：药王茶总黄酮含量测定分析