全 文 :194
2016年第9期
中国食品添加剂
China Food Additives分析测试
骏枣枣吊不同部位枣叶总黄酮、
总酚含量的动态变化
邹玲,冯彬,白红进 *
(塔里木大学生命科学学院 / 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室,
阿拉尔 843300)
摘 要:以骏枣叶片为试材,分别测定了枣吊叶片中不同发育阶段不同部位枣叶片中总黄酮、总酚含量的
变化,并分析含量的变化情况,以确定新疆骏枣叶片的适宜采样部位和采收时期。结果表明:枣叶中富含丰富
的黄酮类化合物和酚类物质,总黄酮含量、总酚含量的动态变化具有明显的规律,不同部位的含量也有显著性
差异。
关键词:枣叶;总黄酮;总酚
中图分类号:TS202.3/TS207.3 文献标识码:A 文章编号:1006-2513(2016)09-0194-04
The study of total fl avonoids and phenols in jujube leaf in different part
of the tree during different ripening stages
ZOU Ling,FENG Bing,BAI Hong-jin*
(College of Life Science/Key Laboratory of Protection & Utilization of Biological Resources in Tarim Basin of
Xinjiang Production and Construction Corps ,Tarim University,Alar 843300)
Abstract:To better understanding the composition of bioactive compounds and utilizing of jujube leaf ,total
phenolics,total fl avonoids of ‘Junzao’ leaf in different part of the tree and different ripening stages were investigated.
The results showed that jujube leaf contained abundant phenolic and fl avonoids substance. Total fl avonoids and total
phenols contents and antioxidant activity were infl uenced signifi cantly by ripening stages,its content in different parts
of the tree also have signifi cant difference.
Key words:zizyphus jujuba leaves; total fl avonoids; total phenols
收稿日期:2016-04-12 * 通讯作者
基金项目:浙江大学馥莉食品研究院基金项目:“四种西部特色植物资源的研究与开发”(No.KY201004)。
作者简介:邹玲(1990-),女,在读研究生,研究方向:天然产物结果与功能与功能研究,E-mail:zouling638@163.com。
枣是鼠李科(Rhamnaceae)枣属(ziziphus
Mill.)植物枣树(ziziphus jujuba Mill.)的成熟
果实,是我国特有的果树资源,枣树由于抗逆性
强、早果速丰、营养丰富等特点被广泛栽培[1]。
骏枣因其果实大,果皮厚,产量高等优点,近年
来在新疆种植面积不断扩大。经研究表明,枣
叶中有丰富的黄酮类[2-4]、维生素[5]、金属元
素[6-7]、三萜类[8]、糖类[9]、皂苷[10],关于枣
树的研究主要集中在枣果实的营养价值研究,对
不同物候期叶片的总黄酮、总酚含量的研究不
多,而黄酮类化合物具有抗菌、抗氧化、抗癌等
生物活性[11],枣叶还被民间用来治疗出血和腹
195
2016年第9期
中国食品添加剂
China Food Additives分析测试
泻[12]因此,该研究测定骏枣吊不同部位的枣叶
片在不同时期总黄酮、总酚含量,旨在确定骏枣
叶片的最佳采收期和采收部位。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
供试材料为塔里木大学园艺试验站内多年
生的枣树,于 2015 年 3 月~ 10 月分别采摘,供
试材料经干燥后粉碎,室温备用。骏枣枣吊靠近
枝头一段的枣叶为 JL1,枣吊中间的枣叶为 JL2,
枣吊靠近主干的枣叶为 JL3。
芦丁标准品(纯度> 98%)、没食子酸(纯
度> 98%)(上海融合医药科技发展有限公司);
乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、碳酸钠等
均为国产分析纯;
DHG-9145A 电热鼓风干燥箱(上海一恒
科学仪器有限公司);LD500 摇摆式中药粉碎机
(长沙市岳麓区常宏制药机械设备厂);BS124S
电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司);
TU-1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普析
通用仪器有限责任公司);KQ2200E 型超声波清
洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 试验方法
1.2.1 枣树不同部位总黄酮含量的测定
选取骏枣树枣花、枣叶、枣果实、树皮进行
总黄酮含量测定。每个样品平行提取 3 次。
1.2.2 枣叶片中生物活性物质的提取
取 1.0 g 样品置于室温 10 mL70% 乙醇溶液
超声提取 20 min,过滤,收集上清液用于总黄
酮、总酚含量测定。每个样品平行提取 3 次。
1.2.3 总黄酮含量的测定
1.2.3.1 芦丁标准曲线的绘制 参照文献[13]
方法测定,略有改动。以 70% 乙醇加入相应显色
剂为空白,在 510 nm 波长处测定不同质量浓度
标准品的吸光度,以吸光度(A)为纵坐标(Y),
标准液浓度(mg/mL)为横坐标(X),绘制标准
曲线。
1.2.3.2 样品中总黄酮含量的测定 取 1 mL 供试
样品溶液于 10 mL 容量瓶中,按测定芦丁标准溶
液吸光度的方法测定样品溶液的吸光度,计算总
黄酮含量。
1.2.4 总酚含量的测定
1.2.4.1 没食子酸标准曲线的绘制 参照文献
[14]方法测定,采用 Folin-Ciocalteu 比色法测定
吸光度,以吸光度(A)为纵坐标(Y),标准液
浓度(mg/mL)为横坐标(X),绘制标准曲线。
1.2.4.2 样品总酚含量的测定 取 1 mL 供试样品
溶液于 10 mL 容量瓶中,按测定没食子酸标准溶
液吸光度的方法测定样品溶液的吸光度,计算总
酚含量。
1.2.5 统计方法
每个结果重复处理 3 次,所测数值均以 x ±
SD表示,运用 Duncan’s新复极差法对样品间进行
多重比较分析,其中 P < 0.05表示存在显著性差异。
2 结果与分析
2.1 芦丁与没食子酸标准曲线
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06
y=14.6x+0.046
R2=0.9992
ဌ
࠼
܈
DŽ
A
Dž
౪܈DŽmg/mLDž
图 1 芦丁标准曲线
Fig. 1 The standard curve of rutin
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.5 1.5
y=0.5896x+0.0328
R2=0.9997
2.52 31
ဌ
࠼
܈
DŽ
A
Dž
౪܈DŽmg/mLDž
图 2 没食子酸标准曲线
Fig. 2 The standard curve of gallic acid
2.2 枣树不同部位总黄酮含量的测定
枣树不同部位总黄酮含量如图 3 所示。
196
2016年第9期
中国食品添加剂
China Food Additives分析测试
160
140
120
100
80
60
40
20
0
a
c
b
ጺ
ࣜ
ཛྷ
ࡤ
ଉ
DŽ
m
g/
gDž
d
ጺࣜཛྷࡤଉ
ࡕํ ࢾ ຏೄ ሪᄾ
图 3 枣树不同部位总黄酮含量
Fig. 3 Total fl avonoid contents in different organs of
ziziphus jujuba Mill.
由图 3 可知,枣树的果实、花、树皮枣叶
中总黄酮含量存在显著性差异,含量从高到底依
次是树皮(140 mg/g)、花(109.15 mg/g)、枣叶
(30.77mg/g)、枣果(11.82 mg/g),相比较枣树其
他部位,具有潜在的开发价值。
2.3 新疆阿拉尔骏枣枣吊不同部位不同时期枣叶
总黄酮含量动态变化
新疆阿拉尔骏枣枣吊不同部位不同时期枣叶
总黄酮含量检测结果如表 1 所示。
由表 1 可知,同一生长期三个部位总黄酮
含量存在显著差异,不同生长时期骏枣叶片总黄
酮含量的变化趋势基本一致,一个生长周期基本
呈现逐渐降低的趋势,总黄酮含量最高的时期是
6 月 4 日的骏枣枣吊枝头的新长出来的叶子,为
53.5±0.20 mg/g,8 月 27 日三个部位枣叶总黄
酮含量没有显著性差异;5 月到 6 月 JL1 总黄酮
含量大;9 月果实成熟期,JL2 总黄酮含量最高,
其原因可能是枣吊中间的部位是结果实的主要部
位,需要丰富的营养物质;到 10 月 8 日枯萎期,
三个部位枣叶总黄酮含量降到最低值。
表 1 枣叶不同部位不同时期总黄酮含量(mg/g ,n=3)
Tab. 1 The content of total fl avonoid in jujuba leaves in different period and different parts
日期
JL1 JL2 JL3
x ± SD RSD(%) x ± SD RSD(%) x ± SD RSD(%)
5 月 7 日 33.9±0.24cA 0.70 29.63±1.65bB 5.56 30.06±0.47bB 1.56
5 月 21 日 40.7±0.20bA 0.51 31.78±0.80aB 2.54 26.11±0.25dC 0.95
6 月 4 日 53.5±0.20aA 0.37 27.96±0.33bcB 1.17 26.14±0.75dC 2.86
6 月 18 日 26.0±0.37dA 1.42 20.77±0.30eC 1.49 24.52±0.54eB 2.20
7 月 2 日 25.0±0.11eB 0.48 24.49±0.57dB 2.32 36.66±0.86aA 2.34
7 月 16 日 26.5±0.29dB 1.09 26.84±0.51cB 1.93 27.60±0.20cA 0.72
7 月 30 日 16.8±0.28gB 1.65 18.17±0.17fA 0.93 9.68±0.10kC 1.03
8 月 13 日 19.9±0.38fA 1.99 18.76±0.34fB 1.81 20.25±0.20fA 1.03
8 月 27 日 17.7±1.76gA 4.27 19.81±2.77efA 13.98 16.4±0.48iA 2.92
9 月 10 日 19.2±0.10fB 0.52 19.70±0.24efA 1.21 19.2±0.10gB 0.51
9 月 24 日 13.2±0.29hB 2.18 14.47±0.10gA 0.69 14.2±0.61jA 4.28
10 月 8 日 14.1±0.50hB 3.53 10.52±0.41hC 3.89 17.8±0.67hA 3.74
注:同一列小写字母表示显著差异(P < 0.05);同一行大写字母表示显著差异(P < 0.05)。
2.4 新疆阿拉尔骏枣枣吊不同部位不同时期枣叶
总酚含量动态变化
新疆阿拉尔骏枣枣吊不同部位不同时期枣叶
总酚含量检测结果如表 2 所示。
由表 2 可知三个部位枣叶片总酚含量变化
趋势基本一致,枣叶总酚含量最高值,分别为
JL1 227.57±2.54mg/g、JL2 197.23±0.86mg/g,
JL3 254.89±1.81 mg/g,同一时期不同部位的
叶片最高含量也存在显著差异;7 月 30 日 JL1、
JL2、JL3 中枣叶片总酚含量降到最低值,分
别 是 56.27±1.30 mg/g、64.56±1.13 mg/g、
42.89±1.17 mg/g,此阶段为结果期,果实需要大
量的营养的物质,叶片总酚含量可能会受影响。
3 结果与讨论
黄酮类化合物是在植物中分布比较广的一种
天然化合物,关于黄酮类化合物在植物不同时期
的分布研究的也较多,而关于枣叶总黄酮总酚含
197
2016年第9期
中国食品添加剂
China Food Additives分析测试
量的动态变化做的非常少,本研究结果也表明,
新疆骏枣叶黄酮类化合物的含量很高,比其他地
区枣叶片[15]的总黄酮含量高,可以根据采摘的
需求采取枣叶。枣叶中总黄酮、总酚含量随植株
生长的变化而有较大的波动,说明物候期是影响
枣叶中总黄酮、总酚含量的主要因素之一,从枣
叶发芽经历盛花期、果期、果熟期到枯萎期,其
总黄酮、总酚含量的动态变化过程为从高到底呈
现一系列的波动变化趋势。据报道,黄酮类化合
物具有吸引昆虫及参与植物授粉活动等功能[16],
因此盛花期叶中黄酮类化合物含量维持在一个较
高的水平,可能与其传粉昆虫的生物学行为有
关。因此,综合考虑骏枣叶片的最佳采收时期为
枯萎期,最佳采收部位为 JL3。
表 2 枣叶不同部位不同时期总酚含量(mg/g,n=3)
Tab. 2 The content of total phenolic in jujuba leaves in different period and different parts
日期
JL1 JL2 JL3
x ± SD RSD(%) x ± SD RSD(%) x ± SD RSD(%)
5 月 7 日 106.9±1.49gA 1.39 99.42±1.72fA 1.72 87.36±7.52fB 8.60
5 月 22 日 167.08±1.72dA 1.02 136.74±1.81dB 1.32 108.47±3.2eC 2.95
6 月 4 日 93.39±2.038hA 2.17 82.08±2.26hB 2.75 85.29±1.81fB 2.12
6 月 18 日 145.97±10.37eA 7.10 96.78±3.53fC 3.64 121.66±2.03dB 1.66
7 月 2 日 113.372±2.28fA 2.01 81.71±1.72hC 2.10 87.93±4.08fB 4.64
7 月 16 日 112.24±1.81fgB 1.61 114.88±0.56hA 0.48 121.47±1.17dA 0.96
7 月 30 日 56.27±1.30jB 2.31 64.56±1.13jA 1.75 42.89±1.17gC 2.72
8 月 13 日 227.57±2.54aA 1.11 70.02±1.42iC 2.02 85.10±1.72fB 2.02
8 月 27 日 194.78±1.42cA 0.72 181.40±1.42bB 0.56 170.66±2.28cC 1.33
9 月 10 日 77.18±1.42iB 1.83 86.61±1.13gA 1.30 83.97±1.42fA 1.69
9 月 24 日 202.51±1.69bA 0.83 197.23±0.86aB 0.43 194.59±2.46bB 1.26
10 月 8 日 170.28±2.59dB 1.52 171.98±3.39cB 1.97 254.89±1.81aA 0.71
注:同一列小写字母表示显著差异(P < 0.05);同一行大写字母表示显著差异(P < 0.05)。
参考文献:
[1]LI Jinwei,FAN Liuping,DING Shaodong. Isolation,
purifi cation and structure of a new water-soluble polysaccharide
from zizyphus jujuba cv.Jinsixiaozao[J]. Carbohydrate
polymers,2011,83:477-482.
[2]李全国 . 乐陵枣叶总黄酮的提取、分离纯化、鉴定及其抗氧
化活性的研究 [D]. 济南:齐鲁工业大学,2014.
[3]Rutan Zhang,Junhui Chen,Qian Shi,et al. Quality control
method commercially available wild Jujube leaf tea beased on
HPLC characteristic fi ngerprint analysis of fl avonoid compounds
[J]. Journal of separation science,2014,37(1-2):45-52.
[4]Ye-Jin Kim,Dae-yeul Son. Antioxidant Effect of Solvent
extracts from the dried Jujube (Zizyphus jujube) sarcocarp,
seed,and leaf via sonication[J]. Food Science Biotechnol,
2011,20(1):167-173.
[5]李喜悦,高哲等 . 枣叶黄酮类成分的分离鉴定及其抗氧化活
性研究 [J]. 食品工业科技,2015,36(10):135-138.
[6]车振明 . 红枣叶中 VC 的提取及稳定性研究 [J]. 食品工业科
技,2000,21(2):27-28.
[7]肖忠峰,赵西梅 . 原子吸收光谱法测定冬枣叶茶中的八种金
属元素 [J]. 广东微量元素科学,2011,18(2):57-60.
[8]于雁灵,汪学昭,王运革 . 不同消化方法对测定酸枣叶中部
分金属元素的含量的比较 [J]. 广东微量元素科学,2000,7
(1):44-46.
[9]陈朋,隋月红,刘丹,白红进 . 大孔树脂纯化枣叶中三萜类
化合物的研究 [J]. 食品工业,2015,36(6):212-215.
[10] 沈志刚,李翠芹,等 . 陕北红枣叶片中几种生物物质的含
量分析 [J]. 延安大学学报(自然科学版),1997,16(3):
63-64.
[11] Preeti T,Shalini T. Ziziphus jujuba:a phytopharmacological
review[J]. Int. J. Res. Dev. Pharm. L. Sci.,2014,3(1):
959–966.
[12] Mahajan R T,Chobda M Z. Phyto-pharmacology of Ziziphus
jujuba Mill. A plant review[J]. Pharmacognosy Revies,2009,
3(6):320-329.
[13] LI Wu,LIANG Hong,ZHANG Mingwei,et al. Phenolic
profi les and antioxidant activity of Litchi (Litchi Chinensis
Sonn.)fruit pericarp from different commercially available
cultivars[J]. Molecules,2012,17(12):14954-14967.
[14] LI HuaBin,WONG ChiChun,CHENG KaWing,et al.
Antioxidant properties in vitro and total phenolic contents
in methanol extracts from medicinal plants[J]. LWT - Food
Science and Technology,2008,41(3):385-390.
[15] 赵欣,张进帮,张丽,等 . 枣叶芽中黄酮含量测定及其清
除 DPPH 自由基的作用 [J]. 甘肃农业大学学报,2015,50
(4):135-140.
[16] 李刚,岳仁芳 . 苦楝和银杏中总黄酮含量测定及比较 [J]. 广
西农业科学,2004,35(6):448-448.