全 文 ：作者简介:毛春芹,女 ,高级实验师　　研究方向:中药质量标准　　＊通讯作者:陆兔林 ,男 ,教授 ,硕士生导师　　研究方向:中药质量标准研
究及新药开发　　Tel:(025)85811835　　E-mail:lutuling2005@126.com
3.7　精密度实验
精密吸取对照品溶液和地榆炭供试品溶液各
10 μL,分别注入液相色谱仪 ,各测定 6次 ,峰面积
RSD分别为 0.47和 0.68%(n=6),表明仪器精密
度良好。
3.8　重复性实验
取地榆炭样品粉末 6份 ,每份 1.0g,精密称定 ,
照 “ 3.3”项下方法分别制备供试品溶液 ,依法进行
测定 ,测得地榆皂苷元 Z含量为 0.057 1%, RSD为
2.77%,表明方法重复性良好。
3.9　稳定性实验
精密吸取 5号地榆炭供试品溶液 10 μL,分别
在 0、2、4、6、8、12、24 h进行测定 ,测得地榆皂苷元 Z
在 24 h内峰面积 RSD为 1.24%,表明该样品至少
在 24 h内稳定。
3.10　加样回收率实验
精密称取一定量地榆炭样品(地榆皂苷元 Z含
量 0.057 1%)6份 , 精密加入一定量对照品 , 照
“3.3”项下方法分别制备供试品溶液 ,依法进行测
定 ,结果地榆皂苷元 Z平均回收率为 99.3%, RSD=
1.17%。说明测定方法测定结果准确。
3.11　样品含量测定
取地榆生品及不同炮制程度地榆炭样品各 1.0
g,精密称定 ,照 “ 3.3”项下操作 ,制成各供试样品 ,
精密吸取各供试品溶液各 10 μL,分别注入液相色
谱仪 ,依法测定。结果可知 ,炒制 7, 8 min时 ,该成
分未能检出 ,炒制 9 min时 ,含量为 0.008 8%,随着
炒制时间的延长 , 该成分含量逐渐增加 ,至 11 min
含量最高;之后随着时间延长 ,含量逐渐降低 ,至 15
min时达到 0.057 8%,含量为 0。
4　小结
实验表明 ,新化合物地榆皂苷元 Z在地榆生品以
及炒制程度较轻(7, 8min)或过重(15min)的饮片中
均检测不到 ,该成分含量最高时 ,地榆炭外观达到最
佳(11min),与传统要求相符 ,因此 ,该成分可以作为
指标较好地说明地榆炭的炮制程度 ,并具有良好的专
属性 ,为完善地榆炭饮片质量标准 、优化炮制工艺提
供良好的数据支持和科学依据。
REFERENCES
[ 1] 　Ch.P(2010).VolⅠ (中国药典 2010年版.一部)[ S].2010:
117.
[ 2] 　XIAHM, SUNLL, SUNJY, etal.StudyonChemicalConstitu-
entsofCharedRadixSanguisorbae(I)[ J] .FoodandDrug(食品
与药品), 2010, 12(1):42-44.
[ 3] 　XIAHM, ZHONGY, SUNJY, etal.StudyonChemicalconstitu-
entsofcharedSanguisorbaeRadix(I)[ J] .ChinTraditHerbal
Drug(中草药), 2010, 41(7):1048-1052.
(收稿日期:2010-08-30)
高效液相色谱法测定岩黄连总碱胶囊
中 3种生物碱含量
毛春芹 ,陆兔林＊ ,王静 ,池玉梅 ,谢辉 ,胡芳(南京中医
药大学 中药炮制研究室,南京 210046)
关键词:脱氢卡维丁;盐酸巴马汀;盐酸小檗碱;岩黄连总碱;
高效液相色谱法
中图分类号:R917　　　文献标志码:A　　　文章编号:
1001-2494(2011)05-0396-02
岩黄连中主要有效成分是以脱氢卡维丁为代表
的生物碱类化合物[ 1] ,这类化合物具有潜在的抗
HBV活性和肝保护活性[ 2] 。有文献[ 3]报道使用高效
液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维丁的含量。
但未见采用高效液相色谱法同时测定 3种生物碱含
量的文献报道 。建立高效液相色谱法定量测定岩黄
连总碱胶囊中脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱
含量 ,该法简便 、准确 、重复性好及回收率高 ,为该制
剂 3种生物碱分别定量测定提供可靠实验方法。该
法亦适用于岩黄连总碱胶囊质量控制。
1　仪器与试剂
Agilent1100高效液相色谱仪 ,包括四元泵 、自
动进样器 、柱温箱 、真空脱气机 ,紫外检测器 。脱氢
卡维丁 (111667-200701)、盐酸巴马汀 (110732-
200606)、盐酸小檗碱 (110713-200608)对照品 (中
国药品生物制品检定所)。乙腈为色谱纯 ,水为重
蒸水 ,其他试剂为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
AgilentXDBC18色谱柱 (4.6 mm×150 mm, 5
μm);流动相为乙腈-0.01mol· L-1磷酸二氢钾水溶
·396· ChinPharmJ, 2011March, Vol.46No.5　　　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2011年 3月第 46卷第 5期
液 (21∶79);柱温 30℃;检测波长 347nm;流速 1.0
mL· min-1;进样量 10 μL;采样时间 50 min。各组
分按保留时间先后出峰顺序为脱氢卡维丁 、盐酸巴
马汀 、盐酸小檗碱 , 3种生物碱得到良好分离。以盐
酸小檗碱计算理论塔板数为 4 000。
2.2　对照品溶液的制备
取脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱对照品
适量 ,精密称定 ,各加甲醇制成每 1 mL分别含脱氢
卡维丁 0.97 mg、盐酸巴马汀 1.002 mg和盐酸小檗
碱 0.712 mg的溶液。
2.3　供试品溶液的制备
取胶囊内容物 ,研细 ,取 70 mg,精密称定 ,置具
塞锥形瓶中 ,精密加入 1%盐酸甲醇 50 mL,称定质
量 ,超声处理(功率 500 W,频率 50 kHz)60 min,放
冷 ,再称定质量 ,用 1%盐酸甲醇补足减失的质量 ,
摇匀 ,滤过 ,取续滤液。
2.4　线性关系考察
分别精密吸取上述对照品溶液 ,用甲醇配制成
混合对照品溶液。其中 , 脱氢卡维丁质量浓度为
14.96、 29.91、 44.87、 59.82、 74.78、 89.73 μg·
mL-1 、盐酸巴马汀质量浓度为 15.03、30.06、45.09、
60.12、74.15、90.18 μg· mL-1、盐酸小檗碱质量浓
度为 3.56、 7.12、 10.68、14.24、 21.36、 28.48 μg·
mL-1 ,分别吸取不同浓度对照品溶液 10 μL,进行分
析测定。以对照品峰面积为纵坐标 ,对照品浓度为
横坐标 ,进行线性回归。得回归方程分别如下 ,脱氢
卡维丁:Y=32.918X-29.4(r=1.000 0),线性范围
为 0.149 6 ～ 0.897 3 μg。盐酸巴马汀:Y=37.571
X-19.713(r=0.999 9), 线性范围为 0.150 3 ～
0.901 8 μg。盐酸小檗碱:Y=32.445X-5.778(r=
0.999 9),线性范围:0.035 6 ～ 0.284 8μg。
2.5　精密度实验
精密吸取脱氢卡维丁 89.73 μg· mL-1 、盐酸巴
马汀 90.18 μg· mL-1、盐酸小檗碱 28.48 μg· mL-1
的混合对照品溶液 10μL,按 “2.1”色谱条件 ,连续进
样 6次 ,以 3种组分峰面积分别计算 ,结果表明 ,脱氢
卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱的 RSD分别为
0.13%, 0.12%, 0.21%,可见 ,进样精密度结果良好。
2.6　重复性实验
取同一批胶囊内容物(批号:080516),研细 ,取
约 70mg,精密称定 ,共 5份 ,按 “2.3”项下条件制备
并按 “2.1”项下条件测定 ,结果脱氢卡维丁 、盐酸巴
马汀 、盐酸小檗碱的含量分别为 41.61、 29.85、
10.04 mg· g-1 , RSD分 别为 2.22%, 2.34%,
2.91%。由以上结果得知 ,样品的重复性实验结果
良好。
2.7　稳定性实验
取重复性实验的 1号样品每隔 2 h测定 1次 ,
共测定 6次 。结果脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小
檗碱的 RSD分别为 0.77%, 1.58%, 1.20%。表明
供试品溶液在 12 h内稳定。
2.8　回收率实验
分别取已知含量的胶囊内容物(批号:080516)
研细 ,取约 35 mg,共 9份 ,精密称定 ,置具塞锥形瓶
中 ,精密加入 1%盐酸甲醇 50 mL,分别加入等同于
样品中脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱含量
80%、100%、120%的对照品 ,称定质量 ,超声处理
(功率 500 W,频率 50 kHz)60 min,放冷 ,再称定质
量 ,用 1%盐酸甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,滤过 ,取
续滤液 10μL注入液相色谱仪 ,测定含量。
结果表明 ,脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗
碱的平均回收率 分别为 100.01%, 100.81%,
102.91%;RSD分别为 2.91%, 2.10%, 1.68%。样
品的加样回收率实验结果良好 。
2.9　样品测定
取本品 3批样品 ,按 “ 2.3”项下所述方法制备
供试品溶液 ,并按 “2.1”色谱条件进样 ,结果脱氢卡
维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱此 3个生物碱的含量
总和分别为 76.26, 74.99, 77.11mg·g-1。
3　讨　论
在对供试品溶液制备条件的考察时 ,笔者选用
L9(34)因素水平表 ,对提取溶媒 ,提取方式 ,提取次
数 ,提取时间进行了考察 ,结果除提取溶媒对盐酸巴
马汀 、盐酸小檗碱指标具有显著性意义外 ,其他因素
的差异对脱氢卡维丁 、盐酸巴马汀 、盐酸小檗碱均无
显著性意义 。经直观比较分析 ,以各指标成分提取
完全并不影响提取效率的前提出发 ,确定了上述的
供试品溶液的制备方法。
REFERENCES
[ 1] 　KEMM, ZHANGXD, WULZ, etal.Thestudyonefectivecon-
stituentofCorydalissaxicolaBunting[ J] .ActaBotSin(植物学
报), 1982, 24(3):289.
[ 2] 　JANBAZAKH, GILANIAH.Studiesonpreventiveandcurative
efectsofberberineonchemical-inducedhepatotoxicityinrodents
[J].Fitoterapia, 2003, 71(1):25-33.
[ 3] 　WANGQH, LUTL, MAOCQ, etal.Determinationofdehydro-
cavidineinCorydalisSaxicolaBuntingbyHPLC[J] .ChinaPharm
(中国药师), 2008, 11(4):434-435.
(收稿日期:2010-07-30)
·397·中国药学杂志 2011年 3月第 46卷第 5期　　　　　　　　　　　　　　 ChinPharmJ, 2011 March, Vol.46No.5