全 文 ：［收稿日期］ 20120228(204)
［基金项目］ 中山市健康基地专项基金(2009H020)
［第一作者］ 王艳，硕士，实验师，从事病原生物多肽的研究，Tel:0760-88207977，E-mail:sahara81@ 163． com
［通讯作者］ * 田素英，硕士，高级实验师，从事中药资源的开发利用研究，Tel:0760-88207910，E-mail:zsxqtsy@ 126． com
金樱根、金樱茎多糖对小鼠肠道菌群失调的调整作用
王艳1，张立2，沈媛珍1，田素英1*
(1. 广东药学院，广州 510006;2. 首都儿科研究所附属儿童医院，北京 100020)
［摘要］ 目的:研究金樱根、金樱茎多糖对肠道菌群失调小鼠的调整作用。方法:用盐酸林可霉素 15 g·kg － 1 ig，2 次 / d，连续
3 d，建立小鼠肠道菌群失调模型，用含生药 100 g·kg － 1的金樱根、金樱茎多糖进行 ig 治疗，连续 6 d，于第 10 天取新鲜粪便检
测肠道正常菌群(肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳杆菌)的变化。CFU·g － 1粪便 =每一稀释度平均菌落数 ×稀释倍数 /滴种体积
(mL)。结果用 1 g 粪便中菌数的对数表示(lg10n·g － 1)。同时设正常对照、阳性对照、模型对照及自然恢复组。结果:6 d 治疗
后，全樱根多糖组小鼠肠道主要菌群的数量基本恢复，其中肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌优于自然恢复组(P ＜ 0. 05) ;金樱茎多糖
组仅乳杆菌数量高于模型组(P ＜ 0. 01)。结论:金樱根、金樱茎多糖对正常小鼠肠道菌群失调有一定调整作用，且金樱根多糖
效果优于金樱茎多糖。
［关键词］ 金樱根;金樱茎;多糖;菌群失调
［中图分类号］ R285． 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)20-0270-03
Effect of Polysaccharides of Radix Rosa loevigata and
Caulis Rosa laevigata on Intestinal Flora of Mouse
WANG Yan1，ZHANG Li2，SHEN Yuan-zhen1，TIAN Su-ying1*
(1. Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China;
2. The Childrens Hospital Affiliated to Capital Institute of Pediatrics，Beijing 100020，China)
［Abstract］ Objective:To research the effect of polysaccharides of Radix Rosa laevigata and Caulis Rosa
laevigata on intestinal flora of mouse． Method: Intestinal microbe dysbiosis in mice were constructed by
intragastric administration of lincomycin (15 g·kg － 1，bid，3 d)． The mice were given polysaccharides of Radix
Rosa laevigata and Caulis Rosa laevigata (100 g·kg － 1 of crude drug for 6 days，)and then normal intestinal flora of
fresh fecal was taken on the 10 th day to observe the changes in normal intestinal microflora in the first 10 days． The
result was expressed as lg10n·g － 1 ． The nomal control，positive control and spontaneous recovery groups were set
up． Result:Intestinal microbe dysbiosis in mice was successfully established． After the intestinal microbial flora in
mice was disturbed and then treatment by polysaccharides of Radix Rosa laevigata and Caulis Rosa laevigata for 6
days，alteration of intestinal flora in polysaccharides of Radix Rosa laevigata was basically regulated． For
polysaccharides of Caulis Rosae laevigatae， comparing with the modle groups， only the quantity of
Enterobacteriaceae and Bifidobacterrium was increased significantly (P ＜ 0. 01)． Conclusion:The polysaccharides
of Radix Rosa laevigata and Caulis Rosa laevigata have the function of regulating alteration of intestinal flora．
Comparing with Caulis Rosae laevigatae，Radix Rosa laevigata has the better curative effect．
［Key words］ Radix Rosa laevigata;Caulis Rosa laevigata;polysaccharide;intestinal microflora dysbiosis
肠道菌群与机体的健康有着密切的关系，正常
情况下，肠道菌群与宿主间相互依赖、相互制约，在
质和量上形成一定的生态平衡［1-2］。菌群失调是正
常微生物菌群发生的定量或定性的异常变化。抗生
素类药物的使用，在杀死病原菌的同时，也导致有益
菌大量死亡，引起肠道菌群紊乱。研究发现部分补
·072·
第 18 卷第 20 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 20
Oct．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.20.077
益类中药具有扶植正常菌群生长作用，可调整菌群
失调、提高定植抗力，起到益生元效果，是理想的微
生态调节剂［3］。
金樱根为蔷薇科植物金樱子的干燥根，其性平，
味酸、涩，归肾、脾经，主要功效为固精涩肠［4］。现
代研究结果表明金樱根有耐缺氧作用、抗炎作用
等［5-6］。而金樱茎常常被混杂在金樱根药材中使
用。对金樱根在调整菌群失调方面的研究尚未见报
道。本文通过实验研究金樱根多糖对肠道菌群失调
小鼠的调整作用，同时比较金樱根与金樱茎的多糖
在调节菌群失调方面的作用差异。旨在揭示金樱根
涩肠止泻机制，同时为金樱茎能否混入金樱根入药
提供依据。
1 材料
1. 1 药品和试剂 金樱根、金樱茎药材饮片(广州
致信中药饮片有限公司，批号 20110923，经广东药
学院田素英副教授鉴定为金樱子 Rosa laevigata
Michx． 的干燥根和茎) ;盐酸林可霉素胶囊(丽珠集
团利民制药厂，按林可霉素计 0. 25 g /粒，批号
20110812) ;丽珠肠乐(丽珠集团丽珠制药厂，0. 5 亿
活菌 /20 粒，批号 20110715)。
1. 2 培养基 伊红美蓝培养基(EMB，用于选择性
培养肠杆菌) ;双歧杆菌培养基(改良 MRS) ，乳杆菌
培养基(MC)由实验室自制，分别用于选择性培养
双歧杆菌和乳杆菌;肠球菌培养基(EC，用于选择性
培养肠球菌)。
1. 3 仪器设备 CS101-3ABNR 型红外线电热鼓风
干燥箱(重庆永生实验仪器厂) ，LDZX-50FAS 型立
式压力蒸气灭菌器(上海申安医疗器械厂) ，不锈钢
手提式灭菌器 (上海申安医疗器械厂) ，ZHJH-
C1209C 型超净工作台(上海智城分析仪器制造有
限公司) ，HPX-9162MBE 型数显电热培养箱(上海
博迅实业有限公司医疗设备厂) ，DPX-9162B-2 型电
热恒温培养箱(上海福玛实验设备有限公司)。
1. 4 动物 昆明种小鼠 50 只，体重 17 ～ 26 g，雌雄
各半。由广东省医学实验动物中心提供，合格证号
2008A004。饲养条件，温度(20 ± 2)℃，湿度60% ±
10%，每 2 d 更换 1 次垫料。正常饲养 3 d 后供试，
实验前小鼠饮水、进食正常，状态良好。
1. 5 金樱根和金樱茎多糖的提取［7］ 将金樱根和
茎打粉，各取 400 g 金樱子根和金樱茎粗粉，用无水
乙醇与无水乙醚(1∶ 1)混合液浸泡 12 h 脱脂，过滤，
药物挥干溶媒后加入 80% 乙醇 90 ℃ 回流提取 2
次，每次1. 5 h，以除去低聚糖，过滤，取出药渣，挥干
溶媒。用 5 倍体积蒸馏水在 95 ℃条件下提取 2 次，
每次 1. 5 h，合并 2 次滤液，浓缩，药液加 80%乙醇，
放入冰箱中沉淀过夜，收集沉淀，沉淀再依次用
95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，干燥，得金樱
子根和茎粗多糖，使用 Sevag 法脱蛋白，浓缩，再次
沉淀，沉淀再用无水乙醇、丙酮、乙醚洗数次，干燥得
金樱子根和金樱子茎多糖，最后制成含原药材 2 g·
mL － 1的多糖溶液。
2 方法
2. 1 建立小鼠肠道菌群失调模型 除正常对照组
外，其余小鼠用盐酸林可霉素 15 g·kg － 1 ig，2 次 / d，连
续 3 d，造成小鼠肠道菌群失调。
2. 2 动物分组及处理 小鼠按体重均分为 6 组，分
别为正常对照组(小鼠 ig 与药液等体积的生理盐
水，1 次 / d，第 7 天取新鲜粪便行细菌数检测) ;模
型组(造模成功后于第 4 天取新鲜粪便行细菌数
检测) ;自然恢复组(造模成功后让其自然恢复，于
第 10 天取新鲜的粪便检测细菌数) ;金樱根多糖
组(造模成功后 ig 金樱根多糖溶液，剂量为含生药
100 g·kg － 1，1 次 / d，连续 6 d，于第 10 天取新鲜粪
便检测细菌数) ;金樱茎多糖组(造模成功后 ig 金
樱茎多糖溶液，剂量、方法同金樱根多糖，阳性对
照组(造模成功后，以丽珠肠乐 15 g·kg － 1，ig，1
次 / d 连续 6 d，于第 10 天取新鲜粪便检测细菌
数) ，每组 10 只。
2. 3 粪便菌群检测 于规定时间迫使小鼠排便，取
一定量新鲜粪便置于带有玻璃珠的无菌小瓶内，以
1∶ 10(W /V)比例加稀释液于小瓶内，并以此作为第
一稀释度，振摇均匀，然后连续 10 倍稀释成系列稀
释浓度至 10 － 7。选用 10 － 6，10 － 7 2 种稀释度分别接
种于 EMB，EC，MRS，MC 平板上。EMB，EC 37 ℃需
氧培养 24 h，MRS，MC 37 ℃厌氧培养 72 h 后观察
结果。根据菌落特征，革兰染色进行初步鉴定菌种，
参照饶正华的细菌 CFU 统计方法［8］计菌落数。
CFU /粪便 =平均菌落数 ×稀释倍数 /滴种体积
结果以每 1 g 粪便中菌数的对数表示(lg10n·
g － 1)［9-10］。
2. 4 统计学方法 用 SPSS 17. 0 统计软件，数据以
珋x ± s 表示，组间比较采用 t 检验，P ＜ 0. 05 表示有统
计学意义。
3 结果
小鼠造模后，绝大多数小鼠行动迟缓，毛色干
枯，饮食下降，出现溏样便，甚至水样便。与正常组
相比，造模小鼠肠道内的肠杆菌、肠球菌、乳杆菌、双
·172·
王艳，等:金樱根、金樱茎多糖对小鼠肠道菌群失调的调整作用
歧杆菌菌数明显下降(P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ，已造成
小鼠肠道菌群失调。给予金樱根多糖后，菌群有大
幅度增加，肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌及乳杆菌基本
恢复到正常水平，特别是肠球菌、肠杆菌及乳杆菌与
丽珠得乐组比已无显著差异，肠球菌、肠杆菌、双歧
杆菌的恢复优于自然恢复组。金樱茎多糖的小鼠肠
道菌群和乳杆菌虽有一定恢复，明显高于模型组
(P ＜ 0. 01) ，但仍明显低于正常组、阳性组和自然恢
复组(P ＜ 0. 05)。见表 1。
表 1 各组小鼠粪便标本菌群(肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌、乳杆菌)检测(珋x ± s，n = 7) lg10 n·g － 1
组别 剂量 / g·kg － 1 肠球菌 肠杆菌 双歧杆菌 乳杆菌
正常对照 － 7. 97 ± 0. 132，7) 9. 08 ± 0. 171，7) 8. 91 ± 0. 092，7) 9. 06 ± 0. 102)
模型 － 7. 40 ± 0. 43 8. 33 ± 0. 844，8) 8. 32 ± 0. 027) 7. 27 ± 0. 104，7)
自然恢复 － 8. 07 ± 0. 201) 8. 95 ± 0. 161，7) 8. 46 ± 0. 153，7) 8. 84 ± 0. 162)
金樱根 100 8. 34 ± 0. 082，4，6) 10. 63 ± 0. 202，4，6) 8. 78 ± 0. 222，5，7) 8. 59 ± 0. 142，6)
金樱茎 100 6. 76 ± 0. 102，4，6，8) 6. 74 ± 0. 102，4，6，8) 8. 35 ± 0. 71 7. 80 ± 0. 172，4，5，8)
丽珠肠乐 15 8. 62 ± 0. 142) 10. 86 ± 0. 052，4，6) 9. 31 ± 0. 171，3) 9. 42 ± 0. 41
注:与模型组比较1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与正常对照组比较3)P ＜ 0. 05，4)P ＜ 0. 01;与自然恢复组比较5)P ＜ 0. 05，6)P ＜ 0. 01;与丽珠肠乐
组比较7)P ＜ 0. 05，8)P ＜ 0. 01。
4 讨论
胃肠道中各生理菌群数量在一定范围波动时，
能维持正常的生理和免疫功能，具有对抗外籍菌定
植的能力，即定植抗力［11］，而一旦机体内外环境发
生变化，特别是过度应用广谱抗生素，便会引起菌群
失调［12］。实验小鼠在造模后，出现进食量减少、活
动量降低、粪便含水量增加等肠道菌群失调症状，4
种主要肠道菌群:肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌及乳杆
菌均明显下降，尤其是肠杆菌、双歧杆菌和乳杆菌，
由此表明实验用小鼠菌群失调，实验动物模型造模
成功。丽珠肠乐(双歧杆菌)作为一种微生态活菌
制剂，能有效控制腹泻症状，有效改善腹泻者的营养
状况，在调整微生态失调，保持微生态平衡上作用占
优。故本实验选用丽珠肠乐作为阳性药物。
小鼠造模成功后，给予金樱根多糖，实验所选 4
种主要肠道菌群基本上恢复到正常水平，其中肠球
菌、肠杆菌已超过正常组水平。肠球菌、肠杆菌和双
歧杆菌数量亦超过自然恢复组水平，说明金樱根多
糖具有扶植正常菌群生长和调整菌群失调的作用。
而金樱茎多糖组的乳杆菌虽有恢复，但未能恢复到
正常水平。这两者的实验结果的差异可能是由于两
者的多糖含量不一样，或者由于它们是属于同一种
植物的不同部位而造成所含成分的作用差别，这有
待进一步的实验探讨。
本实验表明，金樱根多糖对小鼠肠道菌群失调
有调整作用，可作为微生态调节剂，用于防治肠道菌
群失调。这为治疗抗生素引起的微生态失调提供了
新型参考药物，对于解决微生态调节剂的局限性问
题也有重要的意义。同时，也提醒我们在用金樱茎
代替金樱根药材时，要慎重考虑。
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［责任编辑 何伟］
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第 18 卷第 20 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 20
Oct．，2012