免费文献传递   相关文献

荔枝壳多糖传统水提法最佳工艺优化研究



全 文 :2011 年 10月第 8卷第 28期 ·实验研究·
CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报
荔枝(Litchi chinesis Sonn.)属于无患子科植物,因具有
较高的营养价值和养颜滋补作用,被视为“果中珍品”。据《本
草纲目》记载:“常食荔枝能补脑健身,治疗瘰疬,开胃益脾[1]。 ”
荔枝壳作为荔枝食用后的废弃物被扔掉,造成了资源浪费和
环境污染。 有报道[2]荔枝壳中含有多种活性成分,如黄酮、酚
酸和多糖类物质,有较高的加工利用价值。 活性多糖对降血
压、降血脂等有一定功效[3]。 目前对荔枝核、肉中多糖的提取
方法研究较多,而对荔枝壳中多糖的提取方法研究鲜见报道,
本研究立足荔枝壳废弃物的再利用,并对其活性成分多糖提
取条件进行优化,以最大限度提高荔枝壳中多糖的提取率。
1 仪器与材料
1.1 仪器
TU1800 双光束紫外可见分光光度计 (北京普西通用仪
器责任有限公司)。 电子天平 BS224S(赛多利斯科学仪器北
京有限公司)。
1.2 材料
荔枝壳(购于长春药材公司)、苯酚(开原市化学试剂一
厂)、硫酸(北京化工厂)、95%乙醇(北京化工厂)、无水乙醇
(北京化工厂) 等均为分析纯试剂。 D-无水葡萄糖 (批号:
110833-200904,中国药品生物制品检定所)
2 方法与结果
2.1 方法
2.1.1 供试品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的荔枝壳 5.0 g,
水提浓缩后定容于 100 ml 的容量瓶中。 精密吸取上述提取
液 10 ml,用 5 倍量 95%的乙醇醇沉过夜,离心(4 000 r/min)
后用 95%乙醇洗涤醇沉物, 用水定容于 25 ml 容量瓶中,即
制备得荔枝壳多糖供试品溶液。
2.1.2 荔枝壳多糖的测定方法 依据以葡萄糖为标准品的硫
酸-苯酚比色法[4]。
2.1.3 对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的无水葡萄
糖 0.014 6 g, 定量转移至 100 ml 容量瓶中, 用水稀释至刻
度,即得 0.146 mg/ml 的对照品溶液。
2.1.4 标准曲线的制备 [5] 精密吸取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml 上
述对照品溶液至 5支具塞试管中,然后依次加入蒸馏水至 2 ml,
再各加 6%苯酚试剂 1.0 ml,摇匀后精密加入浓硫酸 5 ml,放
置。 5 min后置沸水浴中加热,15 min 后立即转入冷水浴中。
至室温后在 490 nm 波长处测定吸收度,即得标准曲线,以质
量 M 对吸收度 A 作线性回归, 得回归方程:A=0.007 788M-
0.050 88,r=0.999 9。
2.1.5 精密度试验 精密量取微波提取法项下“5 号”样品(精
密称取干燥至恒重的荔枝壳 0.504 0 g, 用 95%乙醇索式提
取,脱脂后,将预处理后的样品加 1∶20倍的水,在 100℃、3 min、
900 W功率下于微波萃取仪内提取,合并提取液,定容于100 ml
荔枝壳多糖传统水提法最佳工艺优化研究
惠 春 1,卢梦骁 2,林大专 1,张凌赢 1,曾宪东 1
1.长春医学高等专科学校,吉林长春 130031;2.同济大学数学系,上海 200092
[摘要] 目的:确定荔枝壳多糖的最佳提取条件。 方法:以荔枝壳多糖的含量为指标,以提取温度、提取时间、提取次
数、料液比为因素,利用单因素试验确定因素水平,正交试验法进行试验设计,对水提取法提取荔枝壳多糖的工艺进
行系统研究。 结果:荔枝壳多糖的最佳工艺条件为提取时间 3 h,提取温度 100℃,料液比 1∶20。 结论:本方法试验结
果可作为提取荔枝壳多糖的工艺制定依据。
[关键词] 荔枝壳多糖;提取工艺;正交试验
[中图分类号] R931.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)10(a)-029-03
Study on the optimized handicraft of traditional water formulation of Litchi
pericarp polysaccharide
HUI Chun1, LU Mengxiao2, LIN Dazhuan1, ZHANG Lingying1, ZENG Xiandong1
1.Changchun Medical College, Changchun 130031, China; 2.Department of Mathematics, Tongji University, Shanghai
200092, China
[Abstract] Objective: To definite optimum extraction conditions of Litchi pericarp polysaccharide. Methods: The orthogo-
nal testing method was employed to carry on the experimental design to systematically study the handicraft of traditional
water formulation of Litchi pericarp polysaccharide, with the content of Litchi pericarp polysaccharide as a target, the ex -
traction temperature, the extraction time, the extraction times and the material fluid ratio as the factors, using the single
factor expriment to make sure the level of the factors. Results: The best technological conditions of Litchi pericarp
polysaccharide were the extraction time with 3 h, the extraction temperature with 100℃ , the expected material fluid ratio
with 1∶20. Conclusion: This experiment results can be used as the polysaccharide technology formulating basis to extract
the Litchi pericarp polysaccharide.
[Key words] Litchi pericarp polysaccharide; Extraction handicraft; Orthogonal test
[基金项目] 吉教科合字[2009]第 553 号。
[作者简介] 惠春(1962.2-),女,硕士学位,教授,药物化学教研室主任,主
要从事药物化学方面的研究工作。
29
·实验研究· 2011 年 10月第 8卷第 28期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
容量瓶中,即得),共制备 6 份,按标准曲线制备项下的方法
测定吸光度,结果 RSD为 0.642%(n=6),表明精密度符合要求。
2.1.6 稳定性试验 精密量取对照品溶液 0.6 ml,照“2.1.4”项
下的方法测定吸光度,每隔 30 min 测定一次,至 2.5 h 时,测
得 RSD 为 0.585%(n=6),说明吸光度在 150 min 内稳定。
2.1.7 重现性试验 精密量取微波提取法 (功率单因素影响)
项下“5 号”样品 1.0 ml,按标准曲线的制备项下的方法测定
吸光度,重复操作 6次,测得 RSD 为 0.902%(n=6)。
2.1.8 加样回收率试验 精密吸取微波提取法(功率单因素影
响)项下“5 号”样品液 0.5 ml(6 份),分别加入对照品溶液
0.5 ml,照样品测定项下方法测定吸光度,计算回收率,结果
测得 RSD=0.463%(n=6)。
2.1.9 荔枝壳多糖样品液的测定 精密吸取 1.0 ml 荔枝壳多
糖样品液,按“2.1.4”标准曲线制备项下的方法操作。
2.2 结果
2.2.1 单因素试验结果 单因素中的提取次数、 提取时间、料
液比、提取温度对多糖得率的影响,见图 1~4。
图 1 提取次数对多糖得率的影响
图 2 提取时间对多糖得率的影响
2.2.2 正交试验结果 选择正交表 L9(34),以提取时间、温度
和料液比做如下三因素、三水平的正交实验。 因素—水平设
计,见表 1;正交试验结果,见表 2、3。
3 讨论
3.1 单因素试验结果讨论
3.1.1 提取次数对多糖得率的影响 图 1 显示,随着提取次数
的增加,样品多糖得率无显著性递增,考虑时间和能源的节
俭不浪费,以选择提取 2 次较为合适。
3.1.2 提取时间对多糖得率的影响 图 2 显示,3 h 以前,随着
提取时间的延长多糖得率上升较大,3 h 以后,多糖得率随着
时间的变化不显著。
3.1.3 料液比对多糖得率的影响 图 3 显示,当料液比为 1∶30
时,多糖得率达到最高点。
3.1.4 提取温度对多糖得率的影响 图 4 显示,当提取温度达
1
2
3
水平 时间(h)
1
2
3
温度(℃)
80
90
100
料液比
1∶20
1∶30
1∶40
表 1 因素水平表
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
k1
k2
k3
R
U
Q
试验号 A 时间 B 温度
1
1
1
2
2
2
3
3
3
K1A=1.480
K2A=1.907
K3A=2.178
k1A=0.493 3
k2A=0.635 7
k3A=0.726 0
0.232 7
UA=3.523 6
QA=0.082 6
1
2
3
1
2
3
1
2
3
K1B=1.117
K2B=1.377
K3B=3.071
k1B=0.372 3
k2B=0.459 0
k3B=1.023 7
0.651 4
UB=4.191 6
QB=0.750 6
C 料液比
1
2
3
2
3
1
3
1
2
K1C=2.005
K2C=1.939
K3C=1.627
k1C=0.668 3
k2C=0.646 3
k3C=0.542 3
0.126 0
UC=3.475 6
QC=0.034 6
多糖得率
0.438
0.315
0.727
0.324
0.539
1.044
0.355
0.523
1.300
K=5.565
P=3.441 0
∑xi2
W=4.394 6
表 2 L9(34)正交试验极差分析结果
30
2011 年 10月第 8卷第 28期 ·实验研究·
CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报
《中国医药科学》杂志征订启事
《中国医药科学》杂志是中华人民共和国卫生部主管,海峡两岸医药卫生交流协会和二十一世纪联合创新(北京)
医药科学研究院主办的国家级综合性医药科技期刊,国内统一刊号:CN 11-6006/R,国际标准刊号:ISSN 2095-0616,
邮发代号:82-519。 已被中国知网、中国学术期刊网络出版总库、《中国学术期刊(光盘版)》全文检索系统、万方数据数字
化期刊群、中国核心期刊(遴选)数据库、中文科技期刊数据库全文收录,系中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊。
全国各地邮局均可订阅,脱订者可直接通过发行部订阅。每月出版 3期,每期定价 15元,全年 540 元。国内外公开
发行,本刊设有业界关注、专家论坛、基础医学、药物研究、论著、综述、药理与毒理、临床医学、药物与临床、影像与介
入、麻醉与镇痛、医学影像、医学检验、中医中药、医药教育、等栏目。 内容涉及国内外医疗、教学、科研和管理工作者在
医药科研领域中所取得的新理论、新成果、新经验、新技术、新方法。 欢迎内科、外科、口腔科、耳鼻咽喉科、眼科、麻醉
科、激光科、皮肤科和妇产科等相关专业的科研、教学、临床和护理人员订阅与投稿。 本刊为旬刊,稿件容量大、审稿专
家多、编辑效率高、处理稿件快和发稿周期短。 根据全国继续医学教育委员会《继续医学教育学分授予与管理办法》的
规定,在本刊发表论文可获得国家级继续医学教育学分。 凭订阅单复印件投稿,同等条件优先录用。 欢迎各医药单位、
院校、厂家刊登产品和广告。
地 址:北京市朝阳区百子湾西里 402号楼 404室 《中国医药科学》杂志社发行部
邮 编:100124 电 话:010-59693870-8017 传 真:010-59693848
联 系 人:缐红宇 联系信箱:1979248054@qq.com
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!

A
B
C
e(误差)
总和
因素 离差平方和 自由度
QA=0.082 6
QB=0.750 6
QC=0.034 6
Qe=0.085 8
QT=0.953 6
fA=2
fB=2
fC=2
fe=2
fT=8
平均离差平方和
S2A=0.041 3
S2B=0.375 3
S2C=0.017 3
S2e=0.042 9
F 值
FA=0.962 7
FB=8.748 3
FC=0.403 3
显著性
不显著
不显著
不显著
表 3 正交试验方差分析结果
到 90℃以后,温度提高对多糖得率的影响显著。
3.2 正交试验结果讨论
从以上实验结果和方差分析,可以得出以下结论:
3.2.1 由 RC<RA<RB可以依次排列出影响荔枝壳中多糖得率
的因素顺序为提取温度、提取时间和料液比。
3.2.2 由 k1A<k2A<k3A、k1B<k2B<k3B和 k3C<k2C<k1C可以得出 A3B3C1为
荔枝壳多糖提取的最佳工艺条件,即提取时间为 3 h、提取温度
为 100℃、料液比为1∶20。
3.3.3 在 α=0.05水平下,F0.05(2,2)=19,由于 F均小于 F0.05(2,2)
=19,故 A、B、C三因素对荔枝壳中多糖得率影响均不显著。
[参考文献]
[1] 唐小俊 ,池建伟,张名位,等 .荔枝多糖的提取条件及含量测定[J].华南
师范大学学报,2005,4(2):27-31.
[2] 杨宝,赵谋明 ,李宝珍,等.荔枝壳活性成分提取工艺条件研究[J].食品
与机械, 2004,20(6):28-30.
[3] 吴仲梁 ,韩伟 ,陶军 ,等.快速检测食品中金黄葡萄球菌的检测方法[J].
中国食品工业,2003,(6):56-57.
[4] 董周勇 ,池建伟,杨公明,等 .荔枝多糖微波提取工艺研究[J].食品工业
科技,2006,(3):118-121.
[5] 吴雅静,张名位,孙远明,等.荔枝多糖的超声辅助提取工艺优化研究[J].
华南师范大学学报:自然科学版,2007,(7):119-124.
(收稿日期:2011-08-03)
顺铂联合复方苦参注射液腹腔内灌注治疗,扩大抗癌药
物与腹腔内癌细胞的接触面积,提高抗癌药在腹腔内的浓度,
具有局部药代动力学优势[4]。 抗癌药物顺铂在腹腔内肿瘤部
位药物浓度比血浆高数十倍,通过细胞膜渗入肿瘤细胞内,破
环 DNA 双链结构,阻断其进行有丝分裂,达到杀伤肿瘤细胞
减少对腹膜的刺激,减少癌性腹水的产生,配合中药制剂苦
参注射液凉血解毒、散结止痛,减少毒性反应,免疫调节治
疗,加速腹水消退,达到药物协同作用,加强治疗效果。
两组试验结果显示,采用顺铂联合复方苦参注射液腹腔
灌注治疗癌性腹水的有效率高于单用顺铂组,患者副反应更
轻。提示复方苦参注射液联合顺铂腹腔灌注治疗恶性腹水有
协同作用,两药联合治疗疗效优于单用顺铂。
总之,采用顺铂联合复方苦参注射液腹腔灌注治疗较单
用顺铂灌注治疗能更为有效地控制患者消化道肿瘤癌性腹
水,减轻患者痛苦,提高生活质量,适用于不宜全身化疗的晚
期癌性腹水患者,值得在临床推广。
[参考文献]
[1] 任习芬 ,陈岳祥,谢渭芬.恶性腹水治疗现状与对策[J].中华消化杂志 ,
2006,28(8):573-576.
[2] 池丽芬,李民驹,汤谷平.顺铂腹腔热灌注化疗与其他用药方式药代动
力学比较[J].实用肿瘤杂志,2000,15(3):179-181.
[3] 陈妙兰.肿瘤诊治工作常用统计指标和统计方法[J]//中国常见恶性肿
瘤诊治规范.第 9 册.北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版
社,1991:13.
[4] 张百红,李新民.苦参碱抗癌作用与诱导肿瘤细胞凋亡[J].肿瘤研究与
临床,1999,11(6):402-403.
[5] 张昱,陈维平.顺铂灌注治疗恶性胸腹水[J].医药论坛杂志,2005,4(7):64.
(收稿日期:2011-04-27)
(上接第 26页)
31