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香樟叶中多糖的提取及含量测定



全 文 :第 40 卷第 8 期
2010 年 8 月
应 用 化 工
Applied Chemical Industry
Vol. 40 No. 8
Aug. 2011
收稿日期:2011-04-20 修改稿日期:2011-06-09
作者简介:孙崇鲁(1981 -) ,男,浙江慈溪人,浙江医药高等专科学校助理实验师,硕士,主要从事天然产物提取及应用方
面的研究。电话:0574 - 88222743,E - mail:sunchonglu267@ 163. com
香樟叶中多糖的提取及含量测定
孙崇鲁
(浙江医药高等专科学校 实验实训中心,浙江 宁波 315100)
摘 要:采用热水回流提取香樟叶总多糖,考察了提取温度、提取时间、料液比对香樟叶总多糖提取量的影响。结
果表明,其最佳工艺条件为:提取温度为 85 ℃,提取时间为 4 h,料液比为 1∶ 20,提取次数为 4 次。在最佳工艺条件
下,香樟叶可提取总多糖为 129. 41 mg /g。
关键词:香樟叶多糖;提取工艺;测定
中图分类号:R 284. 2 文献标识码:A 文章编号:1671 - 3206(2011)08 - 1434 - 03
Study on the extraction and determination of polysaccharide
from cinnamomum camphora leaves
SUN Chong-lu
(Experiment and Training Center,Zhejiang Pharmaceutical College,Ningbo 315100,China)
Abstract:The hot water refluxing extraction process of polysaccharide from cinnamomum camphora leaves
was studied. The effect of the operation parameters such as extraction temperature,extraction time and the
ratio of solid to extraction liquid on polysaccharides mass extracted from cinnamomum camphora leaves
were analyzed. The optimum extraction conditions were obtained as follows:extraction temperature 85 ℃,
extraction time 4 h,the ratio of solid to extraction liquid 1∶ 20,extraction times 4. The yield of total poly-
saccharides from cinnamomum camphora leaves was 129. 41 mg /g under the optimum conditions.
Key words:cinnamomum camphora leaves polysaccharide;extraction process;determination
樟树系樟树属的常绿乔木植物,是我国亚热带
常绿阔叶林的主要树种之一,它在我国资源丰富。
樟树具有驱虫、防腐耐蛀的功能。樟树叶提取色素、
香料等用来制成植物农药、制备氧化剂和医药产品
等。且樟树叶为可再生资源,其应用前景十分广
阔[1]。植物多糖具有增强机体免疫力、抗肿瘤等功
效,目前已成为国内外研究的热点[2-5],但香樟叶中
多糖的研究尚未见报道。本实验采用热水回流法提
取香樟叶多糖,确立了香樟叶多糖的最佳提取工艺
条件。
1 实验部分
1. 1 试剂与仪器
香樟叶,2011 年 3 月下旬采自浙江医药高等专
科学校校内,采后冲洗并将叶片与叶轴分开,叶片于
60 ℃烘干,粉碎后用 95%的乙醇提取2 次,过滤,滤
渣风干后备用;浓硫酸、苯酚、葡萄糖均为分析纯。
HH-2 数显恒温水浴锅;DHG-9070A 电热鼓风
干燥箱;6202 粉碎机;BS-224S 型电子天平;721 型
可见分光光度计。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 单因素实验 称取 2. 0 g 香樟叶于 250 mL
的圆底烧瓶中,按料液比加入蒸馏水,置于一定温度
的水浴中,装上冷凝管,回流提取一定的时间后,取
出静置过滤。滤液在 3 000 r /min下离心 10 min,量
取一定滤液体积,采用硫酸-苯酚法[6-7]测定提取液
总多糖量。
1. 2. 2 正交实验 根据香樟叶多糖提取的单因素
实验结果,对料液比、温度、提取时间进行 L9(3
3)正
交实验,以确定浸提多糖的最佳工艺条件。
1. 2. 3 确定适宜提取次数 在正交实验结果所得
到的最佳提取工艺条件下确定适宜的提取次数。
1. 3 分析方法
1. 3. 1 葡萄糖标准曲线的制作[8] 精密称取
105 ℃下干燥至恒重的葡萄糖 100. 5 mg,溶解后置
于 1 000 mL容量瓶中定容,摇匀,得到葡萄糖标准
溶液。分别吸取葡萄糖标准溶液 0. 1,0. 2,0. 4,
0. 6,0. 8,1. 0 mL,分别置于 10 mL具塞刻度试管中,
加水补至 2 mL,分别加入新配制的 6%苯酚溶液[9]
第 8 期 孙崇鲁等:香樟叶中多糖的提取及含量测定
1. 0 mL,迅速滴加浓硫酸 5. 0 mL,摇匀后,置沸水浴
中加热 15 min。取出,用冷水迅速冷却,用分光光度
计在波长 490 nm处测定吸光度,得标准曲线回归方
程:A = 0. 043 5C + 0. 033 8,相关系数 r2 = 0. 998 7。
1. 3. 2 多糖含量的测定 精密量取提取液或稀释
液至 10 mL 具塞刻度试管中,分别加入新配制的
6%的苯酚溶液 1 mL,迅速滴加 5 mL 的浓硫酸,摇
匀后置于沸水浴中加热 15 min。取出,用冷水迅速
冷却,并于 490 nm处测定其吸光度。
香樟叶多糖的含量(mg /g)= A -0. 033 80. 043 5 ×V ×N/M
式中 V———浸提液体积,L;
N———稀释倍数;
M———香樟叶的质量,g。
2 结果与讨论
2. 1 温度对香樟叶多糖提取量的影响
固定料液比为 1∶ 25,提取时间为 2 h,分别于 55
~ 95 ℃的水浴锅中提取 2 h,测定提取液总多糖量,
结果见表 1。
表 1 提取温度对多糖提取量的影响
Table 1 Effect of temperature on extraction of
polysaccharide from cinnamomum camphora leaves
提取温度 /℃ 总多糖提取量 /(mg·g - 1)
55 63. 48
65 79. 56
75 89. 97
85 105. 11
95 95. 17
由表 1 可知,多糖提取量先随着温度的升高而
升高,在 85 ℃时达到最大值后随温度升高而降低,
这可能是由于在较高温度下提取,使大分子多糖的
糖苷键断裂,造成了多糖的部分损失[10]。
2. 2 料液比对香樟叶多糖提取量的影响
固定提取温度 85 ℃,提取回流时间 1 h,按照
1∶ 5,1∶ 10,1∶ 15,1∶ 20,1 ∶ 25 的料液比进行实验,结
果见表 2。
表 2 提取料液比对多糖提取量的影响
Table 2 Effect of the ratio of material to liquid on
extraction of polysaccharide from cinnamomum
camphora leaves
料液比 /(g·mL -1) 总多糖提取量 /(mg·g - 1)
1∶ 5 48. 27
1∶ 10 82. 15
1∶ 15 100. 81
1∶ 20 104. 89
1∶ 25 105. 11
由表 2 可知,多糖的提取量随着料液比的增加
而增加,但水量过多增加蒸发处理的困难。当料液
比超过 1∶ 15 后,多糖的提取量增加很少。
2. 3 提取时间对香樟叶多糖提取量的影响
固定料液比为 1∶ 15,提取温度为 85 ℃,分别提
取 1 ~ 5 h,测定提取液总多糖量,结果见表 3。
表 3 不同提取时间对多糖提取量的影响
Table 3 Effect of time on extraction of polysaccharide
from cinnamomum camphora leaves
提取时间 /h 总多糖提取量 /(mg·g - 1)
1 76. 11
2 100. 81
3 106. 49
4 105. 65
5 104. 07
由表 3 可知,随着加热时间的延长,可以促进
多糖的提取。但 3 ~ 5 h,多糖的提取量变化不大,
1 h的提取量较低,因此选择提取时间 2,3,4 h 三个
水平进行进一步优化。
2. 4 正交实验结果
经过单因素实验,确定正交实验因素水平,实验
设计及结果见表 4。
表 4 正交实验结果
Table 4 Results of orthogonal experiment
试验号
A B C
时间 /h
料液比
/(g·mL -1)
温度 /℃
多糖提取量
/(mg·g - 1)
1 2 1∶ 10 75 79. 69
2 2 1∶ 15 85 100. 81
3 2 1∶ 20 95 104. 89
4 3 1∶ 15 75 87. 47
5 3 1∶ 20 85 110. 57
6 3 1∶ 10 95 92. 75
7 4 1∶ 20 75 102. 25
8 4 1∶ 10 85 95. 97
9 4 1∶ 15 95 94. 85
K1 285. 39 268. 41 269. 41
K2 290. 79 283. 13 307. 35
K3 293. 07 317. 71 292. 49
k1 95. 13 89. 47 89. 80
k2 96. 93 94. 37 102. 45
k3 97. 69 105. 90 97. 49
R 2. 56 16. 43 12. 64
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应用化工 第 40 卷
由表 4 可知,3 个因素影响次序是 B > C > A,优
化提取工艺是 A3B3C2,即提取温度为 85 ℃,提取时
间为 4 h,料液比为 1∶ 20。按 A3B3C2 进行 3 次平行
实验,测得平均多糖含量值为 112. 18 mg /g。
2. 5 提取次数
在最佳工艺条件下,反复提取多次,结果见
表 5。
表 5 提取次数对多糖提取量的影响
Table 5 Effect of extraction times on extraction of
polysaccharide from cinnamomum camphora leaves
提取次数 /次 总多糖提取量 /(mg·g - 1)
1 112. 18
2 12. 56
3 3. 45
4 1. 22
由表 5 可知,随着提取次数的增加,香樟叶多糖
的提取量减少非常明显,在进行第 4 次提取时,提取
量仅为 1. 22 mg /g,相对而言,这提取量已经很小
了。因此,香樟叶多糖提取 4 次其多糖基本被提取
完了。提 取 4 次 香 樟 叶 可 提 取 总 多 糖 为
129. 41 mg /g。
3 结论
用热水回流法提取香樟叶多糖的最佳工艺条件
为:提取温度 85 ℃,固液比 1∶ 20,提取时间 4 h,提
取次数为 4 次。在最佳工艺条件下,香樟叶可提取
总多糖为 129. 41 mg /g。
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(上接第 1433 页)
(3)氧化萃取工艺对碱性氮和非碱性氮均有较
好的脱除效果,能够实现柴油中氮化物的深度脱除,
有利于低硫清洁柴油的生产。
(4)该工艺操作条件温和、生产成本较低,可用
于中小型炼厂。
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