全 文 ：收稿日期:2009-07-20
作者简介:李　琴(1978-),女 , 河南卫辉人 ,学士 ,助理实验师 , 主
要从事分析化学的研究工作。
南瓜叶中总黄酮含量测定
李　琴 , 杨婷婷
(新乡医学院分析测试实验室 ,河南　新乡　453003)
摘要:　目的　测定南瓜叶中总黄酮的含量。方法　以芦丁为对照品 , 采用分光光度法在 510 nm处测定南瓜叶中
总黄酮含量 。结果　芦丁对照品溶液浓度 8～ 40mg· L-1时与吸光度有良好的线性关系, 线性回归方程为 A=0.011 8C-
0.025 1(r=0.999 2), 加样回收率为 100.9%(n=5), 相对标准偏差为 1.35%,南瓜叶总黄酮平均含量为 2.65 mg· g-1。
结论　本方法简便 、快速 、准确 、灵敏 ,可作为南瓜叶中总黄酮的含量测定方法。
关键词:　南瓜叶;总黄酮;含量测定;分光光度法
中图分类号:Q331　文献标志码:A　文章编号:1004-7239(2010)02-0134-02
DeterminationofcontentoftotalflavoneinPumpkinleaves
LIQin, YANGTing-ting
(LaboratoryofAnalyticalandTesting, XinxiangMedicalCollege, Xinxiang453003, China)
Abstract:　Objective　TodeterminethecontentoftotalflavoneinPumpkinleaves.Methods　Thetotalflavonoidin
Pumpkinleaveswasdeterminedbyultravioletspectrophotometryat510 nmwithrutinasareferencesubstance.Results　The
sampleconcentrationwaslinearrelationshipwithabsorbanceintherangeof8 ～ 40 mg· L-1 , theequationoflinearregression
wasA=0.011 8C-0.025 1(r=0.999 2), theaveragerecoverywas100.9%(n=5, relativestandarddeviationwas1.35%)and
theaverageconcentrationoftotalflavonewas2.65mg· g-1.Conclusion　Themethodissimple, quick, accurate, sensitiveand
suitableforcontentdeterminationoftotalflavoneinPumpkinkeaves.
Keywords:　Pumpkinleaves;totalflavone;determination;spectrophotometry
　　南瓜又名倭瓜 、麦瓜 、金冬瓜等 ,属葫芦科 ,南瓜
属 1 a生草本蔓性植物 ,是人们喜爱的一种保健蔬
菜食品 。人们多食用南瓜而扔掉南瓜叶 , 《岭南草
药志》记载南瓜叶能治痢疾 、疳积 ,具有消炎 、镇痛 、
祛淤作用。南瓜叶晒干研末涂敷伤口治各种烫伤 、
烧伤和刀伤 。若能利用现代科学技术 ,对南瓜叶进
行深加工 ,开发出保健食品 ,将具有重要的经济和现
实意义 。黄酮类化合物广泛存在于植物中 ,是良好
的抗氧化剂 [ 1] ,对维持正常的循环系统功能尤其有
益 ,黄酮类化合物还具有抗炎 、抗病毒和保护肝脏活
性的功能 [ 2] 。本实验以南瓜叶为原料 , 参照文献
[ 3]的方法以芦丁为对照品 ,用硝酸铝在碱性溶液
中可与黄酮显色的原理 ,测定其总黄酮含量 ,以期对
南瓜叶的深加工和综合开发提供理论依据 。
1　材料与方法
1.1　试剂与仪器　无水乙醇 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢
氧化钠等试剂均为分析纯;芦丁对照品 (中国药品
生物制品检定所提供 , 批号:100080-200707)。
WFJ7200型可见分光光度计(尤尼柯上海仪器有限
公司), FA1104型电子天平(上海良平仪器仪表有
限公司), 98-1-B性电子调温电热套(天津市泰斯特
仪器有限公司),电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医
疗器械厂)。
1.2　原料　南瓜叶采自新乡市郊区 ,将采集到的新
鲜南瓜叶去杂处理 , 清水漂洗沥干其表面水分 ,
(80±1)℃鼓风干燥 72 h以上 ,冷却后粉碎 ,过 40
目筛后 ,置干燥器中备用 。
1.3　实验方法
1.3.1　对照品溶液的制备　精密称取芦丁对照品
40.0 mg,置于 100 mL容量瓶中 ,加体积分数 60%
乙醇适量 ,微热使溶解 ,放冷后用体积分数 60%乙
醇稀释至刻度 ,摇匀备用 。
1.3.2　样品溶液制备　精确称取制备好的南瓜叶
粉末 5.0g,用滤纸包好置于索氏提取器内 ,电热套
中加热回流抽提 ,直至抽提液呈无色为止。抽提结
束后取出滤纸包自然风干 ,再将南瓜叶粉末移至
250 mL圆底烧瓶中 , 加体积分数为 80%乙醇
150 mL,在 70 ℃条件下回流浸提 3 h,浸提结束后 ,
立刻抽滤并收集滤液。将滤液转至烧瓶中 ,减压浓
缩分离乙醇。将浓缩液于离心机中离心除去少量叶
绿素及其他水不溶性杂质 ,取上清液用石油醚于分
液漏斗中萃取 3次 ,至上清液无色即可 ,最后从分液
漏斗下端放出样品提取液 。再将提取液转至
100 mL容量瓶中 , 蒸馏水定容 ,即为待测的样品溶
液(粗黄酮水溶液)。
1.3.3　测定波长的确定　以芦丁为对照品测定南
·134· 　第 27卷　第 2期2010年 3月 　　　　　　　　　　　　 新乡医学院学报JournalofXinxiangMedicalColege　　　　　　　　　　　　Vol.27　No.2　Mar.2010
瓜叶中总黄酮含量。精密量取对照品溶液和样品溶
液各 5mL,分置 50mL容量瓶中 ,加 0.72 mol· L-1
亚硝酸钠溶液 0.5 mL, 摇匀 , 放置 6 min, 加
0.47mol·L-1硝酸铝溶液 1.5 mL, 摇匀 , 放置
6 min,加 1.0 mol· L-1氢氧化钠溶液 4.0 mL,再加
水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min后 ,波长 400 ～ 550 nm
扫描 ,结果 2种溶液均在 510 nm波长处有最大吸
收 ,故选择 510 nm作为测定波长。
1.3.4　标准曲线的绘制　精密吸取芦丁对照品溶
液 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL,分别置于 50 mL
容量瓶中 , 加体积分数为 60%乙醇至 5.0 mL,加
0.72mol· L-1亚硝酸钠溶液 0.5 mL, 摇匀 ,放置
6 min,加 0.47 mol· L-1硝酸铝溶液 1.5 mL,摇匀 ,
放置 6min,加 1.0mol· L-1氢氧化钠溶液 4.0mL,
再加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min,用第 1份溶液做
空白 ,在 510 nm波长处测定吸光度(A)。以吸光度
(A)为纵坐标 ,浓度(C)为横坐标 ,绘制标准曲线 。
1.3.5　稳定性试验 　取同一样品溶液 5 mL,置于
50 mL容量瓶中 ,按绘制标准曲线的配液方法配置
溶液 ,取样测 60 min内吸光度 ,每隔 10 min测定 1
次 ,考察对照品溶液的稳定性。
1.3.6　精密度试验　取同一样品溶液 5份 ,每份取
5 mL,置于 50 mL容量瓶中 ,按上述绘制标准曲线
的配液方法配置溶液 ,取样测定其吸光度 ,考察仪器
的精密度。
1.3.7　重复性试验　取同一批干燥南瓜叶粉末 5
份 ,每份 5 g,制备样品溶液。精密吸取样品溶液
5 mL,置于 50 mL容量瓶中 ,测吸光度 ,考察方法的
重复性 。
1.3.8　方法回收率 　精密吸取芦丁对照品溶液
1.0、1.5、2.0、2.5、3.5 mL分别加入已知总黄酮含
量的 5mL样品的 50mL容量瓶中 ,按上述绘制标准
曲线的配液方法配置溶液 ,取样测定吸光度 ,计算加
样回收率。
1.3.9　样品含量测定　测定不同批南瓜叶提取液
的吸光度 ,并由回归方程计算总黄酮含量 。
2　结果
芦丁对照品回归方程为 A=0.011 8C-0.025 1,相
关系数为 r=0.999 2,结果表明芦丁对照品溶液浓
度 8 ～ 40 mg· L-1时与吸光度有良好的线性关系 。
芦丁对照品溶液在制样 0、10、20、30、40、50、60 min
吸光度分别为 0.129、0.129、0.128、0.123、0.126、
0.125、0.127 ,相对标准偏差为 1.75%,表明芦丁对
照品溶液在制样 60 min内稳定。精密度试验其相
对标准偏差为 0.55%,表明仪器精密度良好。加样
平均回收率 100.9%,吸光度相对标准偏差 1.35%,
加样回收率结果见表 1。样品中总黄酮平均含量为
2.65 mg· g-1 ,相对标准偏差 1.35%。
表 1　加样回收率试验结果
Tab.1　Resultsofrecoverytestinsample (n=5)
序号 黄酮含量 /mg 芦丁对照品溶液加入量 /mg 黄酮测得量 /mg 回收率 /%
1 0.65 0.4 1.06 100.9
2 0.65 0.6 1.26 100.8
3 0.65 0.8 1.49 102.8
4 0.65 1.0 1.65 100.0
5 0.65 1.4 2.05 100.0
3　讨论
黄酮属于酚类化合物 ,是植物中非常重要的次
生代谢产物 ,是由 2个苯环通过中央三碳链连接而
成的具有 C6 -C3 -C6碳架的化合物总称 ,具有多种药
理作用 ,其中包括抗菌 、消炎 、抗氧化 、消除人体自由
基 、抗癌 、调节心血管系统和内分泌系统及免疫系统
等功效 ,是极具开发前景的天然活性成分[ 4-5] 。本实
验采用分光光度法对南瓜叶中黄酮含量进行测定 ,
结果为 2.65 mg· g-1 ,此方法条件容易控制 ,操作
简单 ,无需大型昂贵的仪器 ,重现性好 ,回收率高。
南瓜叶在收获过程中多为人们所弃去 ,因此可利用
大量的南瓜叶来提取生物类黄酮 。
　　参考文献:
[ 1] 　蒋企洲 ,欧瑜 ,平涛 ,等.箬竹叶黄酮对油脂的抗氧化性研究
[ J] .实用临床医药杂志 , 2008, 12(4):50.
[ 2] 　郭晓玲 ,李万里 ,尉辉杰 ,等.鸡冠花黄酮化合物对糖尿病小鼠
脾脏及巨噬细胞吞噬功能的影响 [ J] .新乡医学院学报 , 2005,
22(4):324-330.
[ 3] 　王小华 ,邓斌 ,张晓军 ,等.南瓜叶黄酮类化合物提取条件的优
化 [ J] .化学工程师 , 2008, 22(12):1-3.
[ 4] 　PietaPG.Flavonoidsasantioxidants[ J] .NaturalProduta, 2000,
63(7):1035-1042.
[ 5] 　HarborneJB, WiliamsCA.Advancesinflavonoidsresearchsince
1992[ J].Phytochemistry, 2000, 55(6):481-504.
(本文编辑:孟　月　英文编辑:孟　月)
·135·第 2期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　李　琴 ,等:南瓜叶中总黄酮含量测定