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（编辑：邓响潮）
收稿日期：2009-12-31
作者简介：齐柳娅（1983-），女，硕士研究生，研究方向：天然药物与生化药学。Email：qiliuya@126.com 。通讯作者：郁建平，教授，研究方
向：天然产物化学提取与分离。Email：yujp666666@163.com。
基金项目：贵州省中药现代化科技产业研究开发专项（2003第 79号）。
追风伞总黄酮抗风湿活性的研究
齐柳娅，郁建平，田晶，孙春龙，郑庆霞（贵州大学生命科学学院，贵阳 550025）
摘要：目的 研究追风伞总黄酮（total flavonoids of Lysimachia paridiformis Franch.var.Stenophylla Franch.，TFLS）
的抗风湿活性及其作用机制。方法 采用小鼠醋酸扭体法观察TFLS的镇痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀
法、棉球诱导的小鼠肉芽肿法和弗氏完全佐剂（FCA）诱导的大鼠佐剂性关节炎（AA）模型，观察TFLS的抗炎作
用。结果 TFLS能显著抑制醋酸所致的小鼠扭体反应，对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、棉球诱导的小鼠肉芽肿具
有抑制作用，对 AA大鼠继发性足肿胀有较好的抑制作用，并使大鼠血清中NO和炎性组织中PGE2 的含量降低，
与模型组比较，差异均有显著性（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。结论 TFLS具有显著的镇痛抗炎作用，其作用机制可能
与抑制大鼠血清中NO和炎性组织中PGE2 的合成有关。
关键词：追风伞总黄酮；抗风湿；镇痛；抗炎；佐剂性关节炎
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1003-9783（2010）04-0369-04
Studies on Anti-rheumatism Activity of Total Flavonoids from Lysimachia paridiformis Franch var. steno－
phylla Franch
QI Liuya，YU Jianping，TIAN Jing，SUN Chunlong，ZHENG Qingxia （College of Life Sciences，Guizhou Univer－
sity，Guiyang 550025，China）
Abstract: Objective To investigate anti -rheumatism effects and mechanism of total flavonoids from Lysimachia
paridiformis Franch var. stenophylla Franch （TFLS）. Methods The analgesia effect was observed on mice twisting
model induced by ethanoic acid. To explore the anti-inflammation effect of TFLS，xylene-induced mice auricular
swelling model，cotton ball-induced mice granuloma model and rats model of adjuvant arthritis（AA）induced by Fre－
unds complete adjuvant were established. Results TFLS relieved mice body writhing response induced by ethanoic
acid，significantly reduced xylene-induced mice auricular swelling and cotton-induced mice granuloma，and inhibit－
ed the secondary auricular swelling degree. At the same time，the contents of serum NO and PGE2 in inflammatory
tissue fluid of AA rats were decreased significantly（P < 0.05 or P < 0.01 compared with the model group）. Conclu－
sion TFLS has remarkable analgesic and anti-inflammation effects，which may be related to the reduction of serum
NO level and PGE2 in inflammatory tissue fluid.
Keywords: Total flavonoids of Lysimachia paridiformis Franch var. stenophylla Franch; Anti-rheumatism; Analgesia；
Anti-inflammation; Adjuvant arthritis
·369·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology,2010 July,Vol．21 No．4
追 风 伞 （Lysimachia paridiformis Franch.var.
Stenophylla Franch．） 系报春花科植物狭叶落地梅的全
草或根，全草入药，有祛风通络、活血止痛等功效，
在民间广泛用于治疗风湿痹痛、半身不遂等，具有较
强的药用价值[1-2]。追风伞中黄酮类成分含量丰富[3]，
但其抗风湿活性研究迄今为止未见报道。笔者在前期
药效学实验基础上，就追风伞总黄酮（total flavonoids of
Lysimachia paridiformis Franch.var.Stenophylla Franch.，
TFLS）对急性、亚急性和免疫性炎症的抗炎作用做进
一步的研究，以探讨其抗风湿活性的作用机制。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 追风伞购于贵阳市花果园药材市
场 ， 经 鉴 定 为 Lysimachia paridiformis Franch.var.
Stenophylla Franch.。阿司匹林，石家庄康力药业有限
公司，批号：090109；萘普生，山东仁和堂药业有限
公司，批号：080201； 雷公藤多苷片（tripergium wil－
fordii polycoride，TPT），湖南协力药业有限公司，批
号：20080702；一氧化氮（NO）测定试剂盒，南京建
成生物研究所，批号：20090803；弗氏完全佐剂
（freunds complete adjuvant，FCA），美国Sigma公司。
其他试剂均为分析纯。
1.2 实验动物 昆明种小鼠，清洁级，雄性，体重
（20±2）g，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证
号：SCXK（黔）2002－0001；Sprague-Dawiey（SD）大
鼠，SPF级，雄性，体重（220±20）g，由重庆腾鑫生
物技术有限公司提供，合格证号：SCXK（渝）2007-
001。
1.3 TFLS的提取制备 取追风伞干品粗粉2 kg，依
次加入12、10、8倍量的50 %乙醇，加热回流提取3
h，回收乙醇浓缩成浸膏。过D101型大孔吸附树脂，
乙醇洗脱，浓缩蒸干，得追风伞总黄酮粗提物，总黄
酮含量达到75 %。
1.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计分析软件进行差
异显著性检验分析，结果以（x± s）表示。
2 方法与结果
2.1 TFLS对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 昆明种
小鼠50只，雄性，随机分成5组，每组10只，分别为
模型组、阳性对照组（阿司匹林）、TFLS低、中、高
剂量组。分别灌胃给药，1次/d，连续3 d，其中模型
组给予等容量的蒸馏水。末次给药1 h后，每只小鼠
腹腔注射0.6 %醋酸溶液0.2 mL，记录小鼠15 min内
扭体反应次数（以小鼠出现腹部内凹、躯干与后肢伸
张，臀部高起为扭体反应），计算镇痛率。镇痛率
（%）=（模型组扭体次数-给药组扭体次数）/模型组扭
体次数×100 %。
表1 TFLS对醋酸所致小鼠扭体反应的影响（x± s）
注：与正常对照组比较， *P < 0.05， **P < 0.01。
由表1可知，TFLS中、高剂量组小鼠的扭体次数
与正常对照组比较，差异具有统计学意义（P < 0.05，
P < 0.01），表明TFLS能减少醋酸所致的小鼠扭体反
应，具有明显的镇痛作用。
2.2 TFLS对小鼠耳廓肿胀的影响 昆明种小鼠50只，
雄性，随机分成5组，每组10只，分别为正常对照组、
阳性对照组（萘普生）、TFLS低、中、高剂量组。分
别灌胃给药，1次/d，连续3 d，其中模型组给予等容
量的蒸馏水。末次给药1 h后，每只小鼠右耳两面涂
二甲苯40 μL致炎，左耳对照， 1 h后处死小鼠，用
直径为6 mm打孔器在左右耳廓相同部位打孔取下耳
片称重，以左右耳片重量之差（肿胀度）为炎症肿胀程
度指标。
表2 TFLS对小鼠耳廓肿胀的影响（x± s）
注：与正常对照组比较， *P < 0.05， **P < 0.01。
由表2可知，与正常对照组比较，萘普生组、
TFLS中、高剂量组的小鼠耳廓的肿胀度明显下降，
具有显著性差异（P < 0.05，P < 0.01），说明各给药
组均能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，对急性炎性
肿胀具有一定的抑制作用。
2.3 TFLS对小鼠棉球肉芽肿的影响 昆明种小鼠50
只，雄性。参照文献方法[4]，在乙醚浅麻醉下，右腋
下埋入10 mg棉球（高压灭菌）1只，缝合皮肤，消毒，
术后小鼠随机分组后即开始灌胃给药1次/d，连续7
d，其中模型组给予等容量的蒸馏水。于第8天小鼠颈
椎脱臼致死，剥离棉球，置烘箱内70 ℃干燥2 h，称
组 别
正常对照组
阿司匹林组
TFLS低剂量组
TFLS中剂量组
TFLS高剂量组
n
10
10
10
10
10
剂量/mg·kg-1
/
45
125
250
500
扭体次数
44.5±4.18
27.8±4.01**
40.3±3.91
34.1±3.92*
28.3±3.84**
镇痛率/ %
/
37.53
9.44
23.37
36.40
组 别
正常对照组
萘普生组
TFLS低剂量组
TFLS中剂量组
TFLS高剂量组
n
10
10
10
10
10
剂量/ mg·kg-1
/
45
125
250
500
耳廓肿胀度/ mg
10.8±1.31
7.72±1.33**
9.24±2.07
8.87±1.95*
8.35±1.22*
抑制率/ %
/
28.50
14.44
17.87
22.69
·370·
中药新药与临床药理 2010年 7月第 21卷第 4期
表3 TFLS对小鼠棉球肉芽肿的影响（x± s）
注：与正常对照组比较， *P < 0.05， **P < 0.01。
重，减去原棉球重得肉芽肿重，计算药物对肉芽肿的
抑制率，结果见表3。
模型组小鼠肉芽组织增生明显，剥离时在肉芽内
部和周围发现大量淡黄色、血性渗出液； TFLS各组
对小鼠肉芽组织增生有不同程度的抑制作用，并使局
部的炎症渗出液减少。与模型组比较，TFLS中、高
剂量均能显著抑制小鼠棉球肉芽肿增生（P < 0.05，P
< 0.01），且呈剂量相关趋势。
2.4 AA大鼠模型的诱导及分组 SD大鼠50只，随机
分成5组，每组10只，分别为正常对照组，AA模型
组、TPT组、TFLS高、低剂量组。每鼠右后足趾皮内
注射FCA 0.1 mL致炎，正常对照组注射0.1 mL 生理
盐水。各给药组于致炎后10 d灌胃给药，1次/d，连
续给药16 d，正常组及模型组给予等容量蒸馏水。
2.5 TFLS对AA大鼠继发性足肿胀的影响 AA大鼠非
致炎侧的足肿胀度能在一定程度上直观地反应出膝关
节病理损害程度，是判断病程进展的有效指标。本研
究采用容积法测定正常状态下大鼠左踝关节以下的容
积（mL），然后分别于致炎后10、14、18、22、28 d
同法测量非致炎足（左足）的容积变化，以致炎前后差
值（△mL=致炎后容积-致炎前容积）表示其肿胀度，
观察药物对大鼠继发性炎症肿胀的治疗作用。由表4
可知，TFLS对佐剂性关节继发性足肿胀有较好的抑
制作用。
2.6 TFLS对AA大鼠血清NO的影响 造模后28 d，大
鼠眼眶取血，保留血清。根据NO试剂盒说明书（硝酸
还原酶法）检测NO含量。结果见表5。从表5可见，与
模型组比较，各个给药组的小鼠血清中的NO含量明
显低于模型组（P < 0.05），与正常对照组比较没有显
著性差异。
表5 TFLS对AA大鼠血清中NO水平的影响（x± s）
% 注：与正常对照组比较， **P < 0.01。与模型组比较，▲P < 0.05，
▲▲P < 0.01。
2.7 TFLS对AA大鼠中关节渗出液中PGE2水平的影
响[5] 造模后28 d，于AA大鼠右侧踝关节上0.5 cm处
剪下炎性足爪，称重，剪碎后用生理盐水5 mL浸泡2
h，然后将浸出液2500 r·min-1离心10 min，吸取上清
液0.1 mL，加入0.5 mol·L-1氢氧化钾-甲醇溶液2 mL，
在50℃下异构化20 min，用甲醇稀释至5 mL，于278
nm波长处测定其（A278 nm）值，结果以每克炎性组织相
当的吸光密度值表示PGE2的含量。由表5可知，模型
组炎症组织中PGE2含量明显升高；TPT组、TFLS高剂
量组对AA大鼠炎性组织中升高的PGE2含量表现出明
显的抑制作用，具有显著性差异（P < 0.05）。
3 讨论
类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一个以
累及周围关节为主的多系统炎症性自身免疫疾病。
关节的炎症与疼痛是风湿病中较为常见的临床表
现，因此镇痛与抗炎是风湿病治疗学中最主要的内
容之一[6]。
本研究采用经典的炎症、疼痛模型观察TFLS的
抗炎镇痛作用。结果表明，TFLS能显著降低小鼠的
扭体次数，提示TFLS对于慢性疼痛具有镇痛作用。
TFLS能够显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和慢
性非特异性肉芽组织增生，提示TFLS对炎症早期的
渗出性水肿有预防作用，同时对炎症晚期的组织增生
亦有一定的治疗效果。
AA大鼠模型是常用的RA模型[7]，同时也是免疫
性炎症模型。研究认为急慢性炎症的发生均与NO有
关系[8]，在RA发病过程中，NO作为一种重要炎症介
质直接参与炎症反应和关节损伤过程，NO含量的异
常升高会促进PGE2、TNF-α等炎症介质的释放而加重
炎症反应。PGE2是一种疼痛和炎症介质，可以引起
组 别
正常对照组
模型组
TPT组
TFLS低剂量组
TFLS高剂量组
n
10
10
10
10
10
剂量/ mg·kg-1
/
/
30
164
328
NO /μmol·L-1
38.59±11.08▲▲
50.45±9.57**
42.41±9.81▲
45.06±9.75
43.09±8.93▲
PGE2（A值）
0.218±0.074▲▲
0.304±0.073**
0.243±0.059▲
0.275±0.074
0.240±0.065▲
表4 TFLS对AA大鼠继发性足肿胀的影响（x± s，n=10）
注：与模型组比较，▲P < 0.05，▲▲P < 0.01。
组 别
模型组
萘普生组
TFLS低剂量组
TFLS中剂量组
TFLS高剂量组
n
10
10
10
10
10
剂量/ mg·kg-1
/
45
125
250
500
肉芽肿重/ mg
51.1±6.40
37.1±9.90**
45.5±6.35
42.5±9.80*
39.5±9.50**
抑制率/ %
/
27.40
10.96
16.80
22.70
组 别
正常对照组
模型组
TPT组
TFLS低剂量
TFLS高剂量
n
10
10
10
10
10
剂量
/mg·kg-1
/
/
30
164
328
10 d
0.07±0.03▲▲
0.30±0.03
0.29±0.04
0.30±0.03
0.28±0.03
14 d
0.11±0.04▲▲
0.36±0.04
0.31±0.09
0.34±0.05
0.32±0.06
18 d
0.14±0.05▲▲
0.40±0.06
0.28±0.04▲▲
0.37±0.04▲
0.33±0.08▲
22 d
0.18±0.04▲▲
0.48±0.03
0.24±0.09▲▲
0.36±0.09▲
0.28±0.08▲▲
28 d
0.19±0.06▲▲
0.42±0.05
0.21±0.06▲▲
0.29±0.07▲
0.22±0.06▲▲
不同时间的继发性足肿胀/ mL
·371·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology,2010 July,Vol．21 No．4
发热、痛觉过敏和局部毛细血管扩张，并且其与水
肿、骨侵蚀等有关联 [9-11]。实验结果表明，TFLS对
FCA诱导的AA大鼠继发性足肿胀有较好的抑制作用，
提示TFLS可能通过减轻或抑制滑膜组织炎症从而达
到减轻关节肿胀的作用。TFLS能明显降低AA大鼠血
清中的NO水平，并显著减少炎症渗出液中PGE2的含
量，从而减轻关节炎症取得治疗效果。研究结果显
示，TFLS具有明显的抗炎作用，提示其作用机制可
能与抑制血清中NO的生成以及减少炎症组织中PGE2
的生成有关。
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（编辑：邓响潮）
收稿时间：2010-01-08
作者简介：叶丽红（ 1967-），女，博士，副教授，副主任医师，硕士研究生导师。研究方向：内科杂病及肿瘤的中医药防治。Email：cocolihong
ye@126.com。通讯作者：章永红，教授，主任医师，博士研究生导师。研究方向：内科杂病及肿瘤的中医药防治。Email：zyhong311@126.com。
基金项目：江苏省自然科学基金项目（BK2007240）；国家科技支撑计划（2006BAI11B08-01）。
抗癌扶正方对人肝癌细胞SMMC- 7721的Bcl- 2基因表达的调控作用
叶丽红1，皮文霞2，程海波1，俞晶华1，张 旭3，章永红1（1.南京中医药大学第一临床医学院，南京 210029；2.
南京中医药大学中药学院，南京 210029；3.南京中医药大学国际教育学院，南京 210029）
摘要：目的 探讨抗癌扶正方（KFP）的抗肝癌作用及机制。方法 采用人肝癌细胞SMMC－7721，经过细胞培
养、MTT法、流式细胞仪检测抗癌扶正方对肝癌细胞生长抑制率的影响及对Bcl-2基因表达的调控作用。结果
抗癌扶正方具有良好的抑制肝癌细胞生长作用，尤其以1，10 mg/mL剂量组的效果最佳，作用程度与化疗药物
类似。结论 抗癌扶正方能够抑制人肝癌细胞SMMC－7721活性。其机理在于下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达，
促进细胞凋亡的产生。
关键词：抗癌扶正方（KFP）；人肝癌细胞SMMC－7721；生长抑制率； Bcl-2基因
中图分类号：R285.5；Q754 文献标识码：A 文章编号：1003-9783（2010）04-0372-04
Regulatory Effect of Kangai Fuzheng Prescription for Human Hepatoma Cells SMMZ-7721 and Bcl-2 Ex－
pression
YE Lihong1，PI Wenxia2，CHENG Haibo1，YU Jinghua1，ZHANG Xu3， ZHANG Yonghong1（1. The First Clinical
College，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210029，China；2.Chinese Herbal Medicine College，
Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210029，China；3. International Education College，Nanjing Uni－
versity of Chinese Medicine，Nanjing 210029，China）
Abstract: Objective To investigate the anticancer effect and mechanism of Kangai Fuzheng Prescription（KFP）which
is prescribed by experienced expert Zhou Zhongying. Methods Human hepatoma cells SMMZ-7721 were cultured to－
gether with KFP extract. The effect of KFP on inhibiting the growth of SMMZ-7721 was evaluated by methyl thiazolyl
tetrazolium（MTT）assay，and the expression of Bcl-2 was detected by flowcytometry. Results It was shown that KFP
had an obvious effect on inhibiting the growth of human hepatoma SMMZ-7721 cells，and the effect of KFP at the
·372·