全 文 ：［收稿日期］ 20100802(008)
［基金项目］ 山东省中医药 2007 － 2008 年度科技发展计划项
目(2007-110)
［作者简介 * 李英霞，副研究员，硕士生导师，主要从事中药质
量控制及资源开发研究，Tel:0531-82949859，E-
mail:li_yx1964@ 163. com
HPLC测定不同产地香附及醋炙香附中木犀草素的含量
李英霞1* ，陆永辉1，冯文2，邢丽芹1
(1. 山东省中医药研究院，济南 250014;2. 泰安市药品检验所，山东 泰安 271000)
［摘要］ 目的:对不同产地香附及醋炙香附中木犀草素的含量进行测定。方法:采用高效液相色谱法，使用 C18柱，以甲
醇-0. 2%磷酸水溶液(55 ∶ 45)为流动相，柱温 30 ℃，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长 350 nm。结果:木犀草素在0. 040 8 ～
0. 367 2 μg线性关系良好，r = 0. 999 4 。8 个产地香附中木犀草素的含量以泰安产的最高，达 57. 35 μg·g － 1，除云南产的较低
(17. 82 μg·g － 1)外，其余产地均在 22. 00 μg·g － 1以上。香附炮制后木犀草素含量有不同程度的升高。结论:建立了 HPLC 测定
香附及炮制品中木犀草素含量的测定方法，并探讨了香附醋炙前后木犀草素含量的变化，为探讨香附醋炙的科学内涵提供了
一定参考。
［关键词］ 香附;醋炙香附;木犀草素;高效液相色谱法;含量
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)01-0056-03
Determination of Luteolin in Cyperi Rhizoma and Cyperi Rhizoma
Fried with Vinegar by High-performance Liquid Chromatography
LI Ying-xia1* ，LU Yong-hui1，FENG Wen2，XING Li-qin1
(1. Shandong Academy of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250014，China;
2. Taian Institute for Drug Control，Tai′an 271000，China)
［Abstract］ Objective:To determine the content of luteolin in Cyperi Rhizoma and Cyperi Rhizoma fried with
vinegar from different areas. Method:The content was determined by HPLC and the measurement conditions were
used as following:kromasil C18(4. 6 mm × 150 mm，5 μm);mobile phase:methanol-water with 0. 2% phosphoric
acid (55∶ 45);the flow rate:1. 0 mL·min － 1;measurement wavelength 350 nm. The temperature of column 30 ℃ .
Result:The linear range of luteolin was ranged from 0. 040 81 to 0. 367 2 μg (r = 0. 999 4). The content of luteo-
lin was 57. 35 μg·g － 1 in Cyperi Rhizoma from Tai’an Shandong，which was the highest in 8 different areas，and
17. 82 μg·g － 1，the lowest from Yunnan，China. The content of luteolin from most areas exceeded 22. 00 μg·g － 1 .
The content of luteolin in Cyperi Rhizoma fried with vinegar from different areas was higher than these herbs before
fring with vinegar. Conculsion:The study supplies a scientific basis for the content of luteolin in Cyperi Rhizoma
and Cyperi Rhizoma fried with vinegar.
［Key words］ Cyperi Rhizoma;Cyperi Rhizoma fried with vinegar;luteolin;HPLC;content
香附为莎草科植物莎草 Cyperus rotundus L. 的 干燥根茎。具有理气解郁、调经止痛之功效。用于
肝郁气滞，胸肋胀痛，消化不良，月经不调，经闭痛经
之症［1］，为妇科常用要药。主产于山东、浙江、湖南、
河南等地，以山东为道地药材。香附质地坚硬，历来
多加工炮制后入药，其临床常用饮片规格为生香附
和醋炙香附。香附成分复杂，药理作用广泛。主要
成分为挥发油类，另外，早期报道其薄层鉴别显示还
有三萜类、黄酮类、糖类、酚类等［2］。以往香附基础
·65·
第 17 卷第 1 期
2011 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 1
Jan.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.01.029
研究和质量评价多侧重于挥发性成分或脂溶性成
分［3-5］，非挥发性成分研究较少。近来，国外报道香
附甲醇提取物具有明显的抗氧化、抗炎作用［6-7］。
Soumaya Kilani-Jaizri 等从香附中分离得到了 8 个新
化合物，其中包括黄酮类成分木犀草素、斛皮苷［8］。
木犀草素具有抗菌、抗炎、解痉、降胆固醇及抗癌等
作用［8-9］。本文建立了高效液相色谱法测定香附中
木犀草素的方法，并对 8 个不同产地香附及醋炙品
中木犀草素的含量进行测定，旨在建立香附黄酮类
成分快速、准确的质量评价方法，为探讨香附醋炙的
科学内涵提供一定参考。
1 材料
Waters 600 高效液相色谱仪(美国 waters 公
司)、Waters 600 四元梯度泵、Waters 996 二级管振列
检测器、XS205DU 型电子天平(梅特勒-托利多仪器
有限公司)，LC-350A 超声中药处理机(济宁市中区
鲁超仪器厂)。木犀草素对照品 (批号 111520-
20054，供含量测定用)购自中国药品生物制品检定
所。香附药材主要购于山东泰安、菏泽、临沂、梁山
及浙江、河南等 8 个产地，经山东省中医药研究院李
英霞副研究员鉴定为莎草 Cyperus rotundus L. 的干
燥根茎。醋炙香附为香附生品照醋炙法(《中国药
典》附录ⅡD)炮制而成。
甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析
纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱 Kromasil C18(4. 6 mm × 150
mm，5 μm);流动相甲醇-0. 2% 磷酸水溶液(55 ∶
45);流速 1. 0 mL·min － 1;柱温 30 ℃;检测波长 350
nm;进样量 10 μL。木犀草素对照品和香附样品色
谱图见图 1。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取木犀草素对照
品适量，置 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，
摇匀，作为对照品溶液(0. 102 g·L － 1)。
2. 3 供试品溶液的制备 取香附样品粉末 3 g，精
密称定，加甲醇 30 mL，超声 30 min，过滤，滤液蒸
干，以甲醇溶解，定容至 10 mL，微孔滤膜(0. 45 μm)
滤过，作为供试品溶液。
2. 4 线性关系考察 精密吸取木犀草素对照品
(0. 102 g·L － 1)0. 2，0. 4，0. 8，1. 0，1. 8 mL，分别置于
5 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色
谱条件测定峰面积。以对照品进样量(X)为横坐
图 1 木犀草素对照品(A)和香附样品(B)HPLC
标，峰面积(Y)为纵坐标进行回归分析，得回归方程
为 Y = 6. 78 × 106X － 3. 34 × 104，r = 0. 999 4，结果表
明木犀草素在0. 040 8 ～ 0. 367 2 μg线性关系良好。
2. 5 精密度试验 精密吸取一定浓度的木犀草素
对照品溶液，依上述色谱条件，连续进样 5 次。结果
峰面积平均值为 1 047 462. 6，RSD 为 1. 01%，表明
仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于 0，
1，2，4，8 h 按上述色谱条件进行测定，结果峰面积平
均值为 674 811. 2，RSD 为 1. 11%，说明样品溶液在
8 h 内基本稳定。
2. 7 重复性试验 取同一产地香附样品粉末 5 份，
每份 3 g，精密称定，按 2. 3 项下方法制备供试品溶
液，按上述色谱条件进行测定。结果 5 份样品中木
犀草素 33. 12 μg·g － 1，RSD 为 1. 32%，表明该方法
重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 精密称取同一产地香附样
品粉 末 5 份，每 份 1. 5 g，精 密 加 入 浓 度 为
0. 102 g·L － 1的木犀草素对照品液 0. 5 mL，按 2. 3 项
下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，
计算回收率。结果 5 份样品中木犀草素的平均回收
率 98. 57%，RSD 为 2. 33%，表明本法回收率符合
要求。
2. 9 样品测定 取不同产地香附样品粉末 3 g，按
2. 3 项下方法制备供试品溶液，进样测定，见表 1。
·75·
李英霞，等:HPLC 测定不同产地香附及醋炙香附中木犀草素的含量
表 1 不同产地香附生品与醋炙品中木犀草素含量(n = 3)
No. 名称 产地 含量 /μg·g － 1 RSD /% 升高率 /%
1 生品香附 山东潍坊 23. 19 0. 60 －
2 醋炙香附 山东潍坊 34. 49 0. 81 48. 73
3 生品香附 山东梁山 33. 67 1. 70 －
4 醋炙香附 山东梁山 35. 20 1. 68 4. 54
5 生品香附 山东泰安 57. 35 0. 37 －
6 醋炙香附 山东泰安 70. 94 0. 32 23. 70
7 生品香附 菏泽单县 23. 73 1. 21 －
8 醋炙香附 菏泽单县 28. 19 1. 00 16. 06
9 生品香附 浙江 25. 96 0. 50 －
10 醋炙香附 浙江 27. 75 0. 91 6. 90
11 生品香附 河南社旗 32. 62 0. 11 －
12 醋炙香附 河南社旗 35. 40 0. 13 5. 76
13 生品香附 云南 17. 82 1. 11 －
14 醋炙香附 云南 20. 71 1. 00 16. 22
15 生品香附 山东临沂 33. 12 1. 30 －
3 讨论与小结
Soumaya Kiliani-Jaziri 等近来评估了从香附中提
取的木犀草素、儿茶酸、阿魏酸的生物活性，在降低
硫代巴比妥酸反应物的产生中木犀草素最起作用
(μDA = 1. 5 nmol·L － 1)，能显著抑制 K562细胞增殖
(IC50 = 25 μg·mL
－ 1)，能保护 DNA 免受 H2O2 /UV-
光解引起的损伤［8］，可见，木犀草素为香附中抗氧
化、抗癌的活性成分之一，因此，测定和比较香附及
炮制品中该成分的含量是有一定参考价值的。
曾对香附样品提取方法进行过比较，结果采用
超声法与回流法提取，测得木犀草素含量相差不大，
故本文采用超声法提取。
曾参考 HPLC 测定车前草中木犀草素含量的有
关文献［10］，以甲醇-0. 2% 磷酸水溶液(45 ∶ 55)进行
流动相预试，但保留时间偏长。经反复试验，最终确
定甲醇-0. 2%磷酸水溶液(55∶ 45)为流动相，木犀草
素色谱峰分离良好，保留时间也较短，约 7 min。
测定结果表明，8 个产地香附生品中木犀草素
的含量以山东泰安产的最高，达 57. 35 μg·g － 1，山东
潍坊、菏泽、临沂和梁山产的含量在 22. 73 ～ 33. 67
μg·g － 1，河南和浙江产的分别为 32. 62 μg·g － 1和
25. 96 μg·g － 1，均在 22. 00 μg·g － 1以上，只有云南产
的最低，为 17. 82 μg·g － 1。山东、浙江、河南为香附
主产地，传统上将产于山东汶河两岸泰安、莱芜等地
的香附称为“汶香附”，质量最佳［11］。本研究结果显
示，泰安产香附中木犀草素的含量最高，这在一定程
度上为香附药材的道地性提供了科学依据。
不同产地的香附经醋炙后，木犀草素含量均有
不同程度的升高，说明醋炙后有利于黄酮类成分木
犀草素的溶出。
本研究建立了 HPLC 测定香附及炮制品中木犀
草素含量的测定方法，并探讨了香附醋炙前后木犀
草素含量的变化，为全面探讨香附醋炙的科学内涵
提供了一定参考。
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［责任编辑 顾雪竹］
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 1
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