全 文 ：生 物 灾 害 科 学 2012, 35(4): 385391 http://xuebao.jxau.edu.cn
Biological Disaster Science, Vol. 35, No. 4, 2012 swzhkx@163.com
收稿日期：20121020
基金项目：福建省 2009年大学生创新性实验计划项目
作者简介：陈秋勇，男，福建漳州人，Email: 493895941@qq.com；* 通讯作者：黄志坚，教授，主要从事临床兽医学的
研究，Email: huangzj1999@sina.com。
DOI：10.3969/j.issn.20953704.2012.04.010
虎尾轮根黄酮类化合物对小鼠肝脏功能影响
陈秋勇 1 ，陈炳华 1 ，黄志坚 1, 2*
（1. 福建农林大学 动物科学学院，福建 福州 350002；2. 福建省动物药物工程实验室，福建 福州 350002）
摘要：以小鼠为动物模型，在饲料中添加分离纯化虎尾轮根的黄酮类化合物，研究其对小鼠肝脏功能的影响。取
体重为(20±2) g小鼠 84只，随机分为 6组，即：空白对照组，模型组，阳性对照组即联苯双酯组(150 mg/kg)，以
及虎尾轮黄酮高、中、低剂量组(450，300，150 mg/kg)，连续给药 21 d。以四氯化碳(CCl4)进行建模，采集小鼠血
清及肝组织匀浆液进行 TAOC、ALB、TP、AST、ALT、MDA、SOD、GSHPx 等指标的检测；取小鼠肝脏进行
组织切片观察。结果表明， （1）与模型组比较，虎尾轮黄酮各剂量组均能分别显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地提
高小鼠 SOD、TAOC、GSHPx、ALB、TP水平和降低 AST、ALT、MDA水平；（2）各剂量组肉眼观察无明显的
病理变化，对各试验组的肝脏组织显微结构进行比较，发现虎尾轮黄酮各剂量组对 CCl4 引起的肝损伤有不同程度
的恢复，保肝护肝作用明显。可见虎尾轮黄酮对小鼠的肝损伤有显著保护作用。
关键词：虎尾轮根黄酮；CCl4 ；肝脏功能；肝脏结构
中图分类号：S284.1; S285 文献标志码：A 文章编号：20953704（2012）04038507
Effects of Flavonoids from Uraria crinita on Liver Function in Mouse
CHEN Qiuyong 1 , CHEN Binghua 1 ，HUANG Zhijian 1, 2*
(1. College of Animal Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;
2. Animal Pharmaceuticals Engineering Laboratory of Fujian Province, Fuzhou 350002, China)
Abstract: The isolated and purified flavonoids from Uraria crinita were added in the diets of the mouse
which were as animal models. The effects of the flavonoids on mouse liver function was studied. Eighty four
mouse, weight (20±2) g, were randomly divided into 6 groups, blank control group, model group, the positive
control group that bifendate group (150 mg/kg), high dose of flavonoids group (450 mg/kg), medium dose of
flavonoids group (300 mg/kg) and low dose of flavonoids group (150 mg/kg). All flavonoids groups of mouse
were fed with the chemical for 21 continuous days. Carbon tetrachloride (CCl4) was used in the model group, and
the mouse serum and liver tissue homogenates were used to the detection of the TAOC、ALB、TP、AST、ALT、
MDA、SOD and GSHPx. The livers of mouse were removed to produce the slice. The results showed as follows:
(1) The SOD, TAOC, GSHPx, ALB and TP level in the mouse treated with the all flavonoids group were
significantly (P<0.05) or extreme significantly (P<0.01) higher than that in the mouse of the model group, and the
AST , ALT and MDA level were lower. Flavonoids Uraria crinita could obviously affect on the repair of chemical
liver. (2) Compared to the mouse in the model group, the liver form of the mouse treated with different doses of
·386· 生 物 灾 害 科 学 第 35卷第 4期
flavonoids from Uraria crinita had no significantly pathological changes observed with eyes. In the microstructure,
the pathological damage was minor with varying degrees of recovery. So the flavonoids from Uraria crinita had a
significantly protective effect on mouse liver injury induced by carbon tetrachloride.
Key words: flavonoids; Uraria crinita; CCl4; liver function; liver structure
虎尾轮为豆科植物猫尾射的全草， 又名狐狸尾、
古钱窗草、猫尾草 [1] 。主要分布于我国福建、广西
等省，常野生于山坡、灌木丛边，秋季采收，全草
含有黄酮甙， 具有保健功能。 闽南一带盛产虎尾轮，
当地人们常将其根部晒干与肉、 骨头一起煲汤食用，
可达到清热解毒、益肾滋肝、保肝护肝、理气和中、
止血消痈等功效。
虎尾轮在许多中草药日志中均有记载，如《广
西中药志》 [2] 中称其味甘，性温，无毒；归肝、胃
二经；行气镇痛，逐瘀化痰，治心胃气痛，痰饮咳
嗽；民间药用广泛，具有行气镇痛、逐瘀化痰、温
肾健腰之功效。国内外文献报道虎尾轮根中含有多
种黄酮 [34] ，如 3,5二羟基7,4′二甲氧基黄酮，当药
黄酮，当药黄酮2″OαL鼠李糖苷等，但虎尾轮根
中的黄酮对动物的生理、生化功能影响如何，报道
不多。本试验拟通过 CCl4 建模试验方法，在小鼠饲
料中添加分离纯化虎尾轮根的黄酮类化合物，研究
其对小鼠肝脏功能的影响，为进一步开发利用虎尾
轮提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物
健康雌性昆明小鼠，购于福州吴氏试验动物中
心。试验小鼠于独立送回风净化笼内饲养，自由饮
水，自由采食，笼内温度为 25～28 ℃，相对湿度为
60%～70%，笼内气压维持在 30%。定期清洁笼具、
饮水瓶和更换垫料。
1.2 试验材料和试剂盒
虎尾轮黄酮提取物：为福建省动物药物工程试
验室提取，于－40 ℃条件保存。
总抗氧化(TAOC)试剂盒、白蛋白(ALB)试剂
盒、总蛋白(TP)试剂盒、谷草转氨酶(AST)试剂盒、
谷丙转氨酶测定(ALT)试剂盒、丙二醛(MDA)测定
试剂盒、超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物
酶(GSHPx)测定试剂盒均购于南京建成生物工程
研究所。
1.3 试验设计
取体重(20±2) g小鼠 84只，先分笼用普通饲料
饲养 l 周，适应实验室条件后进行分组。将小鼠按
体重随机分为 6组， 每组 2 个重复， 每个重复 7只，
各试验组分别为：空白对照组，模型组（0.3%CCl4
花生油），阳性对照组即联苯双酯组(150 mg/kg)，以
及虎尾轮黄酮高、中、低剂量组(450，300，150
mg/kg)。 除空白对照组和模型组按 10 mL/kg体积给
予生理盐水外，其余各组分别以相同体积给予不同
剂量的虎尾轮黄酮和联苯双酯溶液进行灌胃给药，
每天定时灌 1 次，连续给药 21 d。试验过程中每隔
4 d称一次小鼠体重， 以随时根据其体重变化来调整
各试验组药液的饲喂剂量。
1.4 急性 CCl4 肝脏损伤的模型建立
1.4.1 药品的配制 配制 0.3%CCl4 花生油： 精确量
取 0.3 mL CCl4 溶于 100 mL花生油中，充分混匀，
试验前现用现配。
1.4.2 建模 末次给药 2 h后，各试验组除空白对
照组外，其余均按 10 mL/kg 剂量进行腹腔注射
0.3%CCl4 花生油溶液，空白对照组则给予等体积的
花生油。禁食 24 h后，先将各组小鼠进行称重，然
后拉颈脱臼处死，获取血清及相关组织器官，以做
相关指标检测。
1.5 血清的制备与肝组织的处理
每组各选取 8 只小鼠，称重后用乙醚进行吸入
麻醉，待其运动机能丧失后摘取眼球取血，盛装于
1.5 mL离心管中。放至析出血清后，6 000 r/min离
心 10 min，收集血清并分装于微量离心管中，置于
－20 ℃保存，待测。
将小鼠拉颈脱臼处死，取出肝脏，用预冷的生
理盐水中漂洗，除去血液并用滤纸拭干，称量后，
再从中切取一部分进行称量，然后用组织剪剪碎并
倒入玻璃匀浆器中，加入冷生理盐水（4 ℃，加入
的量为该肝脏重量的 9倍）进行匀浆，使组织匀浆
化。然后以 6 000 r/min离心 10 min，收集上清液，
置于－20℃保存待测。
1.6 测定项目与方法
1.6.1 肝脏系数计算 各组试验小鼠拉颈脱臼处
2012 年第 4期 陈秋勇等：虎尾轮根黄酮类化合物对小鼠肝脏功能影响 ·387·
死，取出肝脏和脾脏，用 4℃生理盐水冲洗，滤纸
吸干， 称量， 计算肝脏系数。 脏器系数=脏器质量(g)/
体质量(g)×100 [5] 。
1.6.2 血清及组织匀浆液相关指标的检测 血清及
组织匀浆液按照试剂盒的说明书分别进行总抗氧化
(TAOC)试剂盒、白蛋白(ALB)试剂盒、总蛋白(TP)
试剂盒、谷草转氨酶(AST)试剂盒、谷丙转氨酶测
定(ALT)试剂盒、丙二醛 (MDA)测定试剂盒、超氧
化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的
测定。
1.6.3 组织固定和切片观察 将各试验组的小鼠进
行拉颈脱臼处死后，解剖取出肝脏置于 4℃生理盐
水中， 然后用薄刀片切取大小约为 10 mm×10 mm×2
mm的组织块， 放入 10%甲醛溶液中固定 48 h以上。
石蜡切片，H、E 染色，显微镜观察。
1.7 数据处理与分析
采用 Excel 作图工具作图，各试验数据采用
SPSS13.0 for windows 软件进行统计分析， 试验结果
均以“均数±标准差(ⅹ±SD)”的方式表示，并采用
LSD 法进行方差分析和多重比较。
2 结果与分析
2.1 虎尾轮黄酮对小鼠血清、肝组织匀浆液的
GSHPx与 SOD酶指标的影响
虎尾轮黄酮对小鼠血清、肝组织匀浆液的
GSHPx 与 SOD 酶指标影响的结果见表 1。由表 1
得知， 模型组与其余各试验组比较， GSHPx 和 SOD
水平均明显降低，并且差异极显著(P<0.01)，说明
虎尾轮黄酮对 CCl4 导致的机体损伤有明显的改善
作用，能提高机体的抗氧化水平。而且，虎尾轮黄
酮不同的添加剂量产生一定的量效关系，效果优于
联苯双酯组，虎尾轮黄酮高剂量组的 GSHPx 和
SOD 均高于空白对照组，有较强的抗氧化能力。
表 1 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的 GSHPx 与 SOD的影响
组别 剂量/(mg∙kg 1 ) GSHPx/(U∙mL 1 ) SOD/(U∙mL 1 )
虎尾轮黄酮高剂量组 450 395.67±15.65A 196.23±5.08A
虎尾轮黄酮中剂量组 300 360.37±20.29B 182.27±7.35a
虎尾轮黄酮低剂量组 150 285.87±19.39C 173.13±10.19Bb
联苯双酯组 150 284.94±23.02C 171.01±4.86B
空白对照组 0 360.93±12.35B 171.11±8.38B
模型组 0 81.09±6.93D 146.24±6.66C
注：表中的相同小写字母代表差异性不显著(P>0.05)，不同小写字母代表差异性显著(P<0.05)；相同的大写字母代表差
异不显著(P>0.01)，不同大写字母代表差异性极显著(P<0.01)。下表同。
2.2 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的
AST与 ALT酶指标的影响
虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的
AST 与 ALT 酶指标影响的结果见表 2。模型组的
AST 与 ALT 含量极显著(P<0.01)高于其余各试验
组，说明小鼠的肝细胞受到明显的损害，致使以上
两种酶大量溢出。虎尾轮黄酮各剂量组均极显著
(P<0.01)降低了小鼠 AST和 ALT水平， 不同剂量组
间的差异极显著(P<0.01)。
表 2 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的 AST与 ALT的测定结果
组别 剂量/(mg∙kg 1 ) AST/(U∙mgprot 1 ) ALT/(U∙mgprot 1 )
虎尾轮黄酮高剂量组 450 127.11±4.24A 153.04±6.25A
虎尾轮黄酮中剂量组 300 136.57±5.57a 160.18±4.85B
虎尾轮黄酮低剂量组 150 144.69±5.65b 132.87±2.53C
联苯双酯组
空白对照组
模型组
150
0
0
103.97±5.56C
65.73±3.51B
186.61±9.97D
67.36±2.23D
39.38±3.71E
196.95±2.76F
·388· 生 物 灾 害 科 学 第 35卷第 4期
2.3 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的
TP、ALB 酶的影响
虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的TP与
ALB 酶指标影响的结果见表 3，虎尾轮黄酮各剂量
组极显著(P<0.01)提高了 TP 水平，而且高、中剂量
组极显著(P<0.01)优于联苯双酯组，低剂量组显著
(P<0.05)优于联苯双酯，不过不同剂量组间差异不
显著(P>0.05)。高、中剂量组显著(P<0.05)提高了
ALB 水平， 低剂量组与模型组比较， ALB 略有提高，
但差异不显著(P>0.05)，各剂量组间的差异水平不
显著(P>0.05)。
表 3 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的 TP与 ALB 的测定结果
组别 剂量/(mg∙kg 1 ) TP/(mg∙mL 1 ) ALB/(mg∙mL 1 )
虎尾轮黄酮高剂量组 450 62.53±5.63A 13.57±1.16Aa
虎尾轮黄酮中剂量组 300 63.19±4.72A 13.44±1.32Aa
虎尾轮黄酮低剂量组 150 60.57±3.97Aa 11.65±4.30ab
联苯双酯组 150 55.94±1.94b 13.96±1.42Ac
空白对照组 0 64.23±3.49A 15.55±1.67A
模型组 0 47.05±5.30C 11.08±2.15b
2.4 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的
TAOC、MDA的影响
虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的
TAOC、MDA影响的结果见表 4，虎尾轮黄酮各剂
量组均极显著(P<0.01)提高了 TAOC 活性，高剂量
组极显著(P<0.01)优于中、低剂量组以及联苯双酯
组，并且，各剂量组极显著(P<0.01)降低了 MDA的
水平，高剂量组与中、低剂量组比较，效果明显，
差异达极显著(P<0.01)，中、低剂量组间的差异不
显著(P>0.05)。可见，虎尾轮黄酮能明显提高机体
的抗氧化水平，降低脂质过氧化产物。
表 4 虎尾轮黄酮对小鼠血清及肝组织匀浆液的 TAOC 与 MDA的测定结果
组别 剂量/(mg∙kg 1 ) TAOC/(U∙mL 1 ) MDA/(nmol∙mg 1 )
虎尾轮黄酮高剂量组 450 1.26±0.43A 3.71±1.40Aa
虎尾轮黄酮中剂量组 300 0.77±0.09B 5.85±1.10B
虎尾轮黄酮低剂量组 150 0.66±0.10B 6.96±0.93B
联苯双酯组 150 0.62±0.12B 3.94±1.68 Aa
空白对照组 0 1.08±0.16A 2.37±1.25b
模型组 0 0.24±0.09C 8.32±0.88C
2.5 虎尾轮黄酮对小鼠肝脏的影响
2.5.1 肉眼对肝脏的观察 通过剖检结果可以看
出，模型组的肝脏颜色变浅，苍白，轻度肿胀，表
面粗糙，呈沙砾状，质地变硬，病理变化特征明显。
空白对照组的肝脏色泽鲜红， 质地松软， 包膜完整，
表面平滑，边角锐，无肿胀。其余各试验组的肝脏
与空白对照组比较，肉眼观察无明显的病理变化，
颜色鲜红，大小适中，未见明显肿大。
2.5.2 显微观察 把肝脏制作组织切片后 ， 在显微
镜下观察，如图 16 所示，从图 1 可以看出空白对
照组肝小叶与肝细胞结构完整， 肝索呈放射状排列，
中央静脉与汇管区周围无变性、肿胀细胞，也无炎
性细胞浸润。图 24 可以看出各试验组肝小叶破坏
不显著， 肝细胞存在不同程度的肿胀、 变性和坏死；
出现细胞增生，汇管区周围有少量炎性细胞浸润。
图 5 肝小叶结构破坏不明显， 肝索排列紊乱程度低，
细胞肿胀、变性。图 6模型组病理变化明显，肝小
叶结构紊乱，细胞变性、坏死，汇管区多量炎性细
胞浸润。但是，黄酮剂量 3个处理跟模型组比较，
各剂量组与阳性对照组的肝细胞损伤有所减轻，得
到不同程度的恢复。
2.5.3 肝系数 通常情况下，肝脏受到损伤后会发
生变性、肿胀，体积相对增大。从图 7 可以看出，
与模型组比较，其余各处理的肝脏系数明显较小，
2012 年第 4期 陈秋勇等：虎尾轮根黄酮类化合物对小鼠肝脏功能影响 ·389·
随着虎尾轮黄酮添加剂量的增加，肝脏系数有下降
的趋势，并且高、中剂量组的肝系数小于阳性对照
组，不过与空白对照组对比，肝系数较大。说明虎
尾轮黄酮在一定程度上缓解了肝损伤。
图 1 空白对照组肝脏组织 HE染色结果 图 2 黄酮低剂量组肝脏组织 HE 染色结果
图 3 黄酮中剂量组肝脏组织 HE 染色结果 图 4 黄酮高剂量组肝脏组织 HE 染色结果
图 5 阳性对照组肝脏组织 HE染色结果 图 6 模型组肝脏组织 HE染色结果
图 7 虎尾轮黄酮对小鼠肝系数的影响
·390· 生 物 灾 害 科 学 第 35卷第 4期
3 讨论
3.1 虎尾轮黄酮对 ALT与 AST水平的影响
肝脏是机体重要的生物转化场所，是最大的解
毒器官，其功能的正常与否对机体有着十分重要的
影响。 ALT与 AST水平的高低是衡量肝脏损伤程度
的重要指标。黄酮类化合物在保肝、护肝方面效果
显著，其具有良好的抗氧化作用。唐嘉航 [6] 报道，
银杏叶总黄酮能显著改善肝脏功能，提高其抗氧化
能力，血清中 ALT、AST活性明显降低。本试验研
究得出，与模型组比较，虎尾轮各添加剂量组均极
显著(P<0.01)降低了小鼠 AST和 ALT水平， 保肝护
肝效果明显。
3.2 虎尾轮黄酮对 GSH、SOD以及 TAOC 水平的
影响
机体抗氧化的防御体系与健康紧密联系。机体
内的抗氧化酶，属于酶促防御体系，所起到的保护
和修复作用十分重要 ,谷胱甘肽过氧化物酶
(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)是广泛分布于机
体的抗氧化酶，具有很强的清除自由基能力。马荣
林 [7] 以大鼠进行黄芩总黄酮抗肺纤维化的研究，得
出 100，50，25 mg/kg三个剂量组的黄芩总黄酮均
能不同程度地提高GSH、 SOD水平以及增强TAOC
的活力。本试验表明虎尾轮黄酮对 GSH、SOD 水
平的提高以及 TAOC 活性的增强效果极显著
(P<0.01)，体现了良好的抗氧化能力。
3.3 虎尾轮黄酮对 TP 和 ALB 水平的影响
肝脏是白蛋白的主要合成场所，因此肝功能障
碍、 肝细胞受损是引起白蛋白浓度降低的重要因素，
白蛋白含量减少常常引发总蛋白含量的降低。黄酮
类化合物能促进肝细胞的蛋白质生物合成，对肝细
胞的修复和再生产起积极作用。有研究表明，黄酮
在改善肝脏机能方面效果显著 [8] 。本试验添加不同
剂量的虎尾轮黄酮后，极显著(P<0.01)提高了小鼠
的 TP和ALB水平， 具有促进肝脏合成蛋白的作用。
3.4 虎尾轮黄酮对 MDA水平的影响
MDA 在肝组织中的含量显示了肝细胞受损伤
的程度，郭雪微等 [9] 观察油菜蜂花粉黄酮类化合物
在抗氧化方面的功效中指出，通过对比饲喂黄酮前
后，各试验组的 MDA 水平有明显下降，油菜蜂花
粉黄酮抗氧化效果显著。本试验虎尾轮高、中、低
剂量组均能极显著(P<0.01)降低小鼠 MDA水平， 具
有明显的抗脂质过氧化效果。
3.5 虎尾轮黄酮对 CCL4 导致的化学性肝损伤的影
响
在本试验中，对各组的小白鼠注射四氯化碳
(CCL4)，CCL4 被机体吸入后，受到肝细胞内核糖体
与内质网上细胞色素 P450 的激活，生成一种性质
活泼的三氯甲基自由基(•CCl3)， •CCl3 经氢吸收后继
而对细胞膜中的磷脂分子进行攻击，并与脂质和一
些大分子共价结合，激活膜上的磷酸化酶，从而引
起细胞膜的脂质过氧化，破坏膜的结构和功能的完
整性 [10] ， 从而在相同的因素下破坏各试验组小白鼠
的肝脏。李红等 [11] 研究柳叶鬼针草总黄酮对肝损伤
的保护作用过程中，运用 CCL4 建立急、慢性肝损
伤模型，通过设置高、中、低柳叶鬼针草总黄酮剂
量组、模型组、空白对照组以及阳性对照组，得出
肝脏结构显微结果为：与模型组比较，阳性对照组
和黄酮各剂量组对损伤的肝脏均有不同程度的恢
复。亢泽春等 [12] 探讨甘薯黄酮对肝细胞损伤的保护
效果， 通过设置不同剂量甘薯黄酮剂量组， 以 CCL4
制作损伤模型，采用 MTT 法检测肝细胞活性以及
琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况，结果显示，甘
薯黄酮能明显保护肝细胞损伤，抑制肝细胞凋亡。
本试验中，在对经 CCL4 造模后，对空白组合
模型组肝脏进行观察，用肉眼观察发现，空白对照
组肝脏颜色鲜红、质地柔软光滑，边角锐；而模型
组的肝脏颜色变浅，苍白，轻度肿胀，表面粗糙，
呈沙砾状，质地变硬，病理变化特征明显。在显微
结构下，空白对照组肝细胞索排列整齐，肝细胞完
整，排列有序而紧凑；模型组则肝小叶结构破坏，
肝索排列紊乱、断裂，细胞坏死，多量炎性细胞浸
润。说明 CCL4 造模成功，引起肝细胞损伤，产生
了显著的病理变化。其余各试验组的肝脏与空白对
照组比较， 肉眼观察无明显的病理变化， 颜色鲜红，
大小适中，未见明显肿大；显微结构病理损伤较模
型组轻微，出现不同程度的恢复。可见，虎尾轮黄
酮对 CCL4 导致的肝损伤有显著改善作用，保护效
果明显。
4 结论
虎尾轮黄酮能明显提高小鼠抗氧化能力、促进
肝脏合成蛋白，降低 ALT、AST水平、抑制脂质过
氧化产物的生成、对化学性肝损伤的修复作用效果
2012 年第 4期 陈秋勇等：虎尾轮根黄酮类化合物对小鼠肝脏功能影响 ·391·
明显，保肝护肝作用明显。这些结果均表明虎尾轮
根黄酮提取物具有抗氧化、防病抗衰、增强机体免
疫力等作用， 具有较大的保健品和添加剂开发价值。
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