全 文 ：不同采收期的紫苏叶和白苏叶中迷迭香酸的含量测定
黄亮辉1，苏琪2，张新新1，孙文基1
* ，程显隆2，魏锋2
(1. 西北大学生命科学学院西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室，西安 710069;
2. 中国食品药品检定研究院，北京 100050)
摘要 目的:测定不同时期采收的紫苏叶和白苏叶中迷迭香酸的含量，确定最佳采收期。方法:采用 HPLC法测定迷迭香酸的
含量。色谱柱:Welch RP － C18柱(250 mm ×4. 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇 － 0. 1%磷酸水溶液(39∶ 61) ;流速:1. 0 mL·min;检
测波长:330 nm;柱温:28 ℃。结果:双紫苏叶和单紫苏叶中迷迭香酸含量从 5 ～ 7 月逐渐下降，从 7 ～ 8 月逐渐升高并达到最
高，8 ～ 10 月含量又依次下降;白苏叶中迷迭香酸含量从 5 ～ 8 月逐渐升高并在 8 月达到最高，8 ～ 10 月含量又依次下降。结
论:双紫苏叶、单紫苏叶和白苏叶的最佳采收期均为 8 月。
关键词:中药采收期分析;紫苏叶;白苏叶;迷迭香酸;不同采收期样品;含量比较;高效液相色谱法
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:0254 － 1793(2012)10 － 1753 － 03
Determination of rosmarinic acid in leaf of Perilla frutescens (L．)
Britt． var． typica (Makino)Makino and Perilla frutescens (L．)
Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo at different harvest time points
HUANG Liang － hui1，SU Qi2，ZHANG Xin － xin1，
SUN Wen － ji1* ，CHENG Xian － long2，WEI Feng2
(1. Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China，Ministry of Education，the College of Life Sciences，
Northwest University，Xian 710069，China;2. National Institutes for Food and Drug Control，Beijing 100050，China)
Abstract Objective:To determine the contents of rosmarinic acid so as to find out the best harvest time of Perilla
frutescens (L．)Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo (abbr:PFA) ，Perilla frutescens (L．)Britt． var． acuta (Thunb．)
Kudo form． discolor (Makino)Kudo (abbr:PFAD)and Perilla frutescens (L．)Britt． var． typica (Makino)Makino
(abbr:PFT)．Methods:The content of rosmarinic acid was determined on a Welch RP － C18 analytical column(250
mm ×4. 6 mm，5 μm)with the column temperature at 28 ℃ ． An isocratic elution of methanol(A)and phosphonic
acid solution(B) (39∶ 61，v /v)was applied． The flow rate was 1. 0 mL·min －1 and the detector wavelength was set
at 330 nm． Results:The contents of rosmarinic acid in leaf of PFAD and PFA decreased from May to July，and grad-
ually increased from July to August and reached the highest level in August，and then decreased again from August
to October． The contents of rosmarinic acid in leaf of PFT increased from May to August and reached the highest lev-
el in August，and then decreased from August to October． Conclusion:August is the best time to harvest leaf of
PFA，PFAD and PFT．
Key words:harvest time analysis of traditional Chinese medicine;leaf of Perilla frutescens var． acuta;leaf of Perilla
frutescens var． typica;rosmarinic acid;samples of diverse harvest time;contents comparison;HPLC
唇形科紫苏属一年生草本植物苏 Perilla frutes-
cens (L．)Britt．有 1 个种、3 个变种和 7 个变型，3 个
变种分别为白苏 Perilla frutescens (L．)Britt． var．
typica (Makino)Makino、紫苏 Perilla frutescens (L．)
Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo和皱紫苏 Perilla fru-
tescens (L．)Britt． var． crispa (Thunb．)Decne，紫苏
有叶两面紫色(简称双紫苏叶)和面绿背紫(简称为
单紫苏叶)2 个变型，后者拉丁学名为 Perilla frutes-
—3571—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(10)
* 通讯作者 Tel:(029)88304569;E － mail:cxbml@ nwu． edu． cn
cens (L．)Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo form． dis-
color (Makino)Kudo［1］。紫苏叶为我国传统中药，
能解表散寒、行气和胃，可用于风寒感冒，咳嗽呕恶，
妊娠呕吐，鱼蟹中毒［2］;白苏叶有类似功效。紫苏
叶中含有迷迭香酸［3］，该酸具有抗炎、抗氧化和免
疫抑制等多种活性［4］，为紫苏叶的主要活性成分之
一。目前已有报道不同品种和不同生育时期紫苏叶
中迷迭香酸含量测定［5］，高速逆流色谱分离纯化紫
苏叶中迷迭香酸［6］，气相色谱法测定紫苏叶中紫苏
醛的含量［7］，不同方法提取的白苏叶挥发油的气质
联用成分分析［8］，超临界 CO2 萃取紫苏叶挥发油及
其成分分析［9］等。本文以迷迭香酸含量为指标，考
察不同时期采收的紫苏叶和白苏叶中迷迭香酸的含
量，为确定其最佳采收期提供参考。
1 仪器与试药
Waters Alliance 2695 高效液相色谱仪，Waters
2487 紫外检测器，Empower色谱工作站;Sartorius BT
25 S型(max = 21 g，d = 0. 01 mg)、梅特勒 －托利多
AL104 型(max = 110 g，d = 0. 0001 g)和天东衡 HX
－1001T 型(max = 1 kg，d = 0. 1 g)电子天平，昆山
KQ －100DE型数控超声波清洗器。
双紫苏叶、单紫苏叶和白苏叶为 5，6，7，8，9，10
月每月第 2 d 采收于西北大学果园，阴干后用样品
袋密封保存于阴凉处，经西北大学胡正海教授鉴定;
迷迭香酸对照品购于中药固体制剂制造技术国家工
程中心(批号 1189 － 090422，供含量测定用) ;甲醇
为色谱纯，磷酸为分析纯，水为重蒸水。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取迷迭香酸对照
品 10. 3 mg，加 80%甲醇溶解并定容至 50 mL，配制
成浓度为 206 μg·mL －1的对照品溶液，避光冷藏。
2. 2 供试品溶液的制备 取本品粉末(过 4 号筛)
约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
80%甲醇 50 mL，密塞，称定重量，超声(100 W，40
kHz，25 ℃)45 min，放冷，再称定重量，用 80%甲醇
补足减失的重量，摇匀，0. 2 μm微孔滤膜过滤，取续
滤液，即得。
2. 3 色谱条件 参照相关条件［10］并经试验确定色
谱条件。色谱柱:Welch RP － C18(250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ;流动相:甲醇 －0. 1%磷酸水溶液(39 ∶ 61) ;流
速:1. 0 mL·min －1;检测波长:330 nm;柱温:28 ℃。
在上述色谱条件下，对照品及样品色谱图见图 1。理
论塔板数以迷迭香酸计算不低于 3000。
图 1 对照品(A)、双紫苏叶样品(B)、单紫苏叶样品(C)和白苏叶
样品(D)的 HPLC图
Fig 1 HPLC chromatograms of reference substance(A) ，sample of PFA
leaf(B) ，sample of PFAD leaf(C)and sample of PFT leaf(D)
1. 迷迭香酸(rosmarinic acid)
2. 4 方法学考察 根据已报道的方法学考察结
果［10］，本实验的线性关系、精密度、重复性、稳定性、
回收率等均符合实验的要求。
2. 5 样品含量测定 精密称取 5 ～ 10 月的双紫苏
叶、单紫苏叶和白苏叶各 2 份，按“2. 2”项下方法制
备供试品溶液，分别进样 10 μL;精密吸取 206 μg·
mL －1对照品溶液 15 μL 进样 3 次。用 C样 = 1. 5 ×
206 μg·mL －1 × A样 /A对计算，得样品浓度，再计算
样品含量，结果见表 1。
—4571— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(10)
表 1 样品中迷迭香酸含量测定结果(%，n =2)
Tab 1 Determination results of rosmarinic acid in sample
样品
(sample)
5 月
(May)
6 月
(June)
7 月
(July)
8 月
(August)
9 月
(September)
10 月
(October)
双紫苏叶(PFA leaf) 2. 87 1. 84 1. 79 2. 93 2. 67 2. 48
单紫苏叶(PFAD leaf) 2. 58 1. 86 1. 16 3. 19 1. 38 1. 11
白苏叶(PFT leaf) 1. 07 1. 69 1. 73 2. 50 1. 44 1. 32
3 讨论与分析
3. 1 本实验考察了不同比例(39 ∶ 61;38 ∶ 62;37 ∶
63)的流动相甲醇 － 0. 1%磷酸水溶液，发现双紫苏
叶样品只有在比例为 39∶ 61 时迷迭香酸峰分离度较
好，白苏叶和单紫苏叶此时亦有较好的分离度，故选
用甲醇 － 0. 1%磷酸水溶液(39∶ 61)作流动相。
3. 2 本实验用超声法制备供试品溶液，考察了浓度
分别为 20%，40%，60%，80%，100%甲醇水的提取
效率，发现 80%的甲醇水提取效果最好;同时考察
了超声时间 15，30，45，60，90 min 对迷迭香酸提取
率的影响，发现超声 45 min后迷迭香酸含量达到最
高，45 min之后，超声时间对提取率影响不大。所以
选择超声时间为 45 min。
3. 3 单紫苏叶和双紫苏叶中迷迭香酸含量从 5 ～ 7
月依次下降，从 7 ～ 8 月逐渐升高并达到最高，8 ～ 10
月含量又依次下降;白苏叶中迷迭香酸含量从 5 ～ 8
月逐渐升高并在 8 月达到最高，8 ～ 10 月含量又依
次下降。因此，白苏叶、单紫苏叶和双紫苏叶的最佳
采收期均为 8 月，此时各植株生长旺盛。
3. 4 8 月份的 3 种样品中，单紫苏叶中迷迭香酸的
含量最高，白苏叶的最低，若以迷迭香酸含量为苏叶
质量指标，则单紫苏叶质量最好。
参考文献
1 SUN Xiong － cai(孙雄才)． Authentication of Perilla frutescens
(L．)Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo and Perilla frutescens (L．)
Britt． var． typica (Makino)Makino(紫苏和白苏品种的鉴别)． Ac-
ta Nanjing Pharm Coll(南京药学院学报) ，1961，6(6) :1
2 ChP(中国药典)． 2010. Vol Ⅰ(一部) :318
3 Aritomi M，Kumori T，Kawasaki T． Cyanogenic glycosides in leaves
of Perilla frutescens var． acuta． Phytochemistry，1985，24(10) :2438
4 LI Wei － guang(李伟光) ，LIANG Jing － yu(粱敬钰)． Research
progress of rosmarinic acid(迷迭香酸的研究进展)． Strait Pharm
J(海峡药学) ，2004，16(1) :1
5 ZHANG Xin(张鑫) ，ZHANG Zhi － jun(张志军) ，LI Hui － zhen
(李会珍) ，et al． Extraction and determination of rosmarinic acid
from Perilla leaves(紫苏叶中迷迭香酸的提取及测定)． Sci Tech
Food Int(食品工业科技) ，2009，30(11) :235
6 HUANG Liang － hui(黄亮辉) ，ZHAO Ying － yong(赵英永) ，
WANG Li － li(王李丽) ，et al． High － speed counter － current chro-
matography separation and purification of rosmarinic acid fron Peril-
la frutescens (L．)Britt． var． acuta (Thunb．)Kudo form． discolor
(Makino)Kudo(高速逆流色谱分离纯化紫苏叶中迷迭香酸)．
Chin J Pharm Anal(药物分析杂志) ，2011，31(11) :2087
7 WANG Yu － ping(王玉萍) ，ZHU Zhao － yi(朱兆仪) ，YANG Jun
－ shan(杨峻山)． Quality control for Folium Perilla Ⅰ． Determina-
tion of perillaldehyde in Perilla leaf by GC(紫苏叶的质量研究 －
Ⅰ．气相色谱法测定紫苏叶中紫苏醛的含量)． Chin J Pharm A-
nal(药物分析杂志) ，2000，20(5) :307
8 QIU Qin(邱琴) ，LING Jian － ya(凌建亚) ，ZHANG Li(张莉) ，et
al． GC － MS analysis of chemical constituents of the essential oil
from Perilla frutescens (L．)Britton． by different extraction methods
(不同方法提取的白苏叶挥发油的气质联用成分分析)． Chin J
Pharm Anal(药物分析杂志) ，2006，26(1) :114
9 JIN Jian － zhong(金建忠)． Supercritical CO2 extraction and analy-
sis of volatile oil of Perilla frutescens leaves(超临界 CO2 萃取紫苏
叶挥发油及其成分分析)． Chin J Pharm Anal(药物分析杂志) ，
2011，31(5) :826
10 HUANG Liang － hui(黄亮辉) ，SU Qi(苏琪) ，ZHAO Ting － ting
(赵婷婷) ，et al． Determination of rosmarinic acid in seeds and its
processed products of Perilla frutescens (L．) Britt． var． typica
(Makino)Makino and Perilla frutescens (L．)Britt． var． acuta
(Thunb．)Kudo(白苏子和紫苏子生品及其炮制品中迷迭香酸
的含量测定)． J Chin Med Mater(中药材) ，2010，33(12) :1856
(本文于 2012 年 7 月 25 日修改回)
—5571—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(10)