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第 1 0卷 第 4 期
2008 年 4 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 10 No. 4
Apr . ,2008
牛蒡(Arctium lappa L.)为菊科、牛蒡属草本植
物。原产于亚洲,我国自古以来南北各地均有分布。
最初以种子作为药材;唐宋时期采食根、叶入蔬;明
代已少食用,及至现代,台湾以及上海、北京、沈阳、
石家庄、郑州等地区都有栽培。牛蒡的名称始见于
南北朝时的《名医别录》, 又因其果壳多刺勾之故,
有 “恶实”、“鼠粘子”、“蝙蝠刺”、“夜叉头”等别名[1]。
牛蒡子其性味辛苦、寒,具疏散风寒、宣肺透
疹、消肿解毒之功效。牛蒡子中主要含有牛蒡子苷、
牛蒡子苷元、罗汉松脂素、牛蒡酚A~H等木脂素类
成分和挥发油及油脂类成分[2-3]。
1 药材与试剂
将20个产地的牛蒡子(果实以饱满为佳),其
中辽宁地区17个,吉林地区3个粉碎成过60目
筛的细粉,称量、备用。Agilent 1100 LC Agilent
Technologies高效液相仪(美国安捷伦科技有限公
司)G21771AA-UV检测器;安捷伦色谱工作站;
KQ3200 超声波清洗器(江苏昆山)。所用试剂为分
析纯(AR)甲醇,天津市科密欧化学试剂有限公司。
分析纯(AR),乙醇国药集团化学试剂有限公司。色
谱甲醇,天津市科密欧化学试剂有限公司。
2 实验方法
2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18柱
(4.6 mm×150mm,5μm);流动相:甲醇:水(1:1.5);
流速:1.0mL/min;检测波长:280nm;柱温:25℃。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取在五氧化二磷干
燥器中减压干燥24h的牛蒡苷对照品适量,用甲醇
制成每毫升含0.5001mg的对照品溶液,即得。
2.3 供试品溶液的制备 取20个产地的牛蒡子(以
果实饱满者为佳)约0.5g粉碎成过60目筛的细粉,
精密称定,置锥形瓶中,加甲醇约45mL,置超声波清
洗器中,超声25min,取出,过滤,滤液定溶至50mL
容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。溶液经0.45μm微
孔滤膜滤过,即得[4-5]。
2.4 线性关系考察 精密吸取牛蒡苷对照品溶液
(0.617mg/mL)各2μL、4μL、6μL、8μL、10μL,分别注
入高效液相色谱仪中,按上述色谱条件,测定峰面
积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,计算回归
方 程 为:y=362.56668x-18.44459, r=O.9998。 结
果表明:牛蒡苷在1.234~6.170μg线性关系良好。
表1 牛蒡子中牛蒡苷的含量测定结果
牛蒡子产地 样品重量(g)峰面积的平均值 牛蒡子苷元含量(%)
郜家店 0.5043 2654.5 6.80
牛庄 0.5016 2843.5 7.33
青堆子 0.4997 2377 6.15
英额门 0.4991 2498 6.47
草河口 0.5033 2491.5 6.39
柏家沟 0.5028 2374 6.10
海浪 0.5005 2685.5 6.94
石岭子 0.5002 2076.3 5.37
南崴子 0.5013 1840.9 4.75
郭家堡 0.5009 2660.5 6.87
大石桥 0.5007 2871 7.41
双庙 0.5014 2803.8 7.23
白清 0.4997 2444.5 6.32
大虎山 0.5005 2827 7.29
汤岗子 0.5004 1901.75 4.91
耿家 0.5039 2129 5.46
陡岗子 0.5009 2828.5 7.29
叶家村 0.5018 2729.6 7.03
边门 0.4997 2548.4 6.59
磊山 0.5033 2241.5 5.76
2.5 精密度试验 上述色谱条件下,取同一供试品
溶液,连续进样5次,每次5μL,同样方法处理数据。
结果提示,该方法的精密度良好,RSD(%)为0.98。
2.6 稳定性试验 在室温条件下,精密吸取同一样
品溶液,按样品测定方法在0、2、4、6、8、10h间隔内
分别测定峰面积,结果提示,色谱峰在10h内没有明
不同产地牛蒡子中所含成分牛蒡苷含量测定
于 ,康廷国,王 冰,苑 琳
(辽宁中医药大学,辽宁 大连 116600)
摘 要:目的:对不同产地牛蒡子中所含成分牛蒡苷进行含量测定。方法:以HPLC法测定了辽宁20个产地牛
蒡子中牛蒡苷的含量。结果:测定牛蒡子中牛蒡苷含量,方法稳定、可靠。结论:本实验通过对不同产地牛蒡子进
行含量测定,表明不同地区生态环境对牛蒡子中牛蒡苷含量有一定影响。
关键词:牛蒡子;牛蒡苷;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1673-842X (2008) 04- 0148- 02
Assay the Contert of the Seed of the Arctiun Lappa in Different Areas
YU Yao,KANG Ting-guo,WANG Bing,YUAN Lin
(Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,Liaoning,China)
Abstract:Objective:Assaying the seed of the Arctium lappa content. Methods:The method by TLC for
the different place of production qualitation identification for the seed of the Arctium lappa,though HPLC
determine twenty places of production for the seed of the Arctium lappa the glycoside in Arctium lappa.
Results:The spots on the TLC are clear by the methods of qualitative identification by TLC,the resolution is
well . Conclusion:This experiment through the different place of production of the seed of the Arctium lappa
assaying ,show the different areas biogeocoenosis ecological environment have some effect.
Keywords:the seed of the Arctium lappa;the glycoside in Arctium lappa;content determination
收稿日期:2007-11-10
基金项目:国家科技部项目(2005dka21004)
作者简介:于 (1981-),男,辽宁沈阳人,硕士研究生,主要从事中药鉴定学以及植物资源学研究。
通讯作者:康廷国(1955-),男,教授,博士生导师,Email:kangtg@lnutcm.edu.cn
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2008.04.150.yuy.084
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Apr . ,2008
穿龙骨刺片的定性鉴别
潘文灏
(辽宁中医药大学附属医院药剂科,辽宁 沈阳 110032)
摘 要:建立穿龙骨刺片的定性鉴别方法。采用显微鉴别法对方中穿山龙进行鉴别;采用薄层色谱法对方中
川牛膝、淫羊藿进行鉴别。结果:显微明显且专属,薄层斑点清晰。为该品种质量分析建立了可行的鉴别方法。
关键词:穿龙骨刺片;显微鉴别法;薄层鉴别法;齐墩果酸;淫羊藿苷
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2008) 04- 0149- 01
穿龙骨刺片收载于国家中成药标准,由穿山龙、
淫羊藿、狗脊、川牛膝、熟地黄、枸杞子组成,具有补肾、
健骨、活血、止痛的功效,用于骨质增生、骨刺疼痛。为
控制其质量,笔者对本方中的穿山龙、川牛膝、淫羊藿
的鉴别方法加以研究,建立了可行的质量控制方法。
1 仪器与试药
显微镜OLYMPUS(日本),AND FR-200型电
子天平(日本),ZF-I型三用紫外分析仪;对照品均
购于中国药品生物制品检定所。试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 穿山龙的显微鉴别 取本品2片,研细,置显
微镜下观察:木化薄壁细胞多成片,淡黄色或黄色;
呈长椭圆形、长方形或梭形,直径26~77μm,长至
343μm,壁厚2~5μm,微木化,孔纹较小而稀疏。草
酸钙针晶多成束,黄色,常见于黏液细胞中,针晶束
长48~112μm。
2.2 川牛膝的薄层色谱鉴别 取本品10片,研细,
加稀乙醇50mL,盐酸5mL,加热回流1h,滤过,滤液
浓缩至约20mL,加乙醚振摇提取2次,每次30mL,合
并乙醚液,回收溶剂至干,残渣加甲醇1mL使溶解作
为供试品溶液;另取齐墩果酸对照品,加甲醇制成每
1mL含2mg的对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典
2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各
5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇
(40∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸试
液,在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中,在与
对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2.3 淫羊藿的薄层色谱鉴别 取2.2项下的供试品溶
液,作为供试品溶液。另淫羊藿苷对照品,加甲醇制成
每1mL含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取上
述两种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,
以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)为展开剂,
展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试
品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜
色的斑点。喷以三氯化铝溶液,在105℃烘数分钟,再
置紫外光灯(365nm)下检视,显黄绿色荧光斑点。
3 小 结
穿龙骨刺片由穿山龙、淫羊藿、狗脊、川牛膝、熟
地黄、枸杞子组成。原标准中无定性鉴别项,无法有
效控制质量。故参照《中国药典》2005年版一部等书,
用显微鉴别法鉴别穿山龙,用薄层色谱法以淫羊藿
苷鉴别淫羊藿,以齐墩果酸鉴别川牛膝,经实验,穿山
龙的显微特点明显且专属,重现性好;淫羊藿、川牛
膝的鉴别专属性强,薄层斑点清晰,重现性好,阴性液
无干扰。可作为穿龙骨刺片的质量控制方法。◆
收稿日期:2007-11-21
作者简介:潘文灏(1974-),男,辽宁沈阳人,主管药师,学士,主要从事药品调剂工作。
显变化,RSD(%)为1.04,说明牛蒡苷在10h内稳定。
2.7 重现性试验 按样品测定方法, 取同一供试品
进行5次平行实验,结果提示,该方法重现性良好,
RSD(%)为0.58。
2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品
(牛蒡子苷 7.20 %),分别加入牛蒡子苷对照品,按样
品测定方法进行测定,计算回收率,结果牛蒡子苷的
平均回收率为98.81%,RSD为1.23%(n=5)。
2.9 测定方法 精密吸取对照品溶液、供试溶液各
10μL,注入高效液相色谱仪中,测定牛蒡子中牛蒡
苷色谱峰面积,用外标法计算牛蒡子中牛蒡苷的含
量[6-7],测定结果,见表1。
3 结果与讨论
牛蒡子为临床常用药,为寻找与临床功效相适的
活性成分已进行了许多基础性研究,文献报道其有效
成分为木脂素类化合物牛蒡苷等。本文采用HPLC
法测定了20个产地牛蒡子中牛蒡苷的含量,试验结果
表明:不同地区牛蒡子中牛蒡苷含量有一定差异。
实验结果表明,不同产地不同生态环境对牛蒡
子有效成分的含量有一定影响,为了进一步开发和
利用质量较好的牛蒡子,在人工栽培上应该对生态
环境进行必要选择,确定适合高质量牛蒡子各种不
同的生态环境和生态因子。
本试验研究,确立了测定牛蒡子HPLC方法,方
法的重复性、稳定性、精密度、回收率、线性良好,方
法准确、可靠。◆
参考文献
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