全 文 ：南
S O U t h C h in a A g ri
业
C U l t U r e
第 2卷第 9期
V o 】. 2 N o . 9
2 (X) 8年 9 月
5 e D
.
2 0 0 8
P P 3 3 3对草石蚕脱毒试管苗生长与保存的影响
刘 弘 , 谭鹏浩
(重庆三峡职业学院农业与生物工程 系 , 重庆 万州 40 40 01 )
摘 要 : 在革石 蚕 ( S t a e h y s S i e b o l d i i M i g . m iP ) 试管苗继代培 养阶段 以 M S 为基本培养基 , 添加 p p 3 3 3
浓度为 8 一 10 m gl L 能使试管苗明显矮化 , 茎节粗壮 , 试管苗的保存时期可延 长至 4 一 5 个月 ; 生根
培养阶段以 l /ZM S + N A A O. 5 m glL 添加 p P P3 3 3 浓度为 6 一 10 m g几
, 能促进根 系发育 , 改善根系质 1 ,
增 强幼苗杭逆性 , 提高移栽成活率 。 移栽后 缓苗期短 , 生长旺盛 。
关键词 : 苹石蚕 ; 试管苗 ; 植物生长调 节剂 ; PP 3
一草石蚕 (atS c hys S i e b o lid i M i g
.
m iP ) 别名螺丝菜 、
宝塔菜 、 地枯牛 , 为唇形科水苏属多年生宿根性草本
植物 。 其地下茎富含蛋白质 、 淀粉 、 水苏糖及 B 族维
生素 , 经加工腌演后清香脆嫩 、 开胃可口 , 为佐餐之
佳品 。 草石蚕不能结种子 , 以地下茎进行无性繁殖 ,
常因病毒侵染积累 , 导致种性退化 , 产量及品质下
降 。 笔者通过组织培养技术培养脱毒苗已在生产中
逐渐应用 , 对草石蚕品种提纯复壮起到明显效果 。 然
而 , 草石蚕试管苗增殖快 , 继代周期短 , 频繁继代培
养容易造成叶色退绿 , 茎杆徒长 , 使移栽成活率下
降 , 并增加生产成本 。 本试 验将植物生长调节 剂
P3P 3 应用于草石蚕脱毒苗试管繁育中 , 研究其对草
石蚕试管苗的生长发育 、 种质保存及生根移栽的影
响 。
1 材料与方法
.l 供试材料
用本校植物组织培养实验室继代培养 2 0 次的草
石蚕试管苗作试验材料 。 PP 3 3 3 为 15 % 可湿性粉剂 ,
四川国光农化有限公司生产 。
12 试验方法
①继代培养
以 M S 为基本培养基 , 附加 P P 3 3 处理浓度为 2 、
4
、
6
、
8
、
10
、
12
、
14
、
16 m g几 , 以不添加 Pp 3 3 3的 M S
培养基为对照 , 共 9 个处理 。 将草石蚕试管苗切割成
长约 1 c m 、 带 1对叶片的茎段 , 每瓶接种 6 苗 , 每个
处理 3 0 瓶 。 培养条件为温度 23 一 25 ℃ , 光照 1 2 h ld ,
15 0 0 一 2 0 0 0 L x 。 转接后 6 0 d 从每个处理中随机抽取 5
瓶 , 取出植株调查统计其生长情况 。 继续培养 , 定期
观察 , 统计试管苗最长保存时间 。
②生根培养
培养基为 112M S + N A A 0 . 5 m g l L , 附加 p 3 3 3处
理浓度同上 , 以 1 2M S + N A A .0 5 m g几 培养基为对
照 。 选择生长一致 、 苗高 3 . s c m 左右 (有顶芽和 2 对
侧叶 ) 幼苗 , 每瓶接种 8苗 , 每个处理 25 瓶 。 培养条
件为温度 25 一 27 ℃ , 光照 14 川 d , 20 0 L x 。 室内培养
1 5 d 天后将培养瓶移入室外 , 先置于散射光下 s d , 然
后打开瓶 口 , 再置放 d3 。 取出瓶苗 , 用清水洗净培养
基 , 每处理随机抽取 5 瓶调查生根情况 , 然后移栽于
用珍珠岩加泥炭土 (卜 l) 作为基质的苗床中 。 驯化移
栽时间在 3 月下旬进行 , 苗床温度控制在 巧 一 2 0 ℃ ,
相对湿度 8 0% , 3 0 d 后调查生长情况及统计成活率。
上述培养基均加入白糖 30 9几 、 琼脂 5 9几 。 用容
l 为 4 0 m L (直径 8 c m 、 高为 1 1 c m ) 的广口瓶培养 ,
南 方 农 业 第 2卷第 9期 20 ( )8年 9月
继代培养每瓶分装培养基 5 0 L m, 生根培养每瓶分装
培养基 40 mL
。
2 结果与分析
刀 对试 , 苗生长的影晌
继代培养 6 0 d调查情况显示 (见表 l) : 与对照比
较 , 在培养基中添加 PP 3 3 对草石蚕试管苗生长均有
抑制作用 。 随着添加浓度的增加 , 株高明显矮化 , 茎
杆变粗 , 茎节缩短 , 叶色更绿 。 但超过一定浓度后抑
制作用过强会影响植株正常生长 。 当 P3P 3 浓度为 8一
10 m g几 时植株生长情况最佳 , 茎节粗壮 , 叶片浓绿 ,
生长旺盛 。 当 P P 33 浓度在 12 m g几 以上时 , 试管苗
株高被严重抑制 , 叶片变小 、 向下翻卷 , 甚至出现崎
裹 1 植物生长调节剂对草石蚕试管苗生长的影晌
P 3 3浓度
(m泌 ) 慧 节位。 平均节间长(cm ) 叶片生长情况 幼苗健壮程度
叶浅绿 、 下部叶发黄
叶浅绿 、 下部叶发黄
叶浅绿 、 下部叶发黄
叶绿
叶浓绿
叶浓绿
叶绿 、 略小 、 微向下翻卷
叶绿 、 极小 、 卷曲崎形
叶绿、 极小 、 卷曲崎形
+ + +
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.
5
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.
1
3
.
2
2
.
8
7
.
6
5 3
注 : 山培养时间 6 0 d 必 “ + ” : 幼苗健壮程度 ; “ 一 ” : 幼苗药害程度 。
形 。
U 对试管苗苗离及保存时间的影晌
从表 2看出: 在不添加 P P 3 3 3的 M S培养基 (C K )
中试管苗转接后生长迅速 , 3 0 d 后已基本长满培养瓶 ;
60 d 后生长变缓 . 下部叶片开始变黄 。 培养瓶内的培
养签明显减少 , 养分消耗快 ; g o d 后试管苗生长基本
停止 , 培养瓶中养分已耗尽 , 植株除顶梢绿色 , 大部
分叶片已枯黄 ; 在 1 2O d 时调查植株已全部枯死 。 培
养基中添加一定浓度 P P 3 3 能延缓幼苗生长 , 其中以
P 3 3浓度为 8 一 10 m创t 的处理中 , 植株生长良好 , 茎
节粗壮 。 在 1 2 O d 调查植株下部有少量叶片变黄 , 但
仍能生长 ; 1 5 0 d 后植株大部分叶片枯黄 , 但茎杆仍
表 2 植物生长调节剂对草石蚕试管苗苗高及保存时间的影响
P P 3 3 3 浓度 苗高 (cnI )
(m目L ) 3d0 6( M 9( 月 12侧 15kl( 18沉 2 1kl( 2粼记 27侧
0 9
.
2 12
.
4 13
.
1 叶黄 枯死
2 7
.
6 11
.
8 13
.
5 叶黄 枯死
4 .7 6 1
.
4 13 .2 叶黄 叶黄 枯死
6 .6 8 .9 1 1
.
0 12 2 叶黄 叶黄 叶黄 叶黄 干枯
8 5 .9 .8 4 .9 7 1 2 1 .2 3 叶黄 叶黄 叶黄 干枯
10 5
.
3 7
.
5 9
.
0 10
.
4 1 1
.
7 叶黄 叶黄 叶黄 干枯
12 .3 5 .5 1 .5 7 .6 3 叶黄 叶黄 叶黄 叶黄 干枯
14 .3 0 .3 2 叶黄 叶黄 枯死
16 .2 3 .2 8 叶黄 叶黄 枯死
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为浅绿色 ; 在 2 7 0 d 时调查植株大部分已干枯 , 瓶内培
养基已耗尽 , 但仍有少量 cI m 左右长的顶梢为绿色 ,
将其转接后能继续生长 。 p 33 浓度在 14 m g lL 以上处
理中植株生长受到严重抑制 , 比对照组提早枯死 。
23 对试管苗生根情况及移栽存活率的影响
试管苗生根试验结果显示 (见表 3) : 与对照比较 ,
在 P P3 3 3浓度 6 一 or m g几 处理中试管苗生长健壮 , 茎
节缩短 , 叶片浓绿 ; 根量稍减 , 但根系质量改善 , 根
长缩短 , 乳白色 , 有光泽 ; 出瓶苗抗逆性强 , 移栽成
活率明显提高 , 并且移栽后缓苗期短 , 生长旺盛 , 很
快长出新叶。 在 P 33 浓度 12 m目L 以上的处理中 , 随
浓度增高 , 植株生长受严重抑制 , 叶片发黄 , 根量明
显减少 、 增粗和短缩 , 且透亮 、 变脆 , 移栽成活率明
表 3 植物生长调节剂对草石蚕试管苗生根情况及移栽存活率的影响
P P 33 3 浓度
(m glL ) 苗高 ) ( e m )
生根情况 移栽后生长情况
节位数 叶色 根长 (cm ) 根量 成活率 (% ) 苗高 ( c m ) 出新叶对数
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.
2
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9
6 4
5
.
2
4
.
5
绿
绿
绿
浓绿
浓绿
浓绿
浓绿
黄绿
黄绿
根色
淡黄
淡黄
淡黄
乳白
乳白
乳白
亮白
亮白
亮白
+ + + + +
+ + + + +
+ + + + +
+ + + +
+ + + +
+ + + +
+ + +
12
.
1
12
.
3
12
.
6
16
.
8
17
.
3
16
.
6
11
.
7
注 : “ + ” 表示根蚤越加 , “ + + + + + ” 根童在 3 0 一 4 0 条 。
显降低 。
3 结论
在草石蚕继代培养阶段以 M S 为基本培养基 , 添
加 P P3 3 浓度为 8 一 10 m g几能使试管苗明显矮化 , 茎
节粗壮 、 试管苗的保存时期可延长至 4 一 5 个月 ; 但
P P 3 3 3 浓度过高会严重影响植株正常生长 , 出现畸
形 。 在草石蚕试管苗生根培养阶段添加即 3 3 浓度 6 一
10 m g几 , 能促进根系发育 , 明显改善根系质量 , 增强
幼苗抗逆性 , 提高移栽成活率 。 并且缓苗期短 , 生长
旺盛 。 同样 , 在生根阶段添加 P P 3 3 浓度过高也会影
响植株正常生长 , 并且表现根严重缩短增粗 , 变脆 ,
容易折断 , 降低移栽成活率 。