全 文 ：第 28卷 第 8期
2 0 1 0年 8月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 28 No. 8
Aug. 2 0 1 0
中华中医药
1772
学刊
白苏总黄酮的逆流提取工艺研究
侯桂兰, 王春雷
(浙江省肿瘤医院, 浙江 杭州 310022)
摘 要:目的:比较研究白苏中总黄酮的逆流提取工艺及其特点。方法: 采用三级逆流提取工艺和三效逆流
提取技术提取白苏中总黄酮, 并与常规热回流提取工艺进行了比较。结果: 与常规热回流提取工艺相比,三级逆
流提取工艺和三效逆流提取工艺提取率结果相当, 但溶剂用量明显减少,提取时间明显缩短。结论: 逆流提取工
艺相比传统的中药提取工艺有明显的优势, 值得在中药工业生产中推广应用。
关键词:白苏;总黄酮; 逆流提取
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2010) 08 -1772 - 02
The S tudy o f Countercu rrent Extrac tion o f the To ta l F lavono ids F rom Perilla F rutescens
HOU Gui-lan, WANG Chun-le i
( Zhejiang C ancerH osp ita,l H angzhou 310022, Zhejiang, Ch ina)
Abstrac t: Ob jective: To investiga te the process o f counte rcu rrent ex tracting pro ce ss of the tota l flavono ids from Pe ril-
la fru tescens. M ethods: Apply ing the th ree - stage and three - e ffect countercurrent con tinued technique to op tim ize the
ex trac ting pro ce ss o f the tota l flavonoids. And also, the two new processes w ere compared w ith the refluence process.
R esu lt: : Com pa red w ith the refluence pro ce ss, the two coun te rcurrent ex trac ting processes have the advan tages o f highe r
recove ry, le ss so lvent consum ption and shor te r ex trac tion time. C onclusion: The countercu rren t ex traction p rocess has
g reat advantages and is good for Chine sem edicina lm a te rials.
Keyw ords: Pe rilla fru te scens; the to tal flavonoids; the coun te rcurrent continued technique
收稿日期: 2010 - 03 - 15
作者简介:侯桂兰 ( 1971 - ) ,女, 浙江杭州人,主管中药师, 研究方
向:医院中药学。
白苏 P erilla frutescens ( L. ) Brit,t别名荏, 南苏,为唇形
科一年生草本植物, 在我国分布广泛、资源丰富。其主要含
有挥发性成分紫苏醛、紫苏醇、柠檬烯以及紫苏苷、木犀草
素、芹菜苷、芹黄素等多种黄酮类化合物 [1]。据报道, 白苏
具有抗氧化、抗衰老、清除和抑制自由基等作用, 在美白和
护肤方面,几乎可与人工合成抗氧化剂 BHA媲美, 且安全,
无毒副作用 [2 - 3]。但至今白苏尚未被中国药典收载。目前
国内研究主要集中在紫苏上, 对白苏尤其是白苏总黄酮的
研究甚少。
目前黄酮提取的方法主要有水煎法、热回流法、渗漉法
等,但这些提取方法存在着提取率低、提取时间长、溶剂用
量大、后续工段能耗大等缺点。逆流提取是一种基于传统
单罐提取发展起来的新型提取技术。研究表明, 该提取技
术确保了各提取单元的药材与溶剂始终保持较大的有效成
分浓度差,可大大增加提取推动力, 加快提取速率, 提高最
终溶剂有效成分的浓度, 降低后续浓缩能耗。
本研究以白苏总黄酮为考察指标, 采用三级逆流提取
工艺和三效逆流提取技术提取白苏中总黄酮, 并与常规热
回流提取工艺进行比较, 确定白苏总黄酮最佳提取方法。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
WND - 200A型高速中药粉碎机 (上海微型电机厂 ) ,
BS224S精密电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司 ) ,
TU - 1900双光束紫外可见分光光度计 (北京普析通用仪器
有限公司 ),小型动态逆流提取罐由本实验室自行研制。
1. 2 试药
白苏药材于 2008年 10月采自杭州九溪, 经熊耀康教
授鉴定为白苏 P erilla frutescens ( L. ) B ritt的地上部分, 阴
干,粉碎, 备用。芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所
(批号: 100080 -20030),所用试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2. 1 总黄酮的含量测定
2. 1. 1 对照品溶液的制备 精密称取 105e 干燥恒重的
芦丁对照品 16. 50mg, 加 60% 乙醇溶解定容于 50mL容量
瓶,得浓度为 0. 33mg# mL - 1对照品溶液,备用。
2. 1. 2 标准曲线的制作 精密吸取标准品溶液 0. 5、1. 0、
1. 5、2. 0、2. 5、3. 0m L, 分别置 25mL容量瓶中, 加入 5%
N aNO2 1. 0mL, 摇匀, 放置 6m in后加入 10% A l ( NO 3 ) 3
1. 0m L, 摇匀,放置 6m in后加入 4% NaOH 10mL, 再加 60%
乙醇稀释至刻度,混匀, 静置 15m in, 于 510nm 处,以相应试
剂作空白,测定吸光度, 以芦丁浓度为纵坐标,以吸光度值
为横坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程: Y = 2. 778X -
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DOI：10.13193/j.archtcm.2010.08.206.hougl.041
第 28卷 第 8期
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中华中医药
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0. 0775( r = 0. 9991), 结果表明芦丁在 0. 016~ 0. 99m g范
围内呈良好的线性关系。
2. 1. 3 精密度实验 取芦丁对照品溶液 2. 0mL, 置 25mL
容量瓶中,按 / 2. 1. 20项操作, 平行测定 5次, 结果其 RSD
为 0. 14% ,表明精密度良好。
2. 1. 4 重复性实验 取同 1份样品溶液 5份, 分别按上
述实验方法测定,结果 RSD为 0. 90%。
2. 1. 5 稳定性实验 取 1份样品溶液, 按上述实验方法
在显色完全后 0、10、20、30、45、60m in分别测定吸光度, 结
果 RSD为 0. 51%。实验表明: 供试品溶液在 1. 0h内稳定
的。
2. 1. 6 加样回收率实验 取已知总黄酮含量的白苏样品
6份, 分别精密添加已知浓度的芦丁对照品适量。按供试
品溶液制备方法制备, 按 / 2. 1. 20项操作, 测定总黄酮含
量,计算测定回收率, 结果平均回收率为 99. 35% , RSD为
2. 14%。
2. 2 提取工艺研究
2. 2. 1 三级逆流提取工艺 [4] 平行取 3份 50g药材, 分
别置提取罐中, 按图 1流程提取, 每个提取单元加 8倍量
0. 1% ~ 60%乙醇溶液, 60e 提取 1次, 30m in /次。过滤,定
容,取样测定白苏总黄酮的提取得率。
2. 2. 2 三效逆流提取工艺 [ 5] 平行取 5份 30g药
材,分别置提取罐中, 按图 2流程提取, 每个提取单元加 8
倍量 0. 1% ~ 60%乙醇溶液, 60e 提取 1次 , 30m in /次。过
滤,定容, 取样测定白苏总黄酮的提取得率。
2. 2. 3 常规回流提取工艺 按文献 [ 6 ]最佳提取工艺, 取
150 g药材,加 16倍量 0. 1% ~ 60%乙醇溶液, 60e 回流提
取 1次, 4h /次。过滤, 定容,取样测定白苏总黄酮的提取得
率。
3 结果与讨论
3. 1 三级逆流提取过程
如图 1所示,第 1罐的 3次提取为梯度形成阶段, 即提
取 3次, 每次均加入新溶媒, 得 A1、A2、A3,其中 A1储存。然
后开始逆流提取阶段, A2作为第 2罐第 1次提取的溶媒,得
B1,储存; A3作为第 2罐第 2次提取的溶媒,得 B2; B2作为
第 3罐第 1次提取的溶媒, 得 C1,储存;依次循环提取。
3. 2 三效逆流提取过程
如图 2所示。图中 1 ~ 12等数字表示提取顺序步骤,
正方形右侧的 1~ 7等数字表示溶剂编号, P1、P2、P3代表
一个循环中的 3个提取阶段, A、B、C表示 3个提取单元,圆
柱形表示药材,正方形表示溶剂, 而黑点代表有效物质的含
量,本研究中为白苏总黄酮的含量。图 2可以清楚的表示
出药材和提取液中有效成分的变化与转移。
3. 3 不同提取方法的比较
表 1 不同提取方法的比较
提取方法 药材用量
( g)
溶剂用量
( L)
提取时间
( h )
提取得率
( mg# g- 1 )
三级逆流 150 2 2. 5 22. 97
三效逆流 150 1. 2 2. 5 21. 66
常规回流 150 2. 4 4. 0 22. 65
从表 1可知, 三级逆流、三效逆流提取工艺与常规回流
提取工艺相比,总黄酮提取率相当, 溶剂消耗量明显下降,
其中三效逆流溶剂消耗量仅为常规回流提取工艺的 1 /2;
提取时间也大大缩短, 其中三级和三效逆流提取时间仅为
常规回流提取工艺的 5 /8, 生产效率大幅度提高。由此可
见,逆流提取工艺具有效果佳、节省溶剂、节约成本、降低后
续浓缩能耗、缩短提取时间等优点。但考虑生产实际及工
艺操作,三级逆流提取技术操作相对简便, 提取时间少, 电
力能源消耗较少,在中药生产中, 三级逆流提取能更好的提
高生产效率,是十分可取的生产工艺, 值得推广应用。
参考文献
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