全 文 ：— 13 —现代中药研究与实践2015年第29卷第1期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.1
作者简介：蒋定文（1968-），男，副研究员，主要从事辐射防护与天然药物研究。E-mail jiangdingwen@sina.com
* 通讯作者：沈先荣（1965-），男，研究员，博士生导师，主要从事辐射防护与天然药物研究。E-mail xianrong_sh@163.com
白沙枇杷叶、枇杷花三萜酸类和黄酮类含量的比较
蒋定文 1，刘　洁 2, 刘玉明 1，何　颖 1，陈　伟 1，沈先荣 1*
（1. 海军医学研究所，上海 200433 ；2. 中国药科大学生命科学与技术学院，生物技术专业 08 级，江苏
南京，210009）
摘　要：目的　比较白沙枇杷叶、枇杷花主要功效成分熊果酸、齐墩果酸及总黄酮含量。方法　采用
HPLC 法同时测定了枇杷叶和枇杷花中熊果酸和齐墩酸的含量；采用紫外可见分光光度法测定了枇杷叶和
枇杷花总黄酮含量。结果　白沙枇杷叶熊果酸含量为 10.43 mg·g-1，齐墩果酸含量为 2.71 mg·g-1，白沙
枇杷花熊果酸含量 2.87 mg·g-1，齐墩果酸含量为 0.44 mg·g-1，白沙枇杷叶中三萜酸类含量明显高于枇杷花。
白沙枇杷叶的总黄酮含量也高于枇杷花，两者分别为 61.5 mg·g-1 和 38.7 mg·g-1。结论　白沙枇杷叶的三
萜酸类及总黄酮含量高于枇杷花。
关键词：枇杷叶；枇杷花；熊果酸；齐墩果酸；总黄酮
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)01-13-04
doi:10.13728/j.1673-6727.2015.01.005
Comparison of Triterpenic Acids and Flavonoids Contents between the Leaves and the
Flowers of White Flesh Loquat
JIANG Ding-wen1, LIU Jie2, LIU Yu-ming1, HE-Ying1，CHEN-Wei1，SHEN Xian-rong1*
（1. Navel Medical Research Institute PLA, Shanghai, 200433, China; 2. China Pharmaceutical University, Life
Science and Technology Institute, Nanjing 210009, China)
Abstract: Objective To compare the contents of ursolic acid, oleanolic acid and fl avonoids between the
leaves and the flowers of white flesh loquat．Methods The contents of ursolic acid and oleanolic acid were
determined by HPLC, the content of total fl avonoids was analyzed by UV spectrophotometer. Results The contents of
ursolic acid and oleanolic acid in white fl esh loquat leaves were 10.43mg·g-1 and 2.71 mg·g-1, the contents of ursolic
acid and oleanolic acid in white fl esh loquat fl owers were 2.87 mg·g-1 and 0.44 mg·g-1, respectively. The contents
of total fl avonoids in white fl esh loquat leaves and fl owers were 61.5 mg·g-1 and 38.7 mg·g-1. Conclusion The
contents of triterpenic acids and total fl avonoids in white fl esh loquat leaves are higher than that in white fl esh
loquat fl owers.
Key words: white flesh loquat leaves；white flesh loquat flowers；ursolic acid；oleanolic acid； total
fl avonoids
枇杷叶为蔷薇科植物枇杷Eriobotrya japonica
(Thunb．)Lindl．的干燥叶，其味苦、微寒，归肺、胃经，
具有清肺止咳、降逆、止呕功效，用于清肺止咳、气
逆喘急，胃热呕逆，烦热口渴 [1]。枇杷花为植物枇杷
的干燥花蕾及花序。枇杷花味淡性平 , 入肺经，能疏
风止咳 , 通鼻窍，主治感冒咳嗽，鼻流清涕，虚劳久咳 ,
痰中带血 [2]，民间常用于小儿肺热咳嗽，老年人及久
咳不愈患者 [3]。白沙枇杷在我国分布广泛，主要分布
于中南及江苏、陕西、甘肃、安徽、浙江、江西、福建、
台湾、四川、贵州、云南等地。枇杷叶及枇杷花的主
要有效成分是三萜酸类化合物和黄酮类化合物。枇杷
叶和枇杷花的三萜类及黄酮类化合物均具有较好的
抗炎和镇咳作用 [4-8]，一般选择测定三萜类齐墩果酸
或熊果酸和黄酮类化合物的含量，作为枇杷叶的质量
控制指标 [9]。枇杷开花季节为秋冬季，开花时每个花
序有 80 ~ 100 朵，而实际形成产量的果实数不到总
花数的 3 ~ 5%。为了提高枇杷的产量和质量，果农
们都会在一定时期进行疏花，大概每亩枇杷可以疏花
100 kg[10]。 这些疏花一般都直接丢弃地头，或者只作
为民间用药。本文比较了白沙枇杷叶和白沙枇杷花三
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萜酸类化合物和黄酮类化合物含量，评价枇杷花能否
与枇杷叶一样具有开发利用价值，使枇杷花变废为宝 ,
避免浪费资源和污染环境。
1　仪器与试药
1.1　仪器
759 型紫外可见分光光度计：上海奥谱勒仪器有
限公司；SJ3200 超声波清洗机，上海洁净超声波设
备厂； TB-214 型万分之一电子天平，北京赛多利斯
仪器有限公司；R-201 旋转蒸发仪，上海申胜生物技
术有限公司。
1.2　受试物
白沙品种枇杷叶，枇杷花， 2011 年 11 月采自上
海沪香果业合作社青浦区枇杷园，晒干，粉碎，过 4
号筛备用。枇杷品种由上海中医药大学中药学院生药
学教研室赵志礼教授鉴定，鉴定结果为蔷薇科枇杷
Eriobotrya japonica (Thunb．)Lind1 的叶和花。
1.3　试剂
齐 墩 果 酸：纯 度 ≥ 99%（HPLC）， 批 号：
050901，购自上海友思生物技术有限公司。熊果酸：
纯度≥ 98%（HPLC），批号：22810，购自上海晶纯
试剂有限公司。芦丁：含量 92.5%，批号：100080-
200707，购自中国药品生物制品检定所。石油醚（沸
程60～90℃）、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙酸铵、
无水乙醇、甲醇等均为分析纯，购自中国医药（集团）
上海化学试剂公司。
2　方法与结果
2.1　齐墩果酸和熊果酸的含量测定 [11]
2.1.1　色谱条件 色谱柱　　Microsorb-MV 100-5 C18 柱
(250 mm×4.6 mm，5μm) ；流动相为甲醇 -0.2％乙酸
铵溶液 (85 ：l5) ；流速为 1.0 ml·min-1 ；检测波长为
2l0 nm ；柱温 25℃。
2.1.2　对照品溶液的制备　　取齐墩果酸对照品和
熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升
含齐墩果酸0.228 mg和熊果酸0.256 mg的混合溶液，
0.45μm微孔滤膜过滤，即得。
2.1.3 　标准曲线建立　　精密吸取对照品混合溶液
1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml，分别加至 10 ml 容量瓶
中，甲醇定容，摇匀，得不同浓度的对照品混合溶液，
分别取上述稀释及未稀释的对照品按上述色谱条件
测定峰面积，每次半自动进样 20 μl。以对照品的含
量为横坐标，以峰面积 Y为纵坐标，绘制标准曲线。
齐墩果酸的标准曲线方程为：y = 9.814 7x - 12.675，
r = 0.999 1。熊果酸的标准曲线方程为：y = 9.024 1x
- 24.102，r = 0.997 6。见图 1A。
图 1 白沙枇杷叶、枇杷花HPLC色谱图
A-对照品；B-枇杷叶供试品；C-枇杷花供试品；
1-齐墩果酸；2-熊果酸
Fig.1 HPLC chramatogram of leaves and the flowers of white flesh loquat
A-control; B-sample of leaves; C-sample of flowers; 1- oleanolic acid; 2-
ursolic acid
2.1.4　供试品溶液的制备及齐墩果酸和熊果酸含量
测定　　取枇杷叶、枇杷花粉末各 1 g，分别置 l50
ml 锥形瓶中，精密加入甲醇 50 ml，称定重量，超声
提取 30 min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按前述
色谱条件，吸取供试品溶液，半自动进样 20 μl，记
录色谱图。结果，齐墩果酸、熊果酸二者的分离度大
于 1.5，两者分离良好。见图 1B 和图 1C。根据峰面
积从标准曲线方程计算出枇杷叶和枇杷花中齐墩果
酸、熊果酸含量。从表 1可见，枇杷叶、花齐墩果酸
含量分别为 2.71 mg·g-1 和 0.44 mg·g-1，枇杷叶的
齐墩果酸含量是枇杷花的 6.16 倍。枇杷叶、花的熊
果酸含量分别为 10.43 mg·g-1 和 2.87 mg·g-1，枇杷
叶的熊果酸含量也高于枇杷花，是枇杷花的 3.63 倍。
2.1.5　重复性试验　　取枇杷叶、花各 3 份，每份
1.0 g，置于有盖的锥形瓶中，加入 50 ml 甲醇，称
重，分别按前述方法测定，结果见表 1，测定枇杷叶
齐墩果酸、熊果酸的RSD 分别为 2.21% 和 2.2.%，测
定枇杷花齐墩果酸、熊果酸的RSD 分别为 4.77% 和
1.98%，表明本法重复性良好。
表 1 白沙枇杷叶、枇杷花熊果酸和齐墩果酸含量
Tab 1 The contents of ursolic acid and oleanolic acid in leaves and
flowers of white flesh loquat
样品 熊果酸含量（mg·g
-1） 齐墩果酸含量（mg·g-1）
重复 平均 RSD% 重复 平均 RSD%
枇杷叶 10.45 10.43 2.20 2.77
10.67 2.68 2.71 2.21
10.21 2.71
枇杷花 2.85 0.43
2.93 2.87 1.98 0.46 0.44 4.77
2.82 0.42
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2.1.6 　工作曲线考察　　在 210 nm 处，测定标准
系列，齐墩果酸和熊果酸在测试浓度范围 22 ～ 180
mg·L-1 内有良好的线性关系，相关系数分别为
r=0.999 1 和 r = 0.997 6。
2.2 　总黄酮含量测定 [12]
2.2.1　标准曲线的建立　　称取芦丁对照品 5.5 mg，
置 25 ml 量瓶中，加适量 70%乙醇，超声 10 min，全
部溶解后，放至室温，以 70％乙醇定容 ,即得对照品
溶液。精密量取 0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml 对照
品溶液，分别置 20 ml 试管中，加 5％亚硝酸钠溶液
0.3 ml，摇匀，放置 6 min，再加入 10％ 硝酸铝溶液
0.3 ml，摇匀，放置 6 min，再加 4%氢氧化钠溶液 4
ml，用 70％乙醇将反应溶液体积补足到 10 ml，放置
15 min，在 510 nm 波长处测定吸光度，以吸光度为
纵坐标，芦丁含量为横坐标绘制标准曲线：y = 1.251x，
r = 0.999 5。
2.2.2　样品总黄酮含量测定　　取枇杷叶、枇杷花粗
粉各 1.0 g，置 100 ml 量瓶中，加入 20 ml 石油醚，
浸泡 30 min，超声 20 min，滤去液体，残渣挥干至
无石油醚。在残渣中加入 70％ 乙醇 20 ml，浸泡 30
min，超声提取 2 次，每次 20 min，提取液合并，
70％ 乙醇定容至 50 ml，即得总黄酮提取液。吸取样
品总黄酮提取液 0.5 ml，按标准曲线测定的方法，依
次加入各试剂，测定 510 nm 处的吸光值，根据标准
曲线计算样品中的总黄酮含量，结果见表 2，枇杷
叶总黄酮含量为 61.5 mg·g-1，枇杷花总黄酮含量为
38.7 mg·g-1，枇杷叶的总黄酮含量高于枇杷花，是
枇杷花的总黄酮含量的 1.59 倍。
2.2.3　重复性试验　　取枇杷叶、枇杷花粗粉各
5 份，每份 1.0 g，分别按前述方法测定，结果见
表 5，枇杷叶总黄酮含量的平均值为 61.5 mg·g-1，
RSD=2.41%，枇杷花的总黄酮含量为 38.7 mg·g-1，
RSD=4.49%，表明本法重复性良好。
表 2 白沙枇杷叶和枇杷花中总黄酮含量 (mg·g-1)
Tab. 2 The contents of total flavonoids in leaves and flowers of white flesh
loquat(mg·g-1)
样 品 重 复 平 均 RSD%
枇杷叶
63.6
62.1
61.7 61.5 2.41
60.3
59.9
枇杷花
41.4
39.1
38.3 38.7 4.49
38.1
36.7
2.2.4 　精密度试验　　按标准曲线制作方法，精密
量取芦丁对照品溶液 5份，各 0.5 ml，测定吸光度，
RSD=1.74%，说明本法精密度良好。
3　讨论
三萜酸类化合物和黄酮类化合物是枇杷叶、枇杷
花的主要有效成分，人们往往通过检测枇杷叶中三萜
类化合物齐墩果酸、熊果酸及黄酮类化合物的含量作
为枇杷叶的质量控制指标 [8]。本研究采用HPLC 方法
同时测定了 11 月在上海青浦区采摘的白沙枇杷叶和
枇杷花中熊果酸、齐墩果酸含量，同时采用紫外分
光光度法比较分析白沙枇杷叶、枇杷花总黄酮含量。
从实验结果看，两种方法重复性、精密度好，结果
可信。采用 HPLC 测得到 11 月花期白沙枇杷叶的齐
墩果酸和熊果酸的含量分别为 2.71 mg·g-1 和 10.43
mg·g-1，与陈世斌等 [11] 报道的枇杷新鲜叶、落叶齐
墩果酸的含量 2.51 mg·g-1 和 2.92 mg·g-1、熊果酸
的 8.95 mg·g-1 和 10.02 mg·g-1 相近。本研究测得的
白沙枇杷叶总黄酮含量为 61.5 mg·g-1，稍高于吕寒
等 [12] 报道的枇杷成年生长叶总黄酮（53.4 mg·g-1）
含量，远高于其测得的枇杷落叶中总黄酮（4.6 mg·g-
1）含量。
关于枇杷花的三萜酸类化合物和黄酮类化合物
含量测定报道相对较少，胡娟等 [13] 研究枇杷花三萜
化合物提取工艺时，通过优化提取工艺获得的三萜
化合物含量（熊果酸含量平均值×0.7 + 齐墩果酸含
量平均值× 0.3）为 2.51 mg·g-1，稍高于本实验测
定结果按此公式换算出的三萜化合物平均含量 2.14
mg·g-1。枇杷花总黄酮含量较高，但不同产地，品
种和枇杷花采集时间，枇杷花中总黄酮的含量可能
相差很大。据报道，枇杷花总黄酮含量以四川龙泉、
仁寿、攀枝花及福建莆田四地相对较高，四川内江及
遂宁的含量较低 [14]。
从本实验的结果来看，11 月采摘的白沙枇杷叶
的三萜类化合物含量要明显高于枇杷花，其中枇杷叶
齐墩果酸的含量是枇杷花的 6.16 倍，枇杷叶熊果酸
的含量是枇杷花的 3.63 倍。枇杷叶总黄酮含量也比
枇杷花高，但没有三萜类含量差距大，枇杷叶总黄
酮含量是枇杷花的 1.59 倍。因此，如果仅以三萜类
成分和总黄酮成分的含量多少作为药材优劣判断标
准，枇杷叶要优于枇杷花。尽管如此，枇杷花的总黄
酮含量还是较高的，有一定的利用价值，怎样开发利
用枇杷叶和枇杷花资源，变废为宝，值得进一步深入
研究。
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或喷洒 65% 代森锌 500 倍液。白粉病危害新梢和嫩
芽，应加强栽培管理，疏枝改善通风条件，结合冬季
修剪，减少越冬菌源；或用粉锈宁 1 500 倍液进行叶
面喷雾。天牛幼虫蛀入藤心使枝条枯死，应以人工防
治为主。蚜虫使叶片和花蕾卷缩，影响开花，可用
10%吡虫啉 4 000 ～ 6 000 倍液喷雾，但严禁花期施
药，以免农药残留超标。
4　金银花的采收
金银花二白与大白期是最适合采摘的花期 [15]，
采摘时间最好为晴天上午露水干后。一般用通风透气
竹篮或条筐盛放，不用塑料袋，以防花蕾发热发霉褐
变。不同物候期采收的金银花产量和质量存在显著差
异，第一茬花产量最高，其后几茬花产量逐次降低；
第一茬花千蕾重及绿原酸含量最高，第四茬花次之，
第二、三茬花较低。这种差异与不同物候期间花芽分
化历时、花枝的类型、叶面积、叶绿素含量等生物学
因素有关，不同物候期的气温、日照时数、降水量等
气候因子也密切影响药材质量 [16]。
5　小结
金银花是多年生植物，受多种因素影响。应选择
金银花优良种质，结合其生物学特性与栽培技术要
点，综合考虑土壤、气候、生物等生态因子对金银花
生长发育、质量的影响规律，合理控制水肥，对不同
树龄植株分类管理，确保金银花优质高产、药材质量
可控，逐步形成规范化生产。
参考文献
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收稿日期：2014-03-07
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收稿日期：2014-05-02
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（责任编辑　王　宁）