全 文 ：·品种品质·
枇杷花质量标准研究
邓晶晶，王亚云，卢先明
［摘要］目的:制定枇杷花药材的质量标准，为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法:采用薄层色谱法、
HPLC法、水分测定法、灰分测定法及浸出物测定法考察枇杷花药材的质量。结果:枇杷花药材含的熊果酸在薄层色谱中与
对照品同一位置显相同颜色的斑点。HPLC 定量分析中，熊果酸线性范围为 4 μg ～ 16 μg(r = 0. 9999) ，平均回收率为
100. 485%，RSD为 1. 70%(n = 6)。结论:所建立的方法简便、准确、可靠，重现性好，可为控制枇杷花药材的质量提供参考。
［关键词］枇杷花;熊果酸;薄层色谱;高效液相色谱;质量标准
［中图分类号］ R 282. 71 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674 － 926X(2010)03 － 0012 － 03
Study on quality standard of loquat flower /DENG Jing-jing，WANG Ya-yun，LU Xian-ming / /(Pharmacy College，Chengdu
University of Traditional Chinese Medicine，The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine，et
al．，Chengdu 610075，China)
［Abstract］Objective:To provide scientific basis for the utilization and development of loquat flower by establishing its quality
control standard．Method:The bioactive constituents were analyzed by TLC and HPLC． Moisture，ash and the extracts of loquat flower
were all determined． Result:The TLC spots of ursolic acid had the similar color as the control group at the same position． The results
of HPLC quantitative analysis showed that the linear range of ursolic acid was 4μg ～ 16 μg (r = 0. 9999) ，and the average recovery
rate was 100. 485% and RSD was 1. 70%(n = 6)． Conclusion:These methods are convenient，accurate，reliable with good reproduc-
ibility and can be used to enhance the quality standard for the medicinal material．
［Key words］Loquat flower;ursolic acid;TLC;HPLC;quality standard
［基金项目］ 2009 年度四川省第三批应用技术研究与开发项
目———“四川省地方习用中药材质量标准的提高
研究”(2009SZ0227)
［作者单位］成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重
点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共
建国家重点实验室培育基地，四川 成都 610075
［作者简介］邓晶晶(1982-) ，女，硕士学位，助理实验师，从事
中药品种品质及资源研究 Email :dengjingjing-82
@ 126． com
［收稿日期］ 2010-03-17
枇杷花为蔷薇科植物枇杷 Eriobotrya japonica
(Thunb)Lindl．的干燥花蕾及花序，异名土冬花［1］，分
布于我国中南、西南及陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、
江西、福建、台湾等地区。四川省近年枇杷生产发展
较快，全省大多数地方均有大量栽培。在中医药传统
的用法中，枇杷的药用部位多为叶，已收入历版中国
药典。在民间有将枇杷花作药用的情况，其记载始见
于《本草纲目》:“枇杷花主治头风，鼻涕清流”。枇杷
花有效成分为熊果酸(ursolic acid) ，又名乌索酸，具有
很强的抗炎活性和止咳作用。然而，枇杷在生产过程
中，果农需要疏除过多的花以确保其果实的优质。为
充分利用有效的中药资源并控制药材质量，本文通过
实验考察了枇杷花中熊果酸的薄层鉴别、含量测定以
及一些理化指标，为枇杷花药材质量标准的制定提供
科学依据，现报道如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
超声波清洗器(KQ － 50B 型，昆山市超声仪器有
限公司) ;电子恒温水浴锅(DZKW － 4，北京中兴伟业
仪器有限公司) ;ZF － 401 可见紫外检测仪(上海市顾
村电光仪器厂) ;Agilent1100 高效液相色谱仪;Dia-
monsil C18柱(250 mm × 4. 6 mm，5 μm，迪马公司) ;电
子天平(SARTORIUS AG，Sartorius 公司，BP211D) ;电
热鼓风干燥箱(202 － 2 型，上海实验仪器厂有限公
司) ;电子恒温水浴锅(DZKW － 4，北京中兴伟业仪器
有限公司) ;电炉(成都市聚燊电器厂)等。
1． 2 试剂与样品
熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号
110742 － 200516) ;甲醇(色谱纯，Fisher Scientific UK
Limited，批号 030535) ;硅胶 G(中国青岛海洋化工集
团公司，批号 090729) ;水为重蒸水;其余试剂均为分
析纯。枇杷花药材 10 批，经成都中医药大学中药标本
中心卢先明教授鉴定均为蔷薇科枇杷属植物枇杷 Eri-
obotrya japonica (Thunb)Lindl．的干燥花蕾及花序。
·21· 中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2010;1(3)
2 方法与结果
2． 1 薄层色谱鉴别
分别取 10 批枇杷花样品粉末各 0. 5 g，分别加乙
酸乙酯 10 mL，超声处理 15 min，滤过，滤液蒸干，残渣
加甲醇 1 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸
对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 mL含 1 mg的
溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典
2005 年版一部附录Ⅵ B)试验［2］，吸取上述供试品溶
液及对照品溶液各 5 μL，分别点于同一硅胶 G薄层板
上，以甲苯 －乙酸乙酯 －甲酸(20∶ 4∶ 0． 5)溶液为展开
系统，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在
105 ℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视，供试品色
谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红
色斑点(见图 1)。
图 1 枇杷花药材 TLC图谱
2． 2 熊果酸含量测定
2． 2． 1 对照品溶液的制备 取熊果酸对照品适量，
精密称定，加甲醇制成每 1 mL含熊果酸 1 mg的溶液，
溶液以微孔滤膜(0． 45 μm)滤过，即得对照品溶液。
2． 2． 2 供试品溶液的制备 取本品粉末 0. 5 g，加入
适量 95%乙醇，超声提取 40 min，滤过，于水浴上挥
干，残渣用甲醇溶解，转移至 5 mL 容量瓶中，用甲醇
定容，摇匀。用孔径为 0． 45 μm 的微孔滤膜过滤，即
得供试品溶液［3］。
2． 2． 3 色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇 － 水 － 冰醋酸(95 ∶ 5 ∶
0． 1) ;流速:0. 4 mL·min －1;波长:215 nm;进样量:10
μL。熊果酸保留时间为 23. 1 min，理论塔板数以熊果
酸峰计不低于 3000。色谱图见图 2。
图 2 枇杷花药材熊果酸含量测定 HPLC图谱
2． 2． 4 线性关系考察 取熊果酸对照品适量，精密
称定，加甲醇制成每 1 mL含熊果酸 1 mg溶液，分别进
样 4 μL，8 μL，10 μL，12 μL，16 μL，按上述色谱条件
测定峰面积。以熊果酸峰面积(Y)积分值为纵坐标，
熊果酸量(X)为横坐标计算得回归方程:Y =
662. 79X +131. 13，r = 0. 9999，结果表明熊果酸在 4 μg
～ 16 μg范围内线性关系良好。
2． 2． 5 精密度试验 取“2． 2． 1”项下对照品溶液，按
“2． 2． 3”项下色谱条件，连续进样 5 次，每次 10 μL，记
录色谱峰面积，RSD值为 1． 67%，结果表明，该方法精
密度良好。
2． 2． 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，按 0 h，2 h，4
h，8 h，24 h时间间隔分别进样分析，测定色谱峰面积，
RSD为 1． 95%。结果表明，供试品溶液在 24 h内稳定。
2． 2． 7 重现性试验 取同一批样品 6 份，按“2． 2． 2”
项下的方法制备成供试品溶液，按“2． 2． 3”项下的色
谱条件分别进样分析，测定熊果酸色谱峰面积，计算
熊果酸含量，结果 RSD为 0． 854%，表明重现性良好。
2． 2． 8 回收率试验 精密称取枇杷花药材样品 6 份，
精密加熊果酸对照品适量，分别按“2． 2． 2”制备供试
品溶液，并且按“2． 2． 3”色谱条件进行测定，计算加样
平均回收率为 100. 485%，RSD为 1. 70% (n = 6)。结
果见表 1。
·31·中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2010;1(3)
2． 2． 9 样品的测定 取 10 批样品，按“2． 2． 2”项下
的方法制备供试品溶液，按含量测定方法测定枇杷花
中熊果酸的含量，结果见表 2。
表 2 枇杷花样品的熊果酸含量测定结果(n =3)
No． of samples Lot number Average content(%)
1 0901 0. 3872
2 0801 0. 3301
3 0401 0. 3759
4 0501 0. 4442
5 0502 0. 3598
6 0601 0. 2473
7 0503 0. 4232
8 0602 0. 4395
9 0504 0. 4032
10 0603 0. 3025
2． 3 水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的测定
测定方法参照《中华人民共和国药典》2005 年版
(一部)附录Ⅸ H水分测定法(烘干法)、Ⅸ K 灰分测
定法、Ⅹ A 浸出物测定法。结果:水分为 8. 9% ～
13. 0%;总灰分含量在 5. 1% ～ 7. 5%;酸不溶性灰分
含量在 0. 2% ～0. 3%，浸出物为 14. 4% ～ 28. 6%。各
批次间差异不显著，故此测定结果可作为制定枇杷花
药材质量标准的参考依据。
3 讨论
3． 1 薄层色谱结果表明，采用薄层色谱法可以检出
枇杷花药材中的主要成分熊果酸，斑点清晰且方法简
便、快速，故此方法可作为枇杷花药材的定性鉴别依
据。
3． 2 检测波长的确定:根据紫外扫描图和高效液相
色谱的 3D图分析，λmax 为 206 nm，选择 205 nm 、210
nm 和 215 nm 检测波长进行高效图谱对比，结果表明
熊果酸在 215 nm检测波长下，流动相中甲醇的紫外吸
收干扰较小，基线较稳，故选择 215 nm为检测波长。
3． 3 研究首次测定了枇杷花药材中熊果酸的含量，
方法简便、准确、重现性好，可作为枇杷花药材质量控
制的参考方法。
［参考文献］
［1］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草 4［M］．
上海:上海科学技术出版社，1999:145．
［2］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典(2005 年版一部)
［S］．北京:化学工业出版社，2005，附录Ⅵ B．
［3］ 尹小英，欧阳拣．高效液相色谱法测定山茱萸中熊果酸的
含量［J］．江西中医学院学报，2001，13(3) :114．
(责任编辑 李芸霞)
葛洪的实验思想
科学实验的目的之一在于检验理论或假说的正确性，即我们常说的“实践是检验真理的唯一
标准”，而通过动物实验检验丹药的有效性，这一思路萌芽于炼丹术士。《神仙传》记载魏伯阳炼
丹，有云:“此丹今虽成，当先试之。今试贻犬，犬即飞者，可服之，若犬死者，则不可服也。”魏伯阳
的故事固然带有神秘主义色彩，未可尽信。葛洪的有关论述，则的确是科学实验的始作俑者。《抱
朴子内篇》有云:“令甘始以药含生鱼，而煮之于沸脂中，其无药者，熟而可食，其衔药者，游戏终日，
如在水中也。又以药粉桑以饲蚕，蚕乃到十月不老。又以往年药食鸡雏及新生犬子，皆止不复长。
以还白药食白犬，百日毛尽黑。”
以上记载堪注意者有二:(1)“甘始以药含生鱼”云云，专门提到未衔药者熟而可食，这是一种
十分先进的实验设计思路的萌芽。我们知道，比较研究是科学实验必不可少的条件，没有比较，就
难以鉴别，所得结论也就缺乏科学性，故科研实验一般都要设立对照组，其未衔药之鱼，正是对照
组之滥觞。(2)“以药粉桑以饲蚕，蚕乃到十月不老”云云，尤与现代抗衰老药物药理研究方法暗
合。据《中药药理研究方法学》介绍，考察药物的延缓衰老作用，需做动物寿命试验，常用的有果蝇
寿命试验、家蚕生长发育试验、体外细胞传代试验等，其中家蚕试验即将受试药物均匀喷涂到新鲜
桑叶上喂饲蚕虫，观察幼虫期(作蛹以前)时间有无延长，这与葛洪的方法如出一辄。
(曼石)
·41· 中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2010;1(3)