全 文 ：云南大学学报 (自然科学版) 1998 , 20 (3):159 ～ 161 CN 53-1045/N　ISSN 0258-7971
Journal of Yunnan University
扶桑花石油醚提取物 HR-1对体外培养的人
早期胎盘绒毛组织分泌功能的影响(1)①
赵翠兰　　江　燕　　李开源　　崔悦礼　　周铭东　　马　岚　　吕　琦
(云南大学生物系 ,昆明 , 650091;第一作者 58 岁 , 女 ,教授)
摘要　扶桑(Hibiscus rosa-sinensis L.)花石油醚提取物 HR-1 对体外培养的人早期胎盘绒毛组织分泌功
能的影响.实验结果表明:HR-1 对人早期胎盘绒毛组织 HCG 和孕酮的分泌 、对绒毛滋养层细胞的生长均有
较强的抑制作用.
关键词　扶桑花 , 石油醚提取物 ,HCG ,孕酮 , 人体滋养层细胞
分类号　Q492.5
　　扶桑花具有抗生育作用 ,这在国内外早有报
道[ 1.2] .近年来我们也对扶桑花的乙醇粗提物进行
了多方面的生物学研究.结果表明:此粗提物有抑
制人体滋养层细胞分泌 HCG 和孕酮的作用[ 3] ;可
使小白鼠的怀胎率下降;还能促进小白鼠离体子宫
平滑肌的收缩[ 4] .初步证明扶桑花具有抗早孕作
用.为了进一步探讨扶桑花抗早孕的有效成分 ,我
们在原工作的基础上将扶桑花经乙醇浸泡回流 ,再
用石油醚提取 ,得到扶桑花石油醚提取物 HR-1.
经紫外光谱分析 、薄层层析检验证明 ,HR-1是一
种 β-谷甾醇的类似物[ 5] .实验中我们进一步研究
了HR-1对体外培养的人早期胎盘绒毛组织分泌
功能的影响.为筛选扶桑花抗早孕的有效成分 ,为
开发利用我省丰富的扶桑花资源提供一定的实验
依据.
1　材料和方法
1.1　材料　健康育龄妇女妊娠 6 ～ 8周人流胎囊
(昆医附二院提供).1640 培养基(德国 Serve).孕
酮放免药盒(上海内分泌所).HCG 放免药盒(上海
生物制品所).BSA(上海生化所).扶桑花石油醚
提取物HR-1(本课题组).
1.2　方法　按照动物组织培养方法 ,将胎囊上剪
碎的绒毛涂于培养瓶壁上 ,置入 37 ℃C02培养箱
中烘 20min ,使绒毛牢固地贴附于瓶壁上.每瓶加
入 2 ml培养液 ,将 pH 值调至 7.2 ～ 7.4左右 ,再放
入C02培养箱内培养24 h.取出培养瓶并随机分为
对照组及实验组.对照组(Ⅰ)不加药 ,实验组则需
加药.实验组设五个组(Ⅱ , Ⅲ , Ⅳ , Ⅴ , Ⅵ),其药量
分别为每毫升培养液 25μg , 50μg , 100μg , 200μg ,
300μg.按照上述分组更换培养液后 ,再置于 C02
培养箱内培养 72 h ,即终止实验.用放免测定法分
别测定每瓶培养液中 HCG 和孕酮的含量 ,并用
Low ery 氏改良法测定每瓶培养液中绒毛组织的蛋
白含量 ,然后求出每毫克蛋白分泌 HCG 和孕酮的
量.
2　实验结果
2.1　HR-1对体外培养的人早期胎盘绒毛组织
分泌 HCG的影响 　结果如表 1 所示:加药各组
HCG的分泌量均小于对照组.除 25μg/ml组与对
照组相比 , HCG 的分泌量为显著差异(P <0.05)
外 ,其余各组 HCG 的分泌量与对照组相比 , 均呈
极显著差异(P <0.01).其中 50μg/ml至 300μg/
ml组所呈现的抑制作用与药物剂量有一定的依存
关系 ,且随剂量的增加与对照组相比抑制作用越明
显.
2.2　HR-1对体外培养的人早期胎盘绒毛组织
① 云南省应用基础研究基金资助项目.1998-03-02收稿
分泌孕酮的影响　结果如表 1所示:加药各组孕酮
的分泌量均小于对照组 ,与对照组相比 ,均呈极显
著差异(P <0.01).表明各加药组对孕酮的分泌
有较强的抑制作用.该作用与药物剂量有明显依存
关系.剂量越高 ,抑制作用越强.
2.3　HR-1对体外培养的人早期胎盘绒毛滋养
层细胞生长的影响　组织学观察表明:对照组滋养
层细胞沿组织块边缘呈辐射状散开 ,细胞密度大 ,
呈上皮样生长 ,胞体大 ,胞质透明 、均匀 ,胞核呈圆
形或卵圆形 ,胞间出现生长晕(图 1);加药各组细
胞的生长与药物剂量有明显依存关系:25 、50μg/
ml两剂量使细胞挛缩呈球形 ,胞质内有黑色颗粒
沉着 ,胞质透明度分别表现为减弱或混浊状 ,生长
晕消失(图 2);高剂量组 100μg/ml至 300μg/ml
出现细胞界限不清 ,细胞破损甚至解体 ,组织块部
分脱落(图 3).上述实验结果表明:HR-1对滋养
层细胞的生长有较强的抑制作用.
表 1　扶桑花石油醚提取物 HR-1 对体外培养的人早期胎盘绒毛组织分泌 HCG和孕酮的影响
Tab 1.The effect of ex tracts HR-1 of Hibiscus rosa-sinensis L.on secretion o f HCG and progesterone of First trimester hu-
man trophoblast tissue in vitro
组别 数量 给药量(μg/ml) 蛋白中 HCG/10
-6 数量 蛋白中孕酮含量/10-6
1 8 0 292.88±62.95 8 7.3±1.28
2 7 25 137.88±15.2＊ 14 3.7±0.59＊＊
3 14 50 135.21±21.68＊＊ 15 2.2±0.50＊＊
4 13 100 115.83±16.4＊＊ 15 0.79±0.34＊＊
5 13 200 103.76±18.32＊＊ 15 0.27±0.16＊＊
6 12 300 91.28±17.02＊＊ 15 0.02±0.02＊＊
　＊:与对照组相比 P<0.05;　　＊＊:与对照组相比 P<0.01
图 1　对照组:人体滋养层细胞
F ig 1.control:trophoblast cells
图 2　50μg/ml HR-1:人体滋养层细胞的形态
Fig 2.50μg/ ml HR-1:trophoblast cells
3　讨论
扶桑花石油醚提取物 HR-1 具有抗早孕作
用 ,这与扶桑花乙醇粗提物是类似的 。它们皆通过
抑制 HCG 和孕酮的分泌来实现 。所不同的是 HR
-1具有更强的活性 ,其加药组浓度只需达到 25
μg/ml时 ,HCG的分泌量与对照组相比就具有显著
差异(P <0.05),孕酮的分泌与对照组相比则具有
极显著差异(P<0.01),说明 HR-1 对 HCG 和孕
酮的分泌具有较强的抑制作用;而扶桑花乙醇粗提
物要出现上述作用 ,加药组浓度则需达到 25 mg/
ml以上 。这就提示我们 ,HR-1这种 β-谷甾醇类
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似物很可能是扶桑花中抗早孕的主要成分。另外 ,
从人体滋养层细胞的生长状况看 ,加药组对滋养层
细胞有不同程度地损伤 ,其损伤程度与药物剂量有
明显依存关系 ,剂量越高损伤程度越大 ,最严重时
可导至细胞破损甚至解体。从上述实验结果我们
推断:可能是由于 HR-1对滋养层细胞的生长有
阻碍作用 ,引起细胞受损 ,至使细胞内酶的合成减
少 ,活性降低 ,药物剂量越高 ,两种激素的分泌量下
图 3　200μg/ml HR-1:人体滋养层细胞的形态
Fig 3.200μ/ ml HR-1:trophoblast cells
降越大 ,因而在一定程度上起到了抗早孕的效果。
上述只是在本实验条件下得出的初步看法。近来
本课题组通过对大白鼠活体实验及小白鼠离体子
宫平滑肌活动力的观察发现:HR-1能抑制大白
鼠垂体分泌 LH 和 FsH ,进而抑制卵巢分泌雌激素
和孕酮[ 6] ;HR-1还能直接作用于动情初期小白
鼠离体子宫平滑肌 ,使其产生兴奋作用.这些都是
造成子宫不安静 ,导致流产的诸多因素 ,同时也说
明 HR-1的抗早孕作用可能是通过多环节 、多途
径来实现的.
参　考　文　献
1　Kholkute S D , Mudgal V , Udupa K N.Effect of Hibiscus
rosa-sinensis on spermatogensis and accessory reproductiue
organs on rats.Plant Medica , 1977 , 31(4):127
2　于东防 ,胡邦豪 , 沙　怀 , 等.扶桑花中扶桑甾醇的分离
和结构测定.中草药 , 1991 , 22(1):3
3　赵翠兰 ,李开源 ,江　燕.朱槿花乙醇粗提物对体外培养
的人早期胎盘绒毛组织分泌功能的影响.云南中医杂
志 , 1994 , 15(1):50～ 51
4　赵翠兰 ,江　燕 ,李开源.朱槿花乙醇粗提物对小白鼠的
抗生育作用.云南中医中药杂志 , 1995 , 16(6):57～ 58
5　周铭东 、江燕 、赵翠兰 , 等.扶桑花中石油醚溶物的组分
研究及抗生育初探.云南中医中药杂志 , 1997 , 18(2):33
～ 34
6 　 Jiang Yan , Zhao Cuilan , Li Kaiyuan , et al.Effect of
Petroleum Ex tract of Hibiscus rosa-sinensis Flow ers on
Early Pregnancy and Some Reproductive Ho rmones in
Rats.云南大学学报(自然科学版)1998 , 20(3):162 ～
165
The Effect of Ex tracts HR-1 of Hibiscus rosa-sinensis L .on Secretive
Function of First Trimester Human Trophoblast Tissue in Vitro
Zhao Cuilan　Jiang Yan　Li Kaiyuan　Cui yueli　Zhou Mingdong　Ma Lan　Lǜ Qi
(Department of Biology Yunnan University , 650091 , Kunming , PRC)
Abstract　Paper w e studied the action of ext racts HR-1 of petroleum ether of Hibiscus rosa sinensis L.
on secret ive function of fi rst t rimester human trophoblast t issue in vi tro.The result show s clearly that HR-1
reduce the secret ion of human chorionic ganodot ropine and progesterone and inhibition the g row th of t ro-
phoblast cells.
Key wards　Hibiscus rosa-sinensis ,HCG , progesterone , trophoblast cells
161第 3 期　　　　赵翠兰等:扶桑花石油醚提取物 HR-1对体外培养的人早期胎盘绒毛组织分泌功能的影响