全 文 ：野生杏仁是一种传统的中药， 在我国使用已有
上千年的历史。《本草纲目》记载，杏仁有“润肺脾、消
食积、散滞气”三大好处，其本身含有丰富的蛋白质，
既是高级营养品，又可供药用。作为承德特产之一的
苦杏仁，从现有文献看，苦杏仁蛋白的加工研究集中
在杏仁粉、杏仁露等相对较少的品种；杏叶的开发近
乎为零，没有引起人们的重视。蛋白质是构成人体的
物质基础。 人体缺乏蛋白质，不但抵抗力减弱，严重
时往往出现四肢水肿、贫血、肝肾损坏及消化道溃疡
症状。 本文运用凯氏定氮法对承德地区的苦杏仁和
杏叶蛋白质含量进行测定， 为进一步开发杏仁和杏
叶提供基础数据，从而促进地方经济的发展。
氮在蛋白质中的含量比较接近， 平均为 16%，
即每克氮相当于 6.25 克蛋白质。 因此，可以通过凯
氏定氮的方法计算氮的含量， 进而计算出蛋白质的
含量。
1 实验部分
1.1 实验原理
凯氏定氮法原理：进行消化时，含氮有机物与浓
硫酸在消煮炉内共热，其中的 C 和 H 被氧化成二氧
化氮和水，而 N 则被转化成氨，并进一步与浓硫酸
作用生成硫酸铵（甘氨酸的消化过程可表示如下：
CH2NH2COOH+3H2SO4=2CO2+3SO2+4H2O+NH3
2NH3+H2SO4=(NH4)2SO4）。
蒸馏时，浓碱使消化液中的硫酸铵分解，游离出
氨。 反应中释放的氨与水蒸气经冷凝管进入接收瓶
的硼酸溶液中。硼酸溶液吸收氨后，溶液中的氢离子
浓度减低，然后再用标准无机酸滴定，直至恢复溶液
中原有的氢离子浓度为止， 最后根据所用标准酸的
摩尔数计算出待测物中的含氮量。
公式如下：
总氮量
= c(V1-V2)×0.014×100W ×
消化液总量（ml）
测定时消化液用量（ml） ×%
c 为标准盐酸溶液摩尔浓度；V1为滴定样品用去的
盐酸溶液平均 ml 数；V2 为滴定空白消化液用去的
盐酸溶液平均 ml数；W为样品质量（g）；样品中蛋白
质含量（%）=总氮量×6.25。
1.2 器材与试剂
1.2.1 主要仪器
DGG-9070B 恒温电热鼓风干燥箱、 消化管、
KXY-1010 控温消煮炉、DDY-2A 凯氏定氮仪、微量
滴定管。
1.2.2 试剂
消化液（H2O2：浓硫酸：水=3:2:1)
粉末硫酸钾-硫酸铜混合物（催化剂）硫酸钾与
无水硫酸铜以 3:1配比研磨混合
30%NaOH溶液
2%硼酸溶液
标准盐酸溶液（约 0.01mol/L）
混合指示剂（田氏指示剂）
由 50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与 200ml0.1%甲
基红乙醇溶液混合，存于棕色瓶中备用。此指示剂酸
性时为紫红色， 碱性时为绿色。 变色范围很窄、灵
敏。
1.2.3 样品
野生杏仁、常绿杏叶、常绿发酵杏叶、落叶。
1.3 样品采集与制备
承德野生杏仁和杏叶蛋白质含量的测定
第 31卷第 2期
2011年 5月
承德民族师专学报
Journal of Chengde Teachers’College for Nationalities
Vol.31 No.2
May 2011
于文清， 刘晓辉
（河北民族师范学院 生物系，河北 承德 06700）
摘要：承德特产之一的苦杏仁，从现有文献看，野生杏仁蛋白的加工研究集中在杏仁粉、杏仁露等相对较少的品
种；杏叶的开发近乎为零。蛋白质在人体和动物中担负着各种重要而特殊的功能。作者运用凯氏定氮法对承德本地
区的野生杏仁和杏叶蛋白质含量进行测定，为进一步开发杏仁和杏叶提供基础数据，从而促进地方经济的发展。
关键词：杏仁；杏叶；蛋白质；凯氏定氮；消化；蒸馏；滴定
中图分类号:O653 文献标识码:A 文章编号:1005- 1554（2011）02- 0054- 02
收稿日期:2010- 12- 08
作者简介：于文清（1971-），女，河北丰宁人，河北民族师
范学院生物系副教授，理学硕士。
54- -
DOI:10.16729/j.cnki.jhnun.2011.02.007
取野生杏仁、常绿杏叶、常绿发酵杏叶、落叶若
干， 分别晒干后用粉碎机粉碎， 然后研磨成精细粉
末，将其分别置于称量瓶中，放在 DGG-9070B 型电
热恒温鼓风干燥箱中，在 60℃下干燥约 20 小时，达
恒重即可。
1.4 实验方法
凯氏定氮法。
1.5 实验操作
1.5.1 取样
（1）取 4个消化管并标号，各加 1颗玻璃珠。
（2）在 1~3 号管中各加样品 0.2g，催化剂 0.4g，
消化液 10ml（直接将样品送入瓶底，不要沾在瓶口
和瓶颈上，以免影响实验结果），为实验组。
（3）在 4 号管中加 0.2ml 蒸馏水，0.4g 催化剂和
10ml浓硫酸为对照组。
1.5.2 消化
（1）将 4个已取样的消化管置于通风橱内，放在
消煮炉上消化，先在 100℃预热半小时（不要使液体
冲到瓶颈）。
（2）预热后，加大火力，迅速升温至 360℃继续
消化，直至消化液成淡绿色为止（约两个半小时）。
（3）消化完毕，待管中溶物冷却后，加 10ml 蒸馏
水（慢加，随加随摇）。
（4）冷却后，将溶物倒入 100ml 容量瓶中，定容
备用。
1.5.3 蒸馏
（1）从冷水通水口通入冷水进行水封，打开开
关，预热凯氏定氮仪。
（2）从容量瓶中量取 60ml 回收液倒入消化管，
并将消化管固定到蒸馏头下的橡胶塞上。
（3）量取 30ml 硼酸溶液置于锥形瓶中，滴入 3~
4滴指示剂，溶液呈紫红色，固定在托盘上。
（4）按下加碱开关，加碱后按下蒸馏开关，开始
蒸馏。 当锥形瓶中加有指示剂的硼酸溶液由紫红色
变为浅绿色，且不再有气体产生时停止蒸馏。
（5）更换装有蒸馏水的消化管和锥形瓶，对仪器
进行清洗。
（6）更换装有新样品的消化管，并换上新的装有
硼酸与指示剂的锥形瓶进行下一次蒸馏，直至完成。
1.5.4 滴定
全部蒸馏完毕后， 用标准盐酸溶液滴定各锥形
瓶中收集的氨量， 直至硼酸指示剂溶液由淡绿色变
为紫红色即为滴定终点。
记录滴定时所耗标准盐酸的量。
2 结果与讨论
2.1结果
公式如下：
总氮量
= c(V1-V2)×0.014×100W ×
消化液总量（ml）
测定时消化液用量（ml） ×%
样品中蛋白质含量（%）=总氮量×6.25
将数据代入公式得：
表 1 各种样品蛋白质含量的比较
2.1 结果
从表 1 可以看出蛋白质含量最高的是野生杏
仁，19.29%； 从杏叶类型看常绿发酵杏叶蛋白质含
量最高，7.15%，落叶的含量最低 1.00%；由此可以得
出，苦杏仁含量高于杏叶含量，而发酵常绿杏叶高于
普通落叶，说明发酵后杏叶可以充分利用，进行深加
工，如作为青饲料利用，前景非常乐观。
3 前景展望
承德是一个盛产野生杏仁的地方， 有着丰富的
杏仁和杏叶资源， 合理的开发进行深加工有着广阔
的前景，充分发挥野生杏仁的优势，在原来生产杏仁
露、杏仁粉的基础上，进一步开发，可以开发美容杏
仁蛋白面膜、杏仁膏；营养保健的蛋白质粉。 杏叶有
着丰富的资源，都大量浪费在深山里，采摘后可以通
过发酵后深加工作为青饲料，形成新的产业，为地方
经济服务。
参考文献：
［1］北京大学生物系生物化学教研室.生物化学实验指导[M].
北京:人民教育出版社，1979.
［2］王秀奇,秦淑媛等.基础化学实验（第2版）[M].北京:高等
教育出版社，1996.
［3］李建武.生物化学实验原理和方法[M].北京:北京大学出版
社，1999.
[4]聂剑初，吴国利等合编.生物化学基础教程（第3版）[M].北
京:高等教育出版社，1999.06
样 品
（g）
消耗盐酸量
（mL）
含氮量
（%）
蛋白质含量
(/100g)
苦杏仁
常绿杏叶
29.3
5.93
3.086
0.46
19.29
2.875
常绿发酵杏叶
落叶
11.72
3.38
1.144
0.16
7.15
1.00
于文清，刘晓辉/著 承德野生杏仁和杏叶蛋白质含量的测定
55- -