全 文 ：C hi n e e s Ju o r n al o fI nf o r a mt io fl o nT C M D
c e
.
20 09 Vo l
.
1 6 N o
.
1 2
高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁营的含量
钱 平 ’ , 贾 云 2 , 刘志辉 :3 , 钱 芳
(1
. 南京中医药大学 , 江苏 南京 2 10 02 9 : 2 . 扬子江药业集团药物研究院 , 江苏 泰州 225 32 1 ;
3
. 江苏省中医院 , 江苏 南京 2 1 0 029)
摘要 : 目的 建立高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁普含量的方法 。 方法 色谱柱 : s u p e l c o o sD C l: (4 . 6 mln 、
2 50 m
,
5 林m ) : 流动相 : 甲醇一水 (2 0 : 80 ) : 柱温 : 2 5 ℃ : 流速 : 1 . 0 m L / m i n : 检测波长 : 2 10 n m 。 结果 苦杏仁
普峰分 离良好 , 苦杏仁普浓度在 0 . 0“ 13 一 4 . 2 32 哪 间线性关系良好 , 厂 一 1 . 。的 o , 平均回收率为 95 . 9%1 (RSD =
2
.
2%9 )
。 结论 本方法准确 、 可靠, 可用于郁李仁中苦杏仁普的含量测定 。
关键词 : 郁李仁 ; 苦杏仁普 ; 高效液相色谱法 ; 含量测定
中图分类号 : R 2 84 . l 文献标识码 : A 文章编号 : 10 0 5 一5 304 (2 00 9 ) 1 2一 00 50 一 02
D e t e r m i n
a t i o n o f A m y g d a 一i n i n S em e n p r u n i b y H p L C Q I A N P i n g , , J IA 孔 n Z , L l u z h i一h u i 3 , e t a l (2 .而nj i n g
nU i
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rs i妙 of T C’M , Na nj in g 2 10 02只 C h in a , Zln s ri r u t e of M e et ir a M e id e a , aY n g tz e R iv e r p h a rm a即 G ro 即 oC . , aT iz h o u
2 2 5了2 1 , hC i n a , 了J ia n g s u P or v i n e i a l OH sP i at l of 了℃M
,
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A b s t r a e t
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,
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.
R e s u lst T h e ln
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er e o v e yr aw
s 9 5
.
9 1% (R S D = 2
.
2 9 % )
.
C o n c l u s io n T h e m e ht o d 15 ac e u r a t e an d er il ab l
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o n o f a m y g d al in i n S e m e n P r Ll i
.
K e y w o dr s
: S e m e ir PI 双 n i ; 日m y gd al i n ; H P L C ;
郁李仁为蔷薇科植物欧李 rP un us 力二 j了j s Bge . 、 郁李
e o n t e n t d e et r l l l in a it o n
rP un
u s 少a 刀 o n j c a T h u n b
. 或 长柄扁桃 rP un us p 口匕为了刀 cu 了a at
瓶 x i m . 的干燥成熟种子 , 前三者习称 “ 小李仁 ” , 后者习称 “ 大
李仁 ” , 具有润燥滑肠 、 下气 、 利水的功效川 。 苦杏仁着为郁
李仁的主要成分之一 , 200 5 年版 《中华人民共和国药典》 在该
药材含量测定项下采用银量法测定 , 但银量法属于间接测定方
法 , 影响因素多 , 而 目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定
的报道较少 。 笔者采用高效液相色潜 (HPL )C 法直接测定郁李仁
中苦杏仁营的含量 , 方法准确 、 可靠 , 为郁李仁中苦杏仁昔的含
量测定提供了依据和参考 。
1 仪器与试药
1
.
1 仪器
W
a t e r s 5 1 5 泵高效液相色谱仪 , Wa t e r S 2 48 7 紫外检测
器 , wZ 色谱柱 , 恒温箱 (中国科学院大连化物所 ) , EmP ow er 色谱
工作站 , Aig l en t 手动进样器 (20 睡 ) ; 十万分之一电子分析天
平 (即一 Z l l D 型 , 德国 S a r t o r i u s ) : C a r y 5 O紫外分光光度计 (美
国瓦里安 ) 。
1
.
2 试药
苦杏仁营对照品 (中国药品生物制品检定所 , 批号 11082 0 -
20 04 03 )
: 郁李仁药材购 自安徽毫州药材市场 , 经鉴定分别为蔷
薇科植物郁李和长柄扁桃的干燥成熟种子 。 乙睛为色谱纯 , 水
为超纯水 , 其余试剂均为分析纯 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件
色谱柱 : s u p e l e o OD s e l, (4 . 6 un X 2 50 un , 5 四) ; 流动
相 : 甲醇一水 (20 : 80) ; 柱温 : 25 ℃ ; 流速 : 1 . o mL / im n ; 检
测波长 : 2 10 n m , 进样量 : 20 林L 。 色谱图见图 1 。
通讯作者 : 刘志辉 , T e l : ( 0 2 5 ) 86 52 92 9 1
注 : A . 供试品 : B . 对照品
图 1 郁李仁及苦杏仁昔对照品 Hp比 图谱
2
.
2 对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥 12 h 的苦杏仁普对照品
42
.
32 gm
, 置 10 m L 量瓶中 , 用 7%0 甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇
匀 , 即得苦杏仁昔 4 . 232 m g / mL 的对照品溶液 。
2
.
3 供试品溶液的制备
取郁李仁粗粉 0 . 3 9 , 精密称定 , 置具塞三角烧瓶中 , 加石
油醚 (60 一 90 ℃ ) 50 m L , 回流提取 l h , 过滤 , 以石油醚分 3 次
洗涤滤渣及容器 , 每次 10 mL , 弃去石油醚液 , 滤纸及滤渣挥干
溶剂 , 置原容器中 , 精密加入 7%0 甲醇溶液 50 mL , 精密称定 , 回
流提取 l h , 放冷至室温 , 再称重 , 用 7%0 甲醇补足失重 , 抽滤 ,
精密量取续滤液 s mL 置 10 mL 量瓶中 , 以 7%0 甲醇稀释至刻度 ,
以 0 . 4 5 卿 滤膜滤过 , 取续滤液即得 。
9 2 0 0年 1 2月第 1 6卷第 1 2期 中国中医药信息杂志
2
.
4线性关系考察
精密量取苦杏仁营对照品溶液 1m L置 1 0m L量瓶中 , 用
70 %甲醇稀释至刻度 , 再依次稀释 , 制得含苦杏仁昔 2 1 . 6 、
1 05
.
5
、
52
.
9
、
26
.
45
、
x 3
.
22 5
、
6
.
6 12 5
、
3
.
30 6 25 协g / mL 的
对照品溶液 。 分别精密吸取各 20 匹 进样测定 , 以峰面积积分
值对浓度进行回归分析 , 得苦杏仁昔回归方程为 : 件 2 645 盛斗
1 0 8 60
, r = 1
.
000 0
; 苦杏仁昔线性范围为 0 . 0 66 13一 4 . 2 32 卜g 。
2
.
5 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液重复进样 6 次 ,测得苦杏仁昔峰
面积积分值的 RDS = 0 . 8%6 。
2
.
6 重复性试验
取同一批次样品 6 份 , 按“ 2 . 3 ”项下方法制备供试品溶液 ,
按照 “ 2 . 1 ” 项下色谱条件测定 , 结果苦杏仁普的平均含量为
3
.
16%
,
RSD= 1
.
35%
。
2
.
7 稳定性试验
取同一供试品溶液于配制后 0 、 2 、 4 、 6 、 8 、 一0 、 24 h 测
定 , 计算峰面积 RSD 二 1 . 1%1 , 表明供试品溶液在 24 h 内稳定 。
2
.
8 加样回收率试验
精密称取已知含量的同一批次 (批号 080 1 2 1) 郁李仁粉末 6
份 , 每份约 0 . 巧 g , 脱脂后分别精密加入 4 . 232 mg /mL 的苦杏仁
普对照品溶液 l mL , 依法制备供试品溶液并测定 。 结果见表 l 。
表 1 加样回收率试验结果
取样量 样品含量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 Rs D
( g ) (m g ) (m g ) ( mg ) (% ) (%) (% )
0
.
1 54 9 4
.
89 4 8 4
.
2 3 2 0 9
.
0 78 5 98
.
8 6
142 4 4
.
49 9 8 4
.
23 2 0 8
.
6 0 5 8
0
.
144 6 4
.
56 9 4 4
.
23 2 0 8
.
6 0 7 0
9 7
.
0 2
9 5
.
4 1
9 7
.
4 1
9 2
.
0 0
9 4
.
7 9
9 5
.
9 1
0
.
146 2 4
.
6 19 9 4
.
23 2 0 8
.
7 4 2 1
0
.
140 4 4
.
4 36 6 4
,
2 3 2 0 8
.
3 30 0
0
.
14 1 0 4
.
45 5 6 4
.
2 3 2 0 8
.
4 6 7 0
2
.
9 样品含量测定
表 2 样品中苦杏仁昔含量测定结果物 一 3)
样品批号
ǎbs门了OJ1ēb八jC
0 7 10 12 (小李仁)
0 8 02 15 (小李仁)
0 80 8 15 (小李仁 )
0 7 0 1 16 (大李仁 )
0 8 02 0 6 (大李仁)
0 9 0 10 6 (大李仁 )
产地
内蒙
内蒙
内蒙
甘肃
甘肃
甘肃
苦杏仁普含量 (%) Rs D %( )
3
.
3
.
3
.
2 4
I 7
1
.
13
1
.
3 0
2
.
2
.
2
.
1
.
3 5
1
.
6 3
1
.
8 0
1
.
19
分别测定了小李仁 、 大李仁药材各 3 批 , 采用外标法计算
苦杏仁昔的含量 , 结果符合要求 。
3 讨论
本研究试验 了多种流动相比例和流速 〔2s] , 采用甲醇一水
(2 0 : 8 0) 作为流动相 , 苦杏仁昔峰能较好分离 , 且出峰时间适
当 ; 水相中加入缓冲盐或酸对测定结果无明显影响 , 故水相选
择纯水 ; 色谱柱柱温设定 25 、 35 、 40 ℃对分析结果无明显影
响 , 故柱温设为 25 ℃ 。
由于郁李仁中含有大量的油脂 , 如不除去测定时易引起干
扰 , 且连续测定含油脂样品还可能引起色谱柱柱效降低 , 故提
取前应先脱脂 ; 文献报道口 〕和本次试验结果均表明石油醚脱脂
效果优于 乙醚 , 故选择石油醚作为脱脂溶剂 。 苦杏仁营易被苦
杏仁普酶水解 , 故一般测定时采用甲醇为提取溶剂 , 但 甲醇提
取液直接进行测定时 , 苦杏仁普峰前拖尾现象严重 , 改用 7%0
甲醇为提取溶剂时 , 峰形有很大改善 , 理论塔板数增加近 1 倍 。
比较了不同时间回流和超声提取效果 , 结果回流 l h 可将苦杏
仁昔提取完全 , 效果优于超声提取 。
20 05 年版 《中华人民共和国药典》 在郁李仁含量测定项
下采用的是银量法 , 其原理是用硝酸银滴定苦杏仁昔水解产生
的氢氰酸来计算含量 , 苦杏仁昔的水解程度对结果影响较大 ,
且在判断滴定终点时不同操作人员之间存在较大误差 ; 采用
HP LC 法可直接测定药材中苦杏仁普含量 , 结果客观准确 , 方法
可靠 。
参考文献 :
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2 0 0 6
,
3 7 ( 3)
: 16 5一 16 7 .
(收稿 日期 : 2 00 9一 02一 2 3 , 编辑 : 陈静 )
我国建成 2 0 个国家中药科技产业基地
为加快中医药的现代化 、 国际化进程 , 科技部在 1998 年正式
立项实施 “ 中药现代化产业行动计划 ” 。 自 19 9 年科技部批准四
)11建设首个国家中药科技产业基地以来 , 已建立 20 个中药科技产
业基地 , 其中四川 、 广东等 1 个基地通过了一期建设规划验收 。
通过中药科技产业基地建设 , 10 年来培育了一大批重点中药企业 ,
中药工业迅速发展 , 总产值由 19 99 年的 68 7 . 8 0 亿元增加到 2 0 8
年的 2 174 . 89 亿元 , 增长率高出医药工业 332 个百分点 ; 中药农
业经济稳步增长 , 中药材总产值由 19 9 年的 171 . 98 亿元增加到
20 08 年的 575 . 18 亿元 , 规范化种植成效显著 ; 中药制药装备创新
能力增强 , 自主研发产品逐渐替代进 口 ; 建设了一批共性技术平
台、 中药研究平台, 中药创新体系日趋完善 , 创新能力不断提高 ;
中药国家标准不断完善 , 产品质量明显提高 。 (本刊通讯员 )