全 文 ：HPLC法测定枇杷花中熊果酸的含量
郑俊平(莆田学院附属医院药剂科 莆田 351100)
摘要:目的 采用 HPLC法测枇杷花中熊果酸的含量。方法 采用 Hypersil GOLD C18 ( 200 × 4. 6mm，5μm) ;检测波长: 210nm;流动相:乙腈-甲
醇-0. 5%醋酸铵溶液( 52∶18∶ 30 ) ; 流速: 0. 8mL·min －1 ; 采用外标法。结果 在浓度 0. 501 ～ 4. 008mg·mL －1范围线性良好，相关系数 r =
0. 999。平均回收率为 99. 07%，ＲSD = 1. 07% ( n = 5) 。结论 本法简便、准确，可作为枇杷花中熊果酸的含量测定。
关键词:枇杷花;熊果酸 ; 含量测定
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-08-0097-01
作者简介:郑俊平，女(1970，9 －)。毕业于漳州卫生学校。职称:主
管中药师。从事中药调配，药库管理工作。联系电话:18959531785
枇杷花系蔷薇科枇杷属植物枇杷的花，据《本草纲目》，
具有“止渴下气、利肺、止吐逆、去焦热、润五脏”以及“治头
风、鼻涕清涕”等功效〔1〕。枇杷叶是常用中药，关于其化学成
分含量研究较多，但对于枇杷花的化学成分含量研究较少，本
实验参考有关文献〔2〕，建立 HPLC 法测枇杷花中熊果酸的含
量，该法操作简便、快速，结果准确，现介绍如下:
1 仪器与试药
μLC-2010AT型高效液相色谱仪;SB2200-T 型超声波清
洗器;BS-210S型电子天平(德国) ;色谱柱 Hypersil GOLD C18
(200 × 4. 6mm，5μm) ;熊果酸对照品(中国药品生物制品检定
所，批号:110742-200516(含量测定用) ;枇杷花(福建莆田常
太，自制粉末 1 号，2 号，3 号) ;乙腈、甲醇均为色谱纯;其它试
剂为 AＲ。
2 方法和结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:Hypersil GOLD C18(200 × 4. 6mm，
5μm) ;流动相:乙腈-甲醇-0. 5%醋酸铵溶液(52 ∶ 18 ∶ 30) ;流
速:0. 8mL·min －1;检测波长:210nm。
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备:精密称取对照品 100. 2mg，置
20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成含熊果酸
5. 01mg·mL －1的对照品溶液。
2. 2. 2 供试品溶液的制备:精密称定样品(1 号)3. 0011g，置
具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50mL，超声处理(功率 300W，
频率 25kHz)60min，摇匀，滤过，蒸干，用甲醇溶解置于 5mL量
瓶至刻度，用 0. 45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2. 2. 3 阴性对照溶液的制备:不含枇杷花药材制备阴性对照
溶液。取上述对照品溶液 1mL 定容于 5mL 量瓶中摇匀，用
0. 45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。分别取对照品溶液、
样品溶液、阴性对照溶液均进样 20μL，分别记录色谱图(图
1A、B、C)。
2. 3 标准曲线的制备 分别取上述对照品溶液 0. 5，1，2，3，
4mL用甲醇定容于 5mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度。按上述
色谱条件，分别进样 20μL，以熊果酸浓度为横坐标、峰面积为
纵坐标绘制标准曲线，回归方程:A = 10468893C － 138414. 9，r
= 0. 999，结果表明熊果酸浓度在 0. 501 ～ 4. 008mg范围内，与
峰面积呈良好的线性关系。
2. 4 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，进样 5 次，测
定峰面积，ＲSD = 0. 36%(n = 5)。结果表明精密度良好。
图 1
A 熊果酸对照品图谱 B 供试
品溶液图谱 C 阴性对照溶液
图谱
2. 5 稳定性试验 取同一样
品溶液，于 0、3、6、12、24h间隔
时间测定 1 次，ＲSD = 0. 38%。
结果表明样品溶液在 24h 内
稳定。
2. 6 重复性试验 精密吸取
同一样品(1 号)5 份，按样品
溶液制备和测定项下方法，分
别测定含量，试验结果 ＲSD =
0. 55%(n = 5)。结果表明重复性良好。
2. 7 加样回收率测定试验 取已知样品(1 号)含量，精密加
入上述对照品溶液(5. 01mg·mL －1)1mL，按样品溶液制备方
法制得供试品溶液 5 份，在上述色谱条件下，进行测定，计算
加样回收率(见表 1)。
表 1 回收率测定结果 (n = 5)
序号 样品含量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
ＲSD
(%)
1 4. 94 5. 01 9. 73 97. 76
2 4. 91 5. 01 9. 88 99. 56
3 5. 02 5. 01 9. 86 98. 42 99. 07 1. 07
4 5. 03 5. 01 10. 09 100. 52
5 5. 08 5. 01 10. 0 99. 08
2. 8 样品含量测定 精密称定各样品号，按样品溶液制备方
法制备，在上述色谱条件下，进行含量测定。熊果酸含量(mg
·g －1)分别为 1. 41，1. 48，1. 50，ＲSD%分别为 0. 52，0. 63，0. 68。
3 小结
本文参考有关文献〔1〕，进行流动相选择，获得了分离效
果好，操作简单、结果准确，重现性好的方法，可作为枇杷花中
熊果酸的含量测定。
参考文献
〔1〕明，李时珍撰 .《本草纲目》第五册，十八，卷三十，果部〔M〕. 商务
印书馆，93.
〔2〕国家药典委员会编 . 中华人民共和国药典 2010 年版一部〔S〕. 北
京:化学工业出版社，2010，191.
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 8 2013